WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

Pages:   || 2 |

«МАЗМНЫ – СОДЕРЖАНИЕ БИОЛОГИЯЛЫ ЫЛЫМДАР Алтаева Н.З., Жапбасов Р.Ж. Уран ндіретін ірде мекендейтін тышан тріздес кемірушілер оршаан ...»

-- [ Страница 1 ] --

МАЗМНЫ – СОДЕРЖАНИЕ

БИОЛОГИЯЛЫ ЫЛЫМДАР

Алтаева Н.З., Жапбасов Р.Ж. Уран ндіретін ірде мекендейтін тышан

тріздес кемірушілер оршаан ортаны биоиндикаторы

Мустафин Б.М. Химиопрепараты против бруцеллеза животных

Акбаева Л.Х. Физико-химическая характеристика воды реки Ишим и

биоразнообразие перифитона водоема

Калиева А.Р. Боровиков С.Н. Сравнительная характеристика серологических и молекулярно- генетических методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота

Сармурзина З.С., Ануарбекова С.С., Кирибаева А.К., Алмагамбетов К.Х.

Изучение морфолого-культуральных и биохимических свойств бацилл, выделенных из различных экологических ниш

Кобетаева Н.К., Акбаева Л.Х. Биоиндикация загрязнения реки Ишим с помощью ихтиофауны

Уразбаев Ж.З. Пищевая ценность крови убойных животных

Белялова А.Р., Мукантаев К. Н. Выделение вируса лейкоза из культуры клеток FLK методом ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы

БИОИНДИКАЦИЯ ЗАГРЯЗНЕНИЯ РЕКИ ИШИМ С ПОМОЩЬЮ

ИХТИОФАУНЫ

Н.К. Кобетаева, ст. преподаватель, Л.Х. Акбаева, к.б.н.

ЕНУ им. Л.Н. Гумилева Река Ишим является наиболее крупным притоком Иртыша. Длина реки Ишим составляет 2450 км. На ней расположено несколько крупных городов, в том числе и столица Казахстана - Астана. Ежегодный сброс сточных вод в реку и ее притоки постоянно возрастает. Несмотря на значимость реки для хозяйственной деятельности человека и формирования бассейновых ландшафтов, биоценотические нарушения изучены в недостаточной мере.



Комплексная оценка состояния водной биоты, ее прогностическая ценность может быть надежно осуществима на основании детальных характеристик основных компонентов гидробиоценоза: микробиоты, фито- и зоопланктона, фито- и зообентоса, а также – состояния жизненно-важных органов представителей рыб разных экологических групп.

Являясь наиболее уязвимым элементом биосферы, водные экосистемы особенно чувствительны к различным проявлениям антропогенного воздействия. Для их мониторинга и ориентировочного прогноза динамики целесообразно использование чувствительных видов – биоиндикаторов. К таким видам относятся наиболее высокоорганизованные представители гидробиоценозов – рыбы [1]. Именно рыбы, являясь конечным звеном трофических цепей, кумулируют огромное количество токсикантов различной природы. А органы, ответственные за выполнение тех или иных функций, могут служить важными индикаторами морфо-функционального состояния не только отдельной особи, но и популяции в целом [2].

В связи с этим, в работе была поставлена задача: изучить наиболее значимые виды рыбного населения реки Ишим с целью использования их в качестве биоиндикаторов загрязнения водоема.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Рыбная ловля производилась на удочку, оснащенную проводочной катушкой, леской 0,15мм, крючком №3,5 и легким поплавком. В качестве наживки использовались: Личинки жука короеда, дождевые черви, хлебный мякиш и слепни.

Изъятые органы плотвы и окуня фиксировались в смеси Буэна.

Гистологические срезы изготавливались по общепринятой методике (Ромейс,1953). Полученные срезы половых желез, печени и жабр толщиной 5-6 мкм окрашивались железным гематоксилином по Гейденгайну и изучались под микроскопом при увеличении ок.10х, об. 10х, 20х, 40х.





Анализы проб различных видов рыб на содержание тяжелых металлов в разных органах, выловленных в реке Ишим. Образцы мышечной ткани, жабр и печени рыб были приготовлены стандартными методами. В пробах рыб определяли содержание валовых форм кадмия, свинца, цинка и меди методом инверсионной вольтамперометрии по методике МУ № 31-04/04 ФР.1.31.2004.00986. По результатам анализа нами были составлены ряды убывания среднего содержания металлов в различных органах рыб (печень, мышцы, жабры) [3].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Главной причиной снижения уловов в реке Ишим в настоящее время считается значительное антропогенное воздействие, оказываемое сельскохозяйственными объектами, неочищенными сбросами промышленных предприятий и ливневыми сточными водами с селитебных территорий, накопителями городских и промышленных сточных вод, (в основном – золоотвалами ТЭЦ), но также и чрезмерный вылов рыбы.

По данным отчетов лаборатории мониторинга загрязнения природной среды г. Астаны центра гидрометеорологии РГП «Казгидромет» за период 1999

– 2006 гг. гидрохимический состав воды реки Ишим периодически показывает превышение в ней ПДК нефтепродуктов, синтетических детергентов, сульфатов, железа, меди.

По объему загрязнения и потенциальной биологической и экологической опасности все большее значение приобретают тяжелые металлы, пестициды различной природы, продукты различных химических производств.

Предполагается, что обнаруженные в речных рыбах ароматические углеводороды играют значительную роль в развитии стресса, снижают устойчивость их к паразитам. Обсуждая влияние нефти на обмен веществ у рыб, Dange [4] предполагал, что нефть вызывает стрессовое состояние, нарушая жаберный эпителий и включая анаэробные пути окислительного метаболизма.

Многие полициклические ароматические углеводороды обладают канцерогенными свойствами. В опытах с гуппи было установлено [5] (Hawkins, 1989), что после короткого воздействия относительно низких доз растворенного 7,12-диметилбенз( )антрацена, у рыб быстро возникали печеночные и внепеченочные опухоли. Рядом других авторов [6,7,8] показана высокая токсичность солей цинка, свинца, меди, железа, а также компонентов бытовых сточных вод, среди которых особенно опасны детергенты. Многие загрязнители могут вызывать нарушения на клеточном уровне. Показано [9] увеличение доли митотических аномалий у рыб из наиболее загрязненных мест обитания.

Морфологическое и гистологическое изучение внутренних органов рыб показало наличие патоморфологических изменений в виде асимметрии развития гонад, жировой дистрофии почек и печени, дегенеративных поражений сердечной мышцы, клеток головного мозга, цирротических разрастаний соединительной ткани, гиперемия и разрушение жаберных лепестков, слущивание жаберного эпителия, разрыв мышечных волокон [10, 11, 12, 13, 14, 15,16].

В качестве основного метода анализа авторами [2] предлагается гистологический, т.к. он является достаточно чувствительным, информативным и фотодокументальным. Наибольшее значение он имеет для диагностики состояний в раннем онтогенезе и изучения отклонений от нормального развития, позволяет установить характер и степень выраженности патоморфологических проявлений; предоставляет полноценную информацию для комплексной оценки происходящих в организме процессов.

При описании гонад авторы [2] рекомендуют учитывать состояние половых клеток разных генераций, их относительное количество, характер и величину возможных нарушений (резорбцию половых клеток, дегенерацию стромы половых желез, задержку в развитии половых клеток или замедление репарационных процессов в посленерестовый период).

Характеристика печени дается с учетом общего состояния органа, характера васкуляризации (относительное количество капилляров на единицу площади) или гиперемии (кровенаполнение участка органа за счет расширения просветов кровеносных сосудов); состояния гепатоцитов: степени базофилии цитоплазмы, количества и размеров липидных включений.

Оценка состояния жаберного аппарата осуществляется по числу клеточных слоев жаберного эпителия (так называемая дистанция “кровь-среда”) на жаберных лепестках (филаментах), относительной длине и толщине вторичных филаментов (респираторных ламелл), частоте их распределения на жаберных лепестках и степени соприкосновения ламелл соседних филаментов.

Нарушения, выявленные на гистологическом уровне, безусловно, сказываются и на популяционных характеристиках видов, выбранных в качестве биоиндикаторов.

В реке Ишим обитают главным образом представители бореальноравнинного фаунистического комплекса. К нему относятся щуковые (щука), карповые (плотва, язь, лещ, пескарь, гольян, линь, серебряный карась), из трескообразных налим и окуневые (окунь, ерш, судак) рыбы. Однако одновременно с ними еще встречаются и вселенцы - представители арктического пресноводного фаунистического комплекса, такие как сиговые (пелядь, рикус, сиг). В последние десятилетия, вследствие продолжающегося антропогенного давления на северные экосистемы, наблюдается интенсивное замещение сиговых рыб представителями бореально-равнинного комплекса.

Использование в качестве биоиндикаторов сиговых рыб, как наиболее чувствительных компонентов северных экосистем, по-видимому, будет не вполне приемлемо для биоиндикации водных систем в разных широтах. С одной стороны, в естественном состоянии они характерны для северных районов, с другой – их численность сокращается, а в отдельных водоемах катастрофически падает.

В противоположность сиговым, карповые и окуневые распространены повсеместно. Кроме того, необходимо учитывать их экологические характеристики – распределение, типы питания и размножения. Так язь, и ерш по типу питания являются зообентофагами и живут в реках. Окунь – хищник, а в 1-2-летнем возрасте преимущественно зообентофаг, плотва – бентофаг и, частично, фитоперифитонофаг. Оба вида обитают в реках лесостепной зон, где большая часть озер являются окунево-плотвичными.

Оценка состояния индикаторных органов у рыб в реке Ишим, позволяет говорить о некотором их угнетении, особенно это характерно для участка реки в центральной части города, где характер и глубина нарушений репродуктивной функции самок, печени и жаберного аппарата у рыб обоих полов несколько возрастала. У плотвы и окуня встречались следующие патоморфологические изменения: в жабрах (относительная неравномерность длины и толщины вторичных филаментов - респираторных ламелл), в яичниках (асимметрии развития гонад, резорбция половых клеток), в печени (жировая дистрофия печени).

Изучение концентрации металлов в тканях рыб проводили с учетом двух основных путей поступления тяжелых металлов в организм рыб: с пищей (алиментарное) и через покровы тела (парентеральное).

Поэтому накопление металлов происходит либо в тканях рыб, непосредственно контактирующих с водой (кожа и жабры), либо во внутренних органах, обеспечивающих экскреторные функции (печень и почки).

Содержание меди и цинка в печени практически во всех исследуемых видах рыб, выловленных в реке Ишим, было выше, чем содержание меди и цинка в мышцах. Это объясняется тем, что печень рыб является функциональным депо ряда металлов, и, прежде всего, меди.

Содержание меди в печени окуня (13,7 мг/кг) превышает ПДК (10 мг/кг).

Превышение допустимого содержания цинка (ПДК = 40 мг/кг) в печени и мышцах массовых видов рыб реки Ишим не обнаружилось.

Полученные в результате анализа в 2010 г. данные по содержанию металлов в органах рыб показали, что содержание меди в печени леща несущественно превысило ПДК (10 мг/кг) – 11,07 мг/кг.

Также наблюдается превышение ПДК содержания кадмия (0,2 мг/кг) в 2 раза в печени окуня (0,5 мг/кг) и цинка (40 мг/кг) в 7,5 раз в печени карася (310 мг/кг) и окуня (141 мг/кг) в 3,5 раза. Однако, концентрация кадмия может превышать ПДК для печени в 2-4 раза, но это не является следствием загрязнения организма, а отражает естественные процессы аккумулирования кадмия в печени в течении всей жизни. Превышение содержания свинца по ПДК не выявлено.

Для печени нами построен следующий ряд по убыванию среднего содержания металлов в печени рыб реки Ишим: Zn Cu Pb Cd.

Многие исследователи указывают, что мышцы рыб благодаря большой массе играют значительную роль в накоплении тяжелых металлов, хотя и занимают среднее место по их содержанию.

Из полученных результатов видно, что металлы (кадмий, свинец) в больших количествах накапливаются в печени, нежели в мышцах. Содержание свинца во всех пробах не превышает ПДК (1 мг/кг). Содержание кадмия в печени плотвы (0,25) и леща (0,32) незначительно превышает ПДК для пищевых продуктов (0,2). Содержание никеля в печени плотвы (2,38) намного превышает ПДК (0,5).Содержание определяемых металлов в мышцах во всех пробах 2010 года по результатам анализа не превышает ПДК, исключение – незначительное превышение цинка (44 мг/кг) в мышцах карася (ПДК – 40 мг/кг).

Для мышц нами выявлен следующий ряд по убыванию среднего содержания металлов в мышцах рыб: Zn Cu Pb Cd.

Жабры рыб имеют способность извлекать из воды не только растворенный кислород, но еще и целый ряд ионов (кальций, натрий, магний).

Сорбируются из воды и такие биогенные микроэлементы, как железо, медь, марганец, цинк. При слишком высоком содержании микроэлементов в воде они накапливаются в организме в избыточных концентрациях и вызывают отравление.

По результатам анализа ишимской рыбы (2010 год) выявлено превышение содержания: кадмия (ПДК – 0,2 мг/кг) в несколько раз жабрах окуня (0,72) и плотвы (1,1); свинца (ПДК – 1 мг/кг) в 3 раза в жабрах плотвы (3,3); цинка (ПДК

– 40 мг/кг) во много раз в жабрах карася (350), плотвы (265) и окуня (58). Такое высокое содержание металлов можно объяснить высоким содержанием данных элементов в воде, а также тем, что жабры – наружный орган, и концентрация в них металлов может быть выше, чем во внутренних органах (т.е. характерен более интенсивный метаболизм). При поступлении микроэлементов в жабры происходит их перераспределение в организме, и они концентрируются в основном в печени.Ряд по убыванию среднего содержания металлов в жабрах рыб аналогичен ряду убывания металлов для печени и мышц: Zn Cu Pb Cd.

Таким образом, по результатам исследований органы и ткани гидробионтов по способности к аккумуляции микроэлементов группы тяжелых металлов были расположены нами в следующий ряд: печень жабры мышцы.

В ходе исследований нами также были получены ряды по убыванию среднего содержания металлов в жабрах, мышцах и печени рыб реки Ишим: Zn Cu Pb Cd.

Содержание тяжелых металлов в органах и тканях исследуемых видов рыб в целом не вызывает особых опасений в виду употребления их в пищу, исключение составляет повышенное содержание кадмия и цинка в печени и жабрах некоторых видов рыб (плотва, окунь, лещ).

Обнаруженные аномалии в органах могут быть следствием повышенного содержания в реке тяжелых металлов, фосфорорганических соединений, инсектицидов, синтетических детергентов и т.д. Репродуктивная система становится подверженной воздействию токсикантами опосредованно, через нарушение гормонального статуса организма или вследствие его общей интоксикации – через кровь.

Таким образом, из рассмотренных видов рыб плотва (Rutilus rutilus) и окунь (Perca fluviatilis) с учетом состояния их жизненно важных органов – наиболее показательные виды гидробиоценозов озерно-речных систем лесостепной природно-климатической зоны для биоиндикации. При этом морфологические характеристики жаберного аппарата и печени предоставляют репрезентативный материал относительно функционального состояния особей в тот или иной период жизненного цикла, тогда как состояние гонад является важным индикатором репродуктивной потенции вида, своеобразным критерием его адаптационной пластичности.

Литература

1. Лукьяненко В.И. Общая ихтиотоксикология. М.:Легкая и пищ.

промышленность.1983.320 с

2. Методика комплексной оценки состояния сообществ и популяций доминирующих видов или видов-индикаторов мелких млекопитающих, амфибий и рыб. Тюмень: ТюмГУ, 2005. – 94 с

3. Говоркова Л.К. Выявление факторов накопления тяжелых металлов в органах рыб различных трофических групп (на примере Куйбышевского водохранилища): автореферат на соиск. кандид. биол. наук: 03.00.16./ Говоркова Л.К. – Казань, 2004. 21 с

4. Dange A., Masurekar V. Naphtaline neinduced changes in carbohydrate metabolism in Sarotherodon mossambicus Peters (Pisces; Cichlidae) // Hydrobiologia.

1982. Vol. 94. №2. P. 163-172

5. Hawkins W., Walker W., Lytle J. Careinogenic effecte of 7,12dimethylbenz()antracene on the guppe (Poecilia reticulata Z.) // Aquat. Toxicol.

1989. Vol. 15. №1. P. 63-89

6. Черняев Ж.А. Воспроизводство байкальского омуля. М.: Легкая и пищевая пром-ть. 1982. 127 с

7. Кудрявцева Л.П., Моисеенко Т.И. Закономерности распределения тяжелых металлов в органах и тканях сигов из различных водоемов Кольского Севера. Апатиты. 1988. С. 89-94

8. Ramamurthi R., Usha Rani A. Histopatologycal alterations in the river of freshwater the least Tilapia mossambica in resporse to cadmium toxicity // Ecotoxicol.

and Environ. Safety. 1989. №2. P. 221-226

9. Longwell A. C., Chang S., Hebert A., Hughes J. B., Perry P. Pollution and developmental abnormalities of Atlantic fishes // Environ Biol. Fish. 1992. Vol. 35.

№1. P. 1-21

10. Зайцев В.Ф., Федорова Н.Н., Крючков В.Н., Ложниченко О.В.

Патология органов и тканей рыб Волго-каспийского бассейна в условиях антропогенной деятельности // Наука – прудоводству. 2001. №6. С. 27

11. Каниева Н.А., Антонова Л.А. Воздействие диэтаноламина на некоторые физиолого-биохимические и гистологические показатели сеголеток карпа. Астрахань. 1989. С. 80-81

12. Кокуричева М.П. О токсическом действии загрязнений водоемов на рыб // Сб.научн.тр. ГосНИОРХ. 1979. Вып. 144. С. 147-156

13. Савваитова К.А., Чеботарева Ю.В., Пичугин М.Ю., Максимов С.В.

Аномалии в строении рыб как показатели состояния природной среды // Вопр.

ихтиологии. 1995. Т. 35. Вып. 2. С. 182-188

14. Сагайдачный А.А., Самылин А.Ф. Реакция рыб на острую интоксикацию метилацетатом // Актуальные проблемы биологии и рационального использования природных ресурсов. Петрозаводск. 1989. С. 78Jagoe C. H., Haines T. A. Changes in gill morphology of Atlantic salmon (Salmo salar) smolts due to addition of acid and aluminum to stream water // Environ.

Pollut. 1997. Vol. 97. № 1-2. P. 137-146

16. Khan R.A. Influence of petroleum at a refinery terminal on feral winter flounder, Pleuronectes americanus // Bull. Environ. Contam. and Toxicol. 1998. Vol.

61. №6. P. 770-777 Резюме В работе анализируются биоиндикационные возможности ихтиофауны реки Ишим. Из рассмотренных видов рыб Rutilus rutilus и Perca fluviatilis с учетом состояния их жизненно важных органов – наиболее показательные виды для биоиндикации загрязнения гидробиоценозов озерно-речных систем лесостепной природно-климатической зоны. При этом морфологические характеристики жаберного аппарата и печени предоставляют наиболее репрезентативный материал относительно функционального состояния особей в тот или иной период жизненного цикла, тогда как состояние гонад является важным индикатором репродуктивной потенции вида, своеобразным критерием его адаптационной пластичности.

Тйін

Жмыста Есіл зеніні ихтиофаунасыны биоиндикациялы ммкіндіктері талданды. арастырылан балы трлерінен Rutilus rutilus и Perca fluviatilis оларды тіршілік шін маызды мшелеріні жадайын ескере отырып

– орманды далалы табии климатты зонаны клді-зенді гидробиоценозыны биоиндикациясы шін крсеткіш болатын трлер зерттелді. Осыан байланысты желбезек аппаратыны жне бауырды морфологиялы сипаттамасы особьтарды дл сол немесе баса кездегі тіршілік цикліні функциональды жадайына сай репрезентативті материал, ал гонаданы жадайы трді репродуктивті потенциясыны маызды индикаторы жне оны бейімделушілігіні негізгі критериі бала алатындыы аныталды.

Summary

In work bioindicator opportunities ihtiofauna the rivers Ishims are analyzed.

From the considered speciales of fishes Rutilus rutilus and Perca fluviatilis in view of a condition of their vital bodies - the most indicative kinds for bioindication of pollution hydrobiocenozes lake-river systems of a forest-steppe nature-climatic zone.

Thus morphological characteristics of the branchiate device and a liver give the most representative material concerning a functional condition of individuals during this or that period of life cycle whereas the condition гонад is the important indicator of a reproductive potentiality of aspecial, original criterion of its adaptable plasticity.

ИЗУЧЕНИЕ МОРФОЛОГО-КУЛЬТУРАЛЬНЫХ И

БИОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ БАЦИЛЛ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ

РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ НИШ

Сармурзина З.С., Ануарбекова С.С., к.м.н., Кирибаева А.К., Алмагамбетов К.Х., д.м.н., профессор ДГП «Республиканская коллекция микроорганизмов»

По современным представлениям, аэробные спорообразующие бактерии, или бациллы, объединяются в отдельный род Bacillus семейства Bacillaceae.

Этот род, включающий много разнообразных видов, имеет ряд характерных особенностей и отличается от других бактериальных организмов комплексом морфолого-физиологических признаков, из которых наиболее важными является палочковидная форма клеток, способность образовывать эндоспоры, потребность в свободном кислороде для роста [1].

Культивирование микроорганизмов является одним из основных методов микробиологии. Оно основано на знании метаболизма микроорганизмов и понимании значения физико-химических условий среды, необходимых для их жизнедеятельности. Для роста микроорганизмов существенное значение имеют не только состав питательной среды, но и такие факторы, как кислотность среды, аэрация, температура, свет, влажность. Развитие микроорганизмов возможно лишь в определенных пределах каждого фактора, причем для различных групп микроорганизмов эти пределы часто неодинаковы [2].

Целью данной работы явилось изучение морфолого-культуральных и биохимических свойств бацилл, выделенных из различных экологических ниш.

Материалы и методы В качестве объектов исследования были использованы 48 изолятов бацилл, выделенные из различных источников окружающей среды (почва, зерновые отходы, мука, хлеб, сточные воды мясокомбината, канализационные трубы, речная вода, экстракты цветов календулы и осота полевого, различные сорта винограда, кисломолочные продукты домашнего изготовления: сметана, кефир, сыр и творог).

Выделение культур бацилл [3] из природных источников осуществляли, отбирая 10 г материала с последующим посевом на элективные питательные среды по методу Гоулда. Выделение культур бацилл из канализационной и речной воды осуществляли отбором проб воды (1 л) с соблюдением правил асептики в стеклянную стерильную посуду с ватно-марлевыми пробками. Далее высевали на чашки с элективными питательными средами по методу Гоулда. В качестве элективных питательных сред использовали мясопептонный агар (МПА), сусло-агар, среду Громыко. Чашки инкубировали при 29 °С и 37 °С.

Через 3-5 суток инкубации проводили отбор колоний с характерными признаками для бацилл.

Для оценки культуральной характеристики исследуемые изоляты выращивали на плотных питательных средах (МПА, сусло-агар, среда Громыко и L-агар) и жидких средах (L-бульон и питательный бульон).

Для оценки морфологической характеристики окраску бактерий производили по Граму и Ожешко.

Характеристика физиолого-биохимических особенностей включает использование различных соединений углерода, отношение к молекулярному кислороду и проявление ферментативной активности в отношении определенных субстратов.

Определение роста при различных температурах определяли в интервале от 5 до 45 °С. Оптимальную температуру роста определяли визуально.

Отношение к солености проводили при культивировании на питательном бульоне с различным содержанием хлорида натрия (5%, 7%, 10%) [2, 4-10].

Результаты и обсуждение В ходе выполнения работы нами изучено 48 изолятов бацилл, выделенные из различных источников окружающей среды, у них же изучены морфологокультуральные и биохимические свойства.

Характерные особенности представителей рода Bacillus являются грамположительные, подвижные палочковидные бактерии, с округлыми концами, в редких случаях концы палочек обрезанные, располагаются одиночно, в виде цепочек и скоплениями. Образуют эллипсовидные или сферические эндоспоры, расположенные центрально, терминально и субтерминально. При росте на твердых питательных средах образуют выпуклые или плоские, тусклые колонии, слегка или сильно морщинистые с шероховато-складчатой поверхностью неправильной формы, в основном, колонии R–типа, иногда встречаются и слизистые колонии.

Колонии имеют различные размеры – от точечного до крупного. На жидких питательных средах бациллы образуют хлопьевидный, комковатый осадок, наблюдается помутнение среды разной степени и на поверхности среды образуется пленка. Пленка может быть слегка или сильно морщинистая, плотная или нежная. Появление пленки совпадает со спорообразованием, а отсутствие этого признака может быть использовано для выявления аспорогенных вариантов культур бацилл. Каталазоположительны, разлагают различные сахара.

Выделенные нами изоляты в большинстве хорошо растут на МПА, среде Громыко, L-агаре, менее, чем на среде сусло-агар. У изолятов Bacillus sp. Zb 3, Zb 9, Zb 23, Zb 25, Zb 30, Zb 31, Zb 112, Zb 55, G3, G 4, G 9, G 18, G 26, G 27 и G 29 рост на среде сусло-агар отсутствует.

Выделенные бациллы на твердых питательных средах образуют выпуклые или плоские, блестящие колонии от беловато-серого до коричневого цвета, слегка с приподнятой складчатостью, поверхность гладкая или морщинистая, правильной и неправильной округлой формы, края колоний ровные, встречаются неровные, изрезанные. Размеры варьируют от точечных до гигантских (до 10 мм), однородной структуры.

Изоляты Bacillus sp. Zb 9, Zb 17, Zb 25, Zb 31, Zb 70, Zb 22, Zb 82, G 4, G 9 на МПА, сусло-агаре, Громыко и L-агаре образуют колонии неправильной формы, плоские, морщинистые. Размеры варьируют от больших до гигантских (5-10 мм), края колоний могут быть волнистыми и слаборизоидными, однородной структуры.

При оценке культуральной характеристики исследуемых изолятов на жидких питательных средах сильное помутнение бульона, обильный хлопьевидный осадок наблюдается на среде L-бульон. Умеренное помутнение бульона, умеренный осадок наблюдается на питательном бульоне. При развитии на жидких средах у изолятов Bacillus sp. G7, G10, G12, G13, G15, G17, G25, Zb 4, Zb 105, Zb 82 и Zb 60 обнаруживается тенденция к образованию поверхностной пленки (тонкая или толстая морщинистая).

У всех изученных изолятов отмечен рост при 5%-й NaСl, за исключением Bacillus sp. G 25, G 26, G 27 и G 29. У изолятов Bacillus sp. Zb 4, Zb 9, Zb 82, Zb 105, Zb 112 наблюдается рост при 7%-й NaСl. Изоляты Bacillus sp. Zb 60, Zb 66, Zb 67, Zb 82, Zb 112, G 7, G 10, G 12, G 14, G 17, G 23 растут и при 10%-й NaСl.

Все исследуемые изоляты каталазоположительны, по отношению к оксидазе в основном положительны (рисунок 1), за исключением изолятов Bacillus sp. Zb 3, Zb 9, Zb 13, Zb 17, Zb 22, Zb 31, Zb 32, Zb 70, G6, G8 и G17.

Глюкозу усваивают все исследуемые изоляты, за исключением Bacillus sp. G 2, 4, G 9, G 20, G 26 и G 28.

Рисунок 1 – Оксидазный тест

Реакция на фенилаланин и тирозин – отрицательная, желатину не разжижают, редукции нитратов, дезаминирование фенилаланина не наблюдается.

Не обладают лецитиназной и плазмокоагулазной активностью. Индол не образуют, образуют сероводород Bacillus sp. G 2, G 3, G 5, G 6, G 7, G 8, G 9, G 18, G 19, G 20, G 26, G 28, G 29. Гидролиз мочевины наблюдается у Bacillus sp.

Zb 25, Zb 30, Zb 32, Zb 52, Zb 56, Zb 66, Zb 68, Zb 70, Zb 80, Zb 82, G3, G 5, G 7, G 8, G 19, G 26, G 27 и G 29. Признаки ферментации арабинозы, галактозы, дульцита, ксилозы, лактозы, мальтозы, маннозы, маннита, рибозы, сахарозы, сорбитола и фруктозы были вариабельны для всех изолятов (рисунок 2).

Рисунок 2 — Ферментация сахарозы Заключение Собрав воедино сведения по морфо-культуральным и ферментативным свойствам изученных нами изолятов бацилл, сделан вывод о том, что данные объекты имеют характерные признаки различных видов Bacillus.

Грамположительные палочки с закругленными концами, образуют эллиптические споры с центральным расположением, вызывают гидролиз крахмала, казеина, редукцию нитратов, метиленовой сини, разжижение желатины. Каталазоположительны, реакция Фогес-Проскауэра положительная.

Максимальная температура роста 45-55 oC, минимальная 5-20 oC. Не образуют индол и сероводород. Расщепляют глюкозу до кислоты и ацетоина. Образуют кислоту из ксилозы, арабинозы, мальтозы, галактозы, рибозы. Растут при 5%, 7% и 10%-й концентрации NaCl. Эта обобщенная картина соответствует признакам Bacillus subtilis.

Следующие полученные результаты соответствуют характеристике виду Bacillus pumilus. Грамположительные палочки, образуют эллиптические споры с центральным расположением. Вызывают гидролиз гиппурата, казеина, мочевины, разжижение желатины. Каталазоположительны, реакция ФогесПроскауэра положительная. Максимальная температура роста 45-50 oC, минимальная 5-15 oC. Расщепляют глюкозу до кислоты и ацетоина. Растут при 7%-й концентрации NaCl.

Bacillus licheniformis характеризуются грамположительными палочками, образующие эллиптические споры с центральным расположением. Вызывают гидролиз крахмала, казеина, редукцию нитратов, разжижение желатины.

Каталазоположительны, реакция Фогес-Проскауэра положительная.

Максимальная температура роста 50-55 oC, минимальная 15 oC. Расщепляют глюкозу до кислоты и ацетоина, в некоторых случаях - до газа. Образуют кислоту из ксилозы, арабинозы, мальтозы, галактозы, рибозы. Образует газ из нитратов в анаэробных условиях. Растут в анаэробных условиях и при 7%-й концентрации NaCl.

Такие признаки наблюдаются у большинства изолятов бацилл, выделенных нами из различных источников.

Таким образом, по результатам проведенного фенотипического анализа 17 выделенных изолятов отнесены к виду Bacillus subtilis, 7 изолятов – к виду Bacillus licheniformis, 5 изолятов – к виду Bacillus pumilus. 19 выделенных изолятов определены как виды с неясным систематическим положением.

Литература

1. Африкян Э.Г. Аэробные спорообразующие бактерии и их энтомопатогенные свойства: Автореф. дисс. докт. биол. наук.- Москва – 1970. – 38 с

2. Практикум по микробиологии: Учеб. пособие для студ. высш. учеб.

заведений / Под ред. Нетрусова А.И. – М.:Академия, 2005. – 608 с

3. Теппер Е.З., Шильникова В.К., Переверзева Г.И. Практикум по микробиологии / Под ред. В.К. Шильниковой. – 5–е изд., перераб. и доп. – М.:

Дрофа, 2004. – 256 с

4. Руководство к практическим занятиям по микробиологии под редакцией Н.С. Егорова. – М.:Издательство Московского университета, 1985. - С. 122-128

5. Определитель бактерий Берджи / Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П.

Смита и др. - М.:Мир, 1997. – В 2 томах. – 800 с

6. Смирнов В.В., Резник С.Р., Сорокулова И.Б. Методические рекомендации по выделению и идентификации бактерий группы B. subtilismesentericus из организма. – 150 с

7. Методические рекомендации по выделению и идентификации бактериальной группы B. subtilis-mesentericus из организма человека и животных / Под ред. В.В. Смирнова. – Киев:Наукова думка, 1982. - С. 3-25

8. Желдакова Р.А. Выделение и идентификация микроорганизмов: Учебнометодическое пособие для студентов G 310101 «Биология» специализация - G 310101 – 0206 «Микробиология».- Минск, 2003. – 20 с

9. Борисова А.Б. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии.

- М.:Медицина, 1979. – С. 58

10. Бабаева Т.А. Морфолого-культуральные и физиологические свойства спорообразующих бактерий / Уч. зап. Азерб. ун-та, серия биол. наук – 1973. С. 22-28 <

Резюме

В статье представлены результаты изучения фенотипических свойств бацилл, выделенных из различных экологических ниш. Описана культуральная и морфологическая картина как на твердых агаризованных средах (мясопептонный агар, сусло-агар, Громыко), так и на жидких питательных средах (питательный бульон, L-бульон). Изучены физиолого-биохимические свойства, включающие использование различных соединений углерода, отношение к температуре, различной концентрации NaCl и проявление ферментативной активности в отношении определенных субстратов. В результате проведенных исследований выделенные изоляты отнесены к различным видам Bacillus sp.

Тйін Осы маалада трлі экологиялы блшектерден блініп алынан бациллаларды фенотиптік асиеттерін зерттеу нтижелері крсетілген. Агарлы атты оректік орталарда да (етпептонды агар, сусло-агар, Громыка ортада) сйы оректік орталарда да (оректік сорпа, L-сорпа) морфологиялы жне даылды су кескіндері суреттелген. Температураа, NaCl р илы концентрациясына атысы жне белгілі бір субстрата атысты ферментативті белсенділікті байалуы, р илы кміртек осылыстары олданылатын физиология-биохимиялы асиеттері зерттелген. Жргізілген зерттеуді нтижесінде блініп алынан изоляттар Bscillus sp. р илы трлеріне жатызылды.

Summary

The results of bacilli phenotypical properties which are isolated from different ecological niches are presented in this article. Cultural and morphological picture of both solid nutrient agar (meat peptone agar, wort agar, Gromyko) and liquid nutrient medium (nutrient broth, L- broth) was described here. There were studied such aspects as physiological and biochemical properties, including utilization of various carbon formation, temperature relation, various NaCl concentration and fermentative activity appearance according to definite substrates. The results of research show that the isolates relate to various Bacillus sp.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СЕРОЛОГИЧЕСКИХ И

МОЛЕКУЛЯРНО- ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ

ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

Калиева А.Р. магистрант, Боровиков С.Н. к.б.н., доцент КАТУ им. С. Сейфуллина Лейкоз крупного рогатого скота представляет собой системные злокачественные опухолевой природы заболевания кроветворных органов, наносящих животноводству большой экономический ущерб. Сходство клиникоморфологического проявления и механизма болезни у животных и человека дает основание считать, что лейкозы – опаснейшие заболевания и их относят к общебиологическим и социальным проблемам [1,2].

До настоящего времени основным и единственным методом борьбы с лейкозом крупного рогатого скота является выбраковка и изоляция инфицированных животных. Поэтому, эффективность оздоровления противолейкозных мероприятий (быстрое и радикальное устранение источника инфекции) зависит от ранней и достоверной диагностики. Инфицирование крупного рогатого скота вирусом лейкоза сопровождается выработкой специфических антител (в основном к антигенам gp51 и p24) в сыворотке крови и молоке животных, поэтому рутинная диагностика этой инфекции представлена иммунологическими реакциями, в основе которых лежит взаимодействие антиген-антитело [3].

В нашей стране, согласно утвержденным методическим указаниям по диагностике лейкоза крупного рогатого скота, диагностические исследования на лейкоз проводят гематологическими, серологическими (РИД, ИФА), молекулярно-генетическими (ПЦР), клиническими и патоморфологическими методами.

При этом основу диагностики лейкоза составляет серологический метод исследования – РИД. Однако наряду с надежностью и доступностью РИД обладает таким недостатком, как ограниченный диапазон чувствительности (выявление только преципитирующих антител) длительность постановки (не менее 2 суток) и невозможность автоматического учета результатов. Как показала практика, использование только РИД в качестве основного метода диагностики лейкоза не позволяет эффективно бороться с этой инфекцией.

В настоящее время разработаны и внедряются в практику диагностические тест- системы ИФА на основе различных вариантов. При проведении сравнительных испытаний по выявлению специфических антител к антигенам вируса лейкоза в сыворотке крови или молоке животных, отмечается более высокая чувствительность ИФА по сравнению с РИД [4,5].

Внедрение методов молекулярного анализа радикально расширило возможность изучения патогенеза инфекционных болезней и принципиально усовершенствовало диагностику. В этом плане полимеразная цепная реакция (ПЦР) становится все более распространенным методом, который оптимально сочетает высокую чувствительность и специфичность. Разрешающая способность тестсистемы для ПЦР во много раз превосходит прочие микробиологические и иммунологические методы и аналогична таковой для живых систем (биопроба на естественно восприимчивых животных). Высокая специфичность ПЦР достигается за счет увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе), что позволяет избежать проблем, связанных с перекрестными реакциями [6,7].

По мнению ряда ученых, реакция иммуннодиффузии в агаровом геле (РИД), имеет недостаточную специфичность, а исследования методом ПЦРанализа требуют наличия дорогостоящего оборудования и расходных материалов. В связи с этим, наибольшие перспективы для диагностики лейкоза крупного рогатого скота (ЛКРС) имеет иммуноферментный анализ (ИФА), который отличается высокой чувствительностью и специфичностью, возможностью одновременого исследования большого количества проб и приемлемой ценой [4].

Целью нашей работы являлось проведение сравнительной оценки серологических и молекулярно-генетических методов диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

Материалы и методы.

Исследования проведены в лаборатории научно-исследовательского института биотехнологии Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина.

В качестве объекта исследований была использована сыворотка крови крупного рогатого скота в количестве 129 проб. А также кровь крупного рогатого скота с содержанием ЭДТА для проведения исследований методом ПЦРанализа.

Для постановки РИД нами использовался коммерческий набор компонентов для диагностики лейкоза крупного рогатого скота, производства «Курской биофабрики» (РФ). Постановку реакции осуществляли согласно наставлению, а результаты учитывали через 48 часов инкубирования чашек Петри в термостате при 360С.

Для проведения непрямого варианта иммуноферментного анализа использовали коммерческий набор производства «DiaProfMed» (Украина) для серологической диагностики лейкоза, а для проведения полимеразной цепной реакции использовали коммерческую тест-систему для выявления провируса лейкоза КРС методом ПЦР-анализа (Россия). Постановку реакций осуществляли согласно наставлению по применению данных тест-систем и учету результатов.

Результаты исследований.

Пробы сыворотки крови были отобраны у двух групп животных из разных регионов страны и исследованы на наличие специфических антител в реакции иммунодиффузии и иммуноферментного анализа. Положительным результатом в реакции иммунодиффузии являлось наличие четкой полосы преципитации между антигеном и исследуемой сывороткой, а в иммуноферментном анализе – двукратное превышение показателей оптической плотности буферного раствора по сравнению с отрицательным контролем. Данные представлены на рисунке 1.

Примечание: окрашенные лунки – положительные пробы; неокрашенные - отрицательные.

<

Рисунок 1 - Результаты исследований проб методом иммуноферментногоанализа

Одновременно, кровь от животных первой группы была исследована методом полимеразной цепной реакции на наличие провируса ЛКРС. Фрагменты амплификации детектировали методом электрофореза в агарозном геле. Результаты оценивали по наличию или отсутствию на электрофореграмме специфических полос амплифицированной ДНК (рисунок 2).

Рисунок 2 - Результаты исследований проб методом ПЦР-анализа Результаты исследования проб от животных на лейкоз, проведенные серологическими и молекулярно-генетическими методами, представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Результаты сравнительных исследований серологическими и молекулярно-генетическими методами

–  –  –

Как видно из таблицы 1 специфические антитела были обнаружены с помощью РИД в 11 случаях, что подтверждалось образованием линии преципитации между данной сывороткой и антигеном. В результате исследований иммуноферментным методом оказалось 8 положительно реагирующих сывороток.

При постановке полимеразной цепной реакции были подтверждены положительные пробы в 10 случаях. При этом в обеих серологических тестах были обнаружены положительные пробы, которые не были подтверждены данными ПЦР-анализа. Более низкая чувствительность иммуноферментного теста в данном случае может быть обьяснена особенностями протекания инфекции - наличием большего количества преципитирующих антител, которые выявляются в реакции иммунодиффузии. Также этот факт может быть связан с особенностями конструирования ИФА-теста - использованием определенного вида антигена не позволяющего в данном случае выявлять антитела против всего разнообразия антигенных детерминант. Известно, что в серологической диагностике особое значение имеет чистота используемого антигена, поскольку именно этот факт обеспечивает специфичность анализа.

Во втором опыте из 100 исследованных проб сывороток по результатам РИД положительными оказались 2, тогда как в иммуноферментном анализе специфические антитела обнаруживались в 4 пробах. Результаты этого опыта полностью подтверждают сложившееся мнение о более высокой чувствительности иммуноферментного анализа по сравнению с реакцией иммунодиффузии.

Сравнивая полученные данные, можем сделать заключение о том, что тест- системы ИФА и ПЦР являются более чувствительными и специфичными методами диагностики лейкоза КРС по сравнению с РИД. Иммуноферментный анализ и полимеразная цепная реакция позволяют с высокой достоверностью одномоментно выявлять максимальное количество инфицированных лейкозом животных на самых ранних стадиях заболевания. Это может позволить существенно сократить сроки оздоровительных противолейкозных мероприятий. Что касается несоответствия полученных результатов тестирования в РИД и ИФА, которые основаны на обнаружении специфических иммуноглобулинов (ретроспективная серологическая диагностика) и ПЦР-анализа (прямая идентификация провируса), это вполне объяснимо стадией протекания инфекционного процесса, целевыми возможностями, технической сущностью этих методов и подтверждается результатами других исследователей.

Выводы Результаты исследований, которые были проведены в нашей лаборатории, в целом подтвердили более высокую чувствительность и специфичность иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции при диагностике лейкоза КРС по сравнению с реакцией иммунодиффузии. Однако, реакцию иммунодиффузии, несмотря на меньшую чувствительность, целесообразно использовать наряду с иммуноферментным анализом для мониторинговых исследований поголовья крупного рогатого скота. Но окончательное решение для постановки диагноза должно приниматься по результатам ПЦР-анализа.

Литература

1. Маманова С.Б., Н.Н. Гизитдинов, Бахтахунов Ю.Х. Разработка ускоренного метода выявления больных лейкозом животных // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. 2004, №12. –С.41-43

2. Гулюкин М.И., Нахмансон В.М., Дун Е.А. Серологический метод диагностики в системе противолейкозных мероприятий. // Ветеринария, №7. 1997.

С.12-14.

3. Сюрин В.Н.,Саймоленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Диагностика вирусных болезней животных. М.:Агропромиздат, 1991. – С.38-50.

4. Верховский О.А., В.В. Цибезов, М.В.Баландина, И.В.Непоклонова «Иммуноферментный анализ в диагностике лейкоза крупного рогатого скота»

//Ветеринария. 2002, № 12. –С. 8-10

5. Carli K.T., Batzman H., Sen A. Comparison of serum, milk and urino samples in an enzyme emmunoassay for bovine leukemia virus infection.//Resaerch in Veterinary Science.-1993.-V.55-P.394-395

6. Гринишин Д.П., Макаров В.В. Противолейкозные мероприятия на основе полимеразной цепной реакции. //Ветеринарный консультант. 2004, № 19-20.

–С.12-13

7. Макаров В.В. Макаров, Гринишин Д.П. ПЦР в диагностике лейкоза крупного рогатого скота //Ветеринария. 2005, № 4. -С. 9 -11

Тйін

Маалада ірі ара мал лейкозы вирусыны серологиялы жне молекулалы генетикалы балау дістеріні салыстырмалы баалауы крсетілген. Аталмыш инфекцияны балау барысында иммунды ферменттік талдау мен полимеразалы тізбекті реакцияны телімділігі жоары болды. ДПР сезімталдыыны тмен боланымен ірі ара малдара мониторингтік зерттеу жргізу жмыстарында ИФТ тсілімен бірге олдануа болады, біра жануарлара наты диагнозды ПТР нтижелері бойынша ойылуы тиіс.

Summary

This article presents the results of comparative evaluation of serological and the molecular-genetic methods of diagnosis of cattle’s leukemia. The high sensitiity of enzymoimmunoassay and polymerase chain reaction in the diagnosis of this infection is established. Immunodiffusion reaction, in spite of less sensitivity, can be used along with the еnzyme linked immunosorbent assey (ELISA) for monitoring research of cattle, but the final decision for diagnosis statement should be made basing on PCR analysis.

ВЫДЕЛЕНИЕ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА ИЗ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК FLK

МЕТОДОМ УЛЬТРАЦЕНТРИФУГИРОВАНИЯ В ГРАДИЕНТЕ

ПЛОТНОСТИ САХАРОЗЫ

А.Р. Белялова, магистрант К. Н. Мукантаев, д.б.н.

КазАТУ им. С. Сейфуллина В настоящее время проблема лейкозов сельскохозяйственных животных включена в планы научно-исследовательских работ многих научных учреждений страны. Проводятся научные исследования по изучению особенностей и закономерностей эпизоотического и инфекционного процессов энзоотического лейкоза крупного рогатого скота. При этом одним из приоритетных направлений этих исследований является разработка высокочувствительных методов прижизненной диагностики лейкоза.

Отработка методов выделения антигенных компонентов вириона позволит разработать серологические и вирусологические методы диагностики лейкоза.

Например, с помощью методов выделения и очистки были подробно изучены особенности инфекционных и эпизоотических процессов различных вирусных инфекций, разработаны эффективные методы контроля инфекции и оздоровления неблагополучных по вирусным заболеваниям хозяйств [1, 2, 3, 4].

В структуре ВЛКРС обнаружено 6 основных белков с молекулярной массой от 10 кД до 51 кД (р10, р12, р15, р24, gp30, gp51). Вирусные белки вириона ВЛКРС, вызывающие иммунологический ответ макроорганизма, подразделяются на две основные группы: гликозилированные (поверхностные, оболочечные белки), в состав которых входит углеводный компонент и негликозилированные полипептиды. Четыре негликозилированных белка (р10, р12, р15, р24) составляют сердцевину вириона, причем белок р24 присутствует в наибольшем количестве [5, 6, 7]. Два крупных белка являются гликопротеинами

– один из которых (р51) расположен на поверхности вириона, другой (р20) – трансмембранный белок [8, 9, 10].

Целью данной работы являлась отработка методов выделения и очистки вируса из FLK-BLV для получения концентраций достаточных для производства диагностических тест-систем.

Материалы и методы Первым этапом выделения вирусов служит подготовка вируссодержащего материала. В работе использовали перевиваемую линию FLK, полученную из Коллекции клеточных культур Института вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН (г.Москва). Для культивирования клеток использовали стандартную питательную среду Игла МЕМ с добавлением 200 мМ глутамина, 50 ед/мл пенициллина, 50 мг/мл стрептомицина и 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) фирмы «Himedia». Клетки инкубировали в термостате при 37 С в атмосфере 5% СО2. По окончании формирования клеточного монослоя ростовую среду собирали и использовали для выделения ВЛКРС.

При выделении и очистки вируса целесообразнее использовать материал после многократного замораживания и оттаивания. Эта процедура не только разрушает клетки и освобождает внутриклеточный вирус, но и денатурирует некоторые азотсодержащие примеси, которые, как правило, удаляются вместе с обломками клеток при умеренном центрифугировании.

Ультрацентрифугирование в градиенте плотности сахарозы. При ультрацентрифугировании вирусные частицы оседают, а основная часть растворимого белка и другие низкомолекулярные соединения остаются в надосадочной жидкости. При этом для начала инфекционный агент необходимо освободить от клеточных структур.

Для этого трижды подвергшуюся замораживанию и оттаиванию культуру клеток, культуральную жидкость подвергли равновесному центрифугированию в течение 15 мин при 8000 об/мин при 4С. Центрифугирование проводили в горизонтальных роторах с откидывающимися стаканами. Надосадочную жидкость осторожно наслаивали в специальные пробирки для центрифугирования, сделанные из пластмассы, поскольку стекло не выдерживает давление, которое развивается при высокоскоростном центрифугировании, на 5 мл 25% раствор сахарозы, приготовленный в TENбуфере (20 мМ Tris, 1 мМ EDTA, 0,1 М NaCl, рН 7,5). А осадок обезвреживали дезинфицирующими средствами. Наслоенный супернатант ультрацентрифугировали 90 мин при 23000 об/мин при 4С. Далее избавлялись от надосадочной жидкости, а полученный небольшого объема осадок ресуспендировали в 0,5 мл TEN-буфера в течение ночи при 4С.

В дальнейшем вирус очищали ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы 45-25% в течение 2 ч 30 мин при 21 000 об/мин при 4С. Ступенчатый градиент наслаивали из пипетки из приготовленных заранее на TEN-буфере (20 мМ Tris, 1 мМ EDTA, 0,1 мМ NaCl, рН 7,5) растворов сахарозы понижающей концентрации. Ступенчатый градиент оставляли для свободной диффузии сахарозы на 24 часа при 4С, после чего он становился линейным.

После центрифугирования вирус образовал характерную опалесцирующую зону, которую аккуратно собирали и ресуспендировали в 0,5 мл TEN-буфера.

Далее проверяли концентрацию полученного антигена на приборе Нанодроп (Thermo scientific, США).

Для подтверждения наличия белков вируса производили исследование полученных образцов при помощи постановки электрофореза, иммуноблотинга и РИД.

Электрофорез. Электрофорез вирусных белков проводили в 10%-ном полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (ДСН) («Serva», Германия) по методу J. Laemmli et al. [11] на аппарате для вертикального электрофореза (Hoefer Scientific, США). Тщательно промытые и обезжиренные стеклянные пластины (12х15) монтировали с помощью прокладок и зажимов.

Для предотвращения утечки растворов прокладки смазывали вазелином.

Заливали пространство между пластинками раствором для разделяющего геля, состоящего из 5 мл 30 % бисакриламида; 3,750 мл 1,5 М Tris -HCl (рН 8,8); 6 мл дистиллированной воды; 0,150 мл 10% ДСН; 0,015 мл N,N,N,N – тетраметилэтилендиамина (ТЕМЕД) и 0,075 мл 10% персульфата аммония.

После полимеризации нижнего геля вставляли гребенку и заливали оставшееся пространство раствором для концентрирующего геля, приготовленного по следующей прописи: 0,67 мл 30% бисакриламида; 1,25 мл 0,5 М Tris - HCl (рН 6,8); 3 мл дистиллированной воды; 0,05 мл 10% ДСН; 0,004 мл ТЕМЕД и 0,05 мл 10 % персульфата аммония.

Буфер для разведения образцов готовили следующим образом: к 0,315 мл 1М Tris -HCl (рН 6,8) добавляли 0,25 мл 2-меркаптоэтанола; 0,5 мл глицерина, 0,115мл 10% ДСН; 0,05 мл 0,1% бромфенолового синего и доводили объем до 5 мл дистиллированной водой. Образцы разводили в соотношении 1:1, кипятили на водяной бане в течение 3-5 минут и охлаждали. Далее образцы вносили по 15 мкл.

Электрофорез проводили при силе тока 20 мА и конечном напряжении 220 В. По завершении процесса гель вынимали из пластин, окрашивали в течение 1 часа и отмывали в нескольких сменах обесцвечивающего раствора до полного исчезновения фоновой окраски. Результаты электрофореза снимали на аппарате Гель-Док (фирмы «Био-Рад»).

Постановка иммуноблотинга. Постановка иммуноблотинга предусматривала следующие этапы: 1) проведение электрофореза в полиакриламидном геле; 2) перенос электрофореграммы на нитроцеллюлозную мембрану; 3) иммунохимическое проявление нитроцеллюлозной реплики.

Электрофорез вирусных белковых проводили по указанному выше методу (в 10%-ном полиакриламидном геле с 10% содержанием додецилсульфата натрия (ДСН) по методу Laemmli U. на аппарате для вертикального электрофореза (Hoefer Scientific, США)). По завершению процесса гель вынимали из пластин и осуществляли перенос электрофореграммы вирусных белков с геля на нитроцеллюлозную мембрану с помощью прибора для иммуноблотинга (Hoefer

Scientific, США) по Towbin H.. Для переноса готовили следующие растворы:

катодный буфер – 0,3 г трис и 0,5 г аминогенной кислоты растворяли в 20 мл метанола и доводили объем до 100 мл дистиллированной водой; анодный буфер №1 – 3,6 г Tris растворяли в 20 мл метанола и доводили объем до 100 мл дистиллированной водой; анодный буфер №2 – 0,3 г Tris растворяли в 20 мл метанола и доводили объем до 100 мл дистиллированной водой. Прибор готовили к работе следующим образом: на графитовую пластину помещали фильтровальную бумагу («Whatman», США), смоченную в анодном буфере №1, затем – смоченную в анодном буфере №2, накрывали нитроцеллюлозной мембраной (Millipore, США) и укладывали на мембрану полиакриламидный гель, накрывали его фильтровальной бумагой, смоченной в катодном буфере, и закрывали прибор. Перенос проводили при постоянной силе тока 0,8 мА/см геля в течение одного часа.

Для иммунохимического проявления специфических антигенов нитроцеллюлозную мембрану сначала инкубировали в 1%-ном растворе БСА в течение ночи при 4С. Затем отмывали по три раза ЗФР-Тв и ЗФР и выдерживали 1,5 ч при 37С в растворе положительной на лейкоз сыворотки, изъятой у инфицированных животных, разведенной 1:1500 в ЗФР-Тв. После чего носитель вновь отмывали и инкубировали в рабочем разведении кроличьих антибычьих антител, меченных пероксидазой хрена (1 ч при 37С). Повторяли процедуру отмывки и проявляли реакцию по расщеплению субстрата. Раствор субстрата готовили непосредственно перед использованием следующим образом: 0,01 г 4хлор-нафтол («Sigma», США), растворяли в 1 мл метанола, смешивали с 9 мл ЗФР (рН 7,2-7,4) и добавляли 0,25 мл 3% перекиси водорода.

РИД (реакция иммунофиффузии). Постановку РИД производили в 0,8-1,0 % геле агара, который готовили на Tris-HCl в диапазоне рН 7,2-8,6, содержащим 8-8,5% NaCl. Расплавленный агар разливали по 20-25 мл в чашки Петри и оставляли на 1 час при 4С до застывания геля. В застывшем геле делали лунки диаметром по 6,5 мм по специальной схеме (расстояние между лунками 3 мм).

Для получения наилучших результатов гель использовали в день приготовления.

В качестве положительного и отрицательного контроля использовали положительную и отрицательную по лейкозу сыворотки крови КРС. Образцы вносили в лунки в объеме 15 мл, в центральную лунку вносили вирусный антиген. Далее оставляли при комнатной температуре (20-27С).

Учет реакции проводили через 48 часов. Для этого чашки просматривали на темном фоне при нижнем боковом освещении с помощью осветителя к микроскопу. С целью усиления видимости полос иногда проводят обработку агара с прошедшей реакцией 0,065% раствором серно-кислого кадмия.

Результаты и обсуждение В результате выделения и очистки ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы с 1 литра культуральной жидкости FLK-BLV получили вирусный антиген в концентрации 380 мкг/мл (рисунок 1). Конечный объем вируссодержащей жидкости составил 0,5 мл.

Концентрация антигена в мг/мл

Длина волны в нм

Рисунок 1 — График измерения концентрации очищенного вируса.

- очищенный вирус методом ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы.

Полученные концентрации очищенного вируса показывают достаточно низкую производительность метода. По данным некоторых авторов это связано не с методом очистки, а с низкой продуктивностью клеток линии FLK. В связи с этим, авторами предложена наработка большого объема, не менее 20 литров, вируссодержащей культуральной жидкости и его концентрирование перед ультрацентрифугированием в градиенте плотности сахарозы.

Антиген, полученный предложенным способом, апробирован нами в лабораторных условиях в постановке иммуноблотинга и РИД. Постановкой электрофореза было определено качество выделения и очистки вируса из FLKBLV. Благодаря данному методу лабораторного анализа было установлено наличие в составе антигена вирусных белков с видимой молекулярной массой в пределах 24 кДа и 51 кДа, что свидетельствует о наличие негликозированного белка р24, активного наружного гликопротеида gp51 (рисунок 2).

–  –  –

Рисунок 3 – Результаты постановки иммуноблотинга В РИД (реакции иммунодиффузии) выявилось взаимодействие полученного вирусного антигена с положительной на лейкоз сывороткой в разведении 1:4. О положительно прошедшей реакции свидетельствовала серобелая полоска преципитации, хорошо видимая на темном фоне, появившаяся между лунками со специфическими компонентами за счет образования преципитата (рисунок 4).

–  –  –

Результаты испытаний свидетельствуют о специфичности полученного антигена, что позволит эффективно выявлять антитела к антигенам вируса лейкоза в сыворотках крови инфицированных ВЛКРС животных. Это говорит о возможности применения его в проведении серологического мониторинга эпизоотической ситуации и научных исследований при лейкозе крупного рогатого скота.

В заключение следует сказать, что методы градиентного центрифугирования наиболее совершенны из всех известных в настоящее время методов очистки вирусов. Причем для некоторых вирусов достигается абсолютная очистка. Относительная сложность методов градиентного центрифугирования не препятствует его широкому распространению.

Единственным ограничением пока является то, что очищать можно лишь сравнительно небольшие объемы вируссодержащего материала. Поэтому, по мнению некоторых авторов для увеличения выхода очищенного вируса желательна его предварительная концентрация [12].

Литература

1. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомина Н.В. Вирусные болезни животных. Москва, ВНИТИБП, 1998 г. с. 383-406

2.Нахмансон В.М. Лейкоз крупного рогатого скота. Москва «Россельхозиздат», 1986 г. с. 3-6

3. Бурба Л.Г., Валиханов А.Ф. и др. Лейкозы и злокачественные опухоли животных. Москва ВО «Агропромиздат» 1988 г. с.3-4

4. Фомина Н.В. Вирусы животных. МВА, 1991 г. 431 с

5. Burny A., Bex F., Chantrenne H., et.al. Bovine leucemia virus involvement in enzootic bovine leucosis. Adv Cancer Res. 1978 p. 251-311

6. Portetelle D. et.al. Ann Med Veter. 1989 p. 133

7. Portetelle D. et.al. Cell Biochem. 1986 p. 209

8. Uckert W. et.al. Virus Res. 1986 p. 14-16

9. Schmidt I. et. al. Exp Cell Res. 1984 p. 152

10. Сергеев В.А. и др. Структура вируса животных. Москва, 1983 с

11. Laemmli V. K. Cleavage of structural protection during the assembly of the head of bacteriophage T-4.// Nature (London)/-1970. – V.27. – P.680-685

12.Гринин А.С., Титов И.Н. Очистка, концентрирование и фракционирование вирусов животных. 1971г. 240 с

Тйін

Лейкоз вирусымен жтырылан жануарларды ан сарысуы антигендерінен антиденелерді тиімді анытауа ммкіндік беретін, арнайы алынан антигендер сына нтижелерімен крсетілді. Бл жай, оны эпизоотикалы жадайды серологиялы мониторингін жне ірі ара малды лейкозындаы ылыми зерттеу ткізуде олдану ммкіншілігі туралы айтады.

Тазартылан вирусты алынан концентрациялары, дісті тмен німділігін крсетеді. Осыан орай, рамында вирусы бар сінді сйытыын 20 литрдан кем емес, кп млшерін жинап, оны сахароза градиентінде ультрацентрифугалау алдында концентрирлеу ажеттілігі сынылады.

Summary

Test results indicate specificity of the antigen, that would allow effectively detect antibodies to antigens of leukemia virus in sera from animals infected with BLV. This suggests the possibility of applying it to the serological monitoring of the epizootic situation and research in leukemia in cattle. However, obtained concentration of purified virus shows that the productivity of the method is rather low. In this regard, the authors propose obtaining large volume, not less than 20 liters of virus-containing culture fluid and concentrating it before ultracentrifugation in sucrose density gradient.

ХИМИОПРЕПАРАТЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ

Мустафин Б.М.

ГУ «Костанайская районная территориальная инспекция КГИ в АПК МСХ РК»

Значительное распространение бруцеллеза в Республике Казахстан создает серьезные препятствия для развития животноводства и постоянную угрозу здоровью населения. За период, прошедший со времени открытия возбудителей бруцеллеза (D.Bruce, 1886), достигнуты большие успехи в области изучения многих вопросов эпизоотологии и эпидемиологии болезней, их клинических проявлений и патогенеза, разработки средств и методов диагностики, профилактики и т. д. Однако, проблема ликвидации этой болезни представляет значительные трудности вследствие широкого их распространения, вариабельности и убиквитарности возбудителей (способности к обитанию в организме самых разнообразных живых существ), а также в ряде случаев латентного течения инфекций и связанных с этим сложностей диагностики болезней.

Современное животноводство требует от научных, практических специалистов систематизации в проведении каких-либо мер. Многие методы и сегодня перспективны при борьбе с инфекциями. Но ситуация так сложилась, что мы должны решить насколько ценен тот или иной метод, нужны ли современные разработки. Бруцеллезная инфекция научилась защищаться от искусственного воздействия на них, и каждое действие на нее приносит выгоду ей. Она может реверсировать, трансформировать в другую форму, „озлобиться” т.е. индуцировать в вирулентное состояние, изменить генетическую систему, имитировать другую болезнь, персестировать длительное время. Понятие о том, что бруцеллы сохраняются короткое время быстрее „ложное”, т.к. Мырзалиев А.

пересеивая лиофизированные штаммы, спустя 29 лет и засушенные на твердой питательной среде (находились в сухом месте) в течение 1 - 4 лет (срок испытания пришел к выводу, что бруцеллы сохраняют свои основные свойства кроме вирулентности). Поэтому мы должны быть готовыми в кратчайшие сроки купировать и ликвидировать его, иначе возможны вышеописанные случаи.

Необходимость применения антибиотиков существует, даже при лечении людей, при этом рекомендуют комплекс из римфалицина и доксициклина.

Для лечения бруцеллеза людей разрабатывают всевозможные современные препараты антибиотического действия: лактаны, макролиды, хинолоны и другие. В тоже время животным антибиотики применяют с особой осторожностью т.к. возможно искусственное влияние их через продукты питания, которые действуют на человека.

Ряд ученых [1, 2, 3, 4, 5, 6] работали над созданием противобруцеллезных комплексов, были получены весьма положительные результаты, но в основном они не нашли своего применения. Поэтому разработка современных профилактических препаратов перспективно важно для практики.

Материалы и методы Начальным этапом нашей работы явилось изыскание антибиотиков с невысокой стоимостью, активно подавляющих размножение бруцелл с этой целью нами были использованы некоторые антибиотики, которые согласно инструкции влияют губительно на бруцеллы.

В работе были использованы антибиотики:

морфоциклин тетрациклина гидрохлорид окситетрациклин стрептомицин стрептоцид

В качестве иммуностимуляторов были использованы:

масляный адъювант полиоксидоний

В качестве тестовых культур использовали:

Brucella melitensis Rev-1, биотип 1 Brucella abortus 82 В качестве лабораторных животных были использованы морские свинки.

Результаты исследований Результаты определения чувствительности бруцелл штаммов melitensis Rev-1 и abortus 82 по отношению к различным антибиотикам представлены в таблицах 1, 2.

Таблица 1 – Чувствительность бруцелл к антибиотикам

–  –  –

Из данных таблицы 1, 2 видно, что наиболее активным препаратом является морфоциклин, рост бруцелл наблюдается в разведениях 0,25 мкг/мл и ниже, следующим по активности является тетрациклина гидрохлорид, затем следуют окситетрациклин, стрептомицин. Антибиотики, смешанные в равных количествах со стрептомицином или стрептоцидом слабо снижают противобруцеллезную активность.

При определении бруцелл выделенных в Кустанайской области было определено, что они обладают высокой чувствительностью к тетрациклину гидрохлориду, морфоциклину, тетрахлориду, что позволяет вести дальнейшие работы по созданию профилактических препаратов с учетом видовой принадлежности полевого штамма и региональных особенностей.

Известно, что вышеописанные препараты имеют краткий срок действия.

Поэтому нами решено было продолжить исследования и определить возможность действия их при совместном введении с препаратами, пролонгирующими и иммуностимулирующими их действие. С этой целью после серии экспериментальных работ была создана композиция из масляного адъюванта, антибиотика и полиоксидония, которую использовали с целью определения профилактической эффективности на морских свинках, для этого было создано 4 группы морских свинок по 10 голов и 4 по 5 морских свинок, которые заражены двухсуточной агаровой культурой: Бр. Мелитензис Rev-1, биотип 1, B.abortus 82 биотип 3, в дозе 200 микробных клеток. Первой – четвертой группам животных одновременно проводили заражения и вводили препарат, состоящий из 20 тыс. ед. тетрахлорида, 15 тыс. ед. стрептомицина, 6 см масляного адъюванта и 3см3 раствора полиоксидония, доза на 1 животное 1см3, 5-8 группы животных служили контролем заражения.

Введение лекарственного препарата проводили четырехкратно через каждые 10 дней.

Полученные при этом результаты отражены в таблице 3.

Таблица 3 – Профилактическая активность лекарственной смеси при бруцеллезе морских свинок

–  –  –

Анализируя результаты исследований, приведенные в таблице 3 можно сделать вывод, что от морских свинок первой и третьей группы культуры бруцелл выделены соответственно группам 2, 1, а противостояло заражению 90% животных. Эффективным оказался препарат при введении его морским свинкам зараженным полевыми штаммами бруцелл (2, 4 группы).

Выводы Комплекс антибиотиков, тетрациклин гидрохлорид + стрептомицина сульфат оказывает губительное действие на бруцелл в том числе на бруцелл выделенных в Костанайской области.

Литература

1. Моисеев Д.В. Комбинированный метод лечения бруцеллеза //Советская медицина. – 1948.-№3.-С.27-30

2. Уралев В.С. К вопросу о комбинированной терапии бруцеллеза антибиотиками с вакциной//Тр. Ростовской противочумный институт. – 1957.Т.12.- С. 467-480

3. Карпеева В.Е. Действие на бруцелл антибиотиков химиотерапевтических препаратов и их комбинаций в опытах in vitro и in vivo //Тр. ВИЭВ.М.: Сельхозиздат.- 1959.-Т.22.-С.286-295

4. Ariza J Gudiol F Pallaris R Rufi G Fernandez – Viladrich P. Comparative trial of rifampicin – doxycycline versus tetracycline – streptomycin in the therapy of human brucellosis. Antimicrob Agents Chemother 1985; 28: Р. 548-51

5. Канжигитов Е.К. Антибиотикотерапия экспериментального бруцеллеза животных //Достижения ветеринарной науки Казахстан в решении проблем защиты животных от инфекционных и инвазионных болезней. Сборник научных трудов, посвященных 100- летию КазНИВИ, Том LI.- С. 121-124

6. Лесков В.П. Иммуностимуляторы //Аллергия, астма и клин. Иммун.С.12-25 <

Тйін

Жмыста бруцеллаларды антибиотиктерге сезімталдыы, дрілік оспаларды профилактикалы белсенділігі жне препараттарды кешенді трде бруцеллезді алдын алу шараларын жргізу жмыстарында олдану ммкіншіліктері туралы мліметтер берілген. Майлы адъювант, антибиотик жне полиоксидоний композициясыны профилактикалы тиімділігі айындалды. Тетрациклин гидрохлорид пен стрептомицин сульфат кешеніні бруцеллаларды жоятын сері аныталды.

Summary In work materials about sensitivity the brucells to antibiotics are presented, to preventive activity of a medicinal mix at brucellosis at porpoises and perspectivity of their application in a complex with the immunomodulator for the purpose of its preventive maintenance. Determined the effectiveness of prophylactic compositions of oil adjuvant, antibiotics, and polyoxidonium. Defined destructive effect on Brucella complex antibiotics tetracycline hydrochloride + streptomycin sulfate. Determined the efficacy against field strains of Brucella.

ПИЩЕВАЯ ЦЕННОСТЬ КРОВИ УБОЙНЫХ ЖИВОТНЫХ

Уразбаев Ж.З., к.т.н., доцент Семипалатинский государственный университет им. Шакарима В решении проблемы рационального использования мясного сырья и увеличения белковых ресурсов большая роль принадлежит организации максимального сбора и использования на пищевые цели крови убойных животных. Кровь убойных животных представляет собой высокоценное пищевое сырье, а также обладает специфическими лечебными свойствами. Кровь – важный источник белка животного происхождения, ценен, прежде всего, наличием гемового железа, легко утилизируемого и содержащегося в большом количестве. Значительную пищевую ценность представляют белки крови, которые по ряду свойств идентичны белкам мяса. В крови содержится почти столько же белков, сколько и в мясе, поэтому кровь также называют "жидким мясом".

По содержанию белков и аминокислотному составу кровь практически не отличается от мяса, что видно из данных, приведенных в таблицах.

Таблица 1 – Содержание воды и белков в крови убойных животных

–  –  –

Аминокислотный состав белков крови близок к аминокислотному комплексу белков мяса, о чем свидетельствуют данные таблицы 2. Если белки мяса характеризуются более высоким содержанием каждой незаменимой аминокислоты по сравнению с их содержанием в стандартной шкале ФАО/ВОЗ, то по данным Е.А. Костюк, A. Slosars, С.П. Либермана, Л.А. Самофаловой суммарные белки крови сбалансированы по фенилаланину, треонину, лейцину, валину и лимитированы по серусодержащим аминокислотам и изолейцину.

Некоторая избыточность лизина и хорошая насыщенность фенилаланином позволяет говорить о целесообразности совместного использования крови с продуктами растительного происхождения, в белках которых меньше этих незаменимых аминокислот [1].

По содержанию гистидина и триптофана белки крови рассматриваются как дополнительный источник их в лечебных диетах при лечении пневмонии у детей и инфекционных заболеваниях. Исходя из суточной потребности взрослого человека в незаменимых аминокислотах, можно полагать, что 100 г крови почти полностью могут ее обеспечить. Исключение составляют изолейцин, который в крови содержится в количестве 2,3 г, а суточная потребность в нем 3 – 4 г. Для повышения содержания изолейцина кровь необходимо смешивать с белками мяса, молока.

Таким образом в белках крови находятся все восемь незаменимых аминокислот, которые не синтезируются в организме человека и обязательно должны поступать с белками пищи.

Белки крови относятся к полноценным, сбалансированным по содержанию аминокислот, за исключением гемоглобина, в котором отсутствует незаменимая аминокислота – изолейцин.

Данные, характеризующие химический состав цельной крови, приведены в таблице 3.

–  –  –

Кровь в натуральном и высушенном виде используется при производстве кровяных колбас, зельцев и других мясопродуктов. Однако производство продуктов с добавлением цельной крови ограничивается из-за ухудшения запаха и цвета готового продукта. Поэтому при производстве мясопродуктов используют в основном светлую часть крови - сыворотку или плазму (за исключением кровяных колбас), как в жидком ((10-12) % к массе сырья), так и в сухом ((1-2) % к массе сырья) видах. Ее выход из крови убойных животных составляет от 50 % до 60 %. Она содержит от 90 % до 92 % воды и от 6,8 % до 8,4 % белка. Данные, характеризующие химический состав плазмы и форменных элементов крови, приведены в таблицах 4, 5.

–  –  –

Белки плазмы подразделяются на пять основных фракций: фибриоген, альбумин, - глобулин, - глобулин, - глобулин, отлившихся своим физико – химическим свойствам и аминокислотному составу.

Основным белком форменных элементов является гемоглобин, содержание которого в крови крупного рогатого скота составляет - 10,3%, мелкого рогатого скота - 9,3%, свиней - 14,2%. Гемоглобин – сложный белок – хлоропротеид, состоит из белковой части – глобина и небелковой железосодержащей части – гема.

Из анализа данных химического состава крови различных животных (таблицы 3-5) видно, что кровь лошади по количеству содержания белка превосходит кровь других убойных животных: на 36 % - КРС и на 25 % - свиней.

Помимо высокой пищевой и биологической ценности белки крови обладают хорошими функциональными свойствами, что особенно важно при производстве лечебно-диетических продуктов. Белки плазмы крови при рН=3-9 имеют 100 % растворимость. Кроме того, белки плазмы крови имеют высокую гелеобразующую способность, превосходящую таковую соевого изолята, и образуют твёрдые эластичные гели при рН - (8,7-8,9) % белка. Белок плазмы крови имеет хорошие эмульгирующие свойства и образует стабильные эмульсии.

Кроме белков в крови убойных животных содержатся минеральные вещества, витамины, гормоны, ферменты, пигменты и другие биологически активные вещества.

Таблица 6 - Минеральный состав крови крупного рогатого скота и лошадей

–  –  –

Минеральный состав крови довольно разнообразен. Общее количество минеральных веществ в крови составляет 0,9%, в плазме около 1% и в форменных элементах 1,2%. Качественный и количественный состав их при нормальных условиях относительно постоянен.

Неорганические вещества представлены более чем 30 минеральными элементами в виде солей и соединений с органическими веществами, среди которых особо следует выделить железо. По этому показателю кровь превосходит все существуйте продукты питания. Его содержание в крови составляет от 30 до 55 мг %, в то время как говядина содержит 2,6 мг %, свинина

- 1,9 мг %.

Значение железа обусловлено участием его в важных жизненных процессах – питании и дыхании тканей. Эту роль железо выполняет в форме сложных белков хромопротеидов, а также хромативного вещества ядра клеток и ферментов. Считают, что железо имеет такое же важное значение для нормальной жизнедеятельности каждой клетки, какое гемоглобин – для существования всего организма. Железо поглощаемое из пищи, проступает в кровь, окисляется и вступает в соединение с глобулином – апоферритином, образуя ферритин, участвующий в создании гемоглобина.

Особенно много в плазме крови натрия, представленного главам образом в виде хлористого натрия (90%) и в виде карбонатов кальция (10%), имеющего большое значение в процессе свертывания крови, магния, находящегося в виде ионов и соединений с белками.

Фосфор в крови содержится как в плазме, так и в форменных элементах, в виде различных соединений: в составе липоидов – 36%, всего его содержания, в кислорастворимых соединениях находятся 68,1% всего фосфора и в неорганических – 9,7%. Общее количество фосфора в крови около 40 мг %.

Кальций присутствует в крови в виде двухвалентного иона недиссоциированной соли Са (НС0) и коллоидного соединения кальция с белками. Содержание кальция в 100 куб.см крови равно 150 – 200 мг в 100 куб.см сыворотки – 19 – 21 мг, в плазме колеблется между 9,6 и 10.6 мг.

Хлориды составляют 75% всех минеральных веществ, остальные 25% состоят из бикарбонатов и небольшого количество фосфатов [2].

В состав крови входят макро и микроэлементы, называемые «биоэлементами», то есть элементами обладающими специфической биологической ролью. К ним относятся: медь, цинк, калий и магний. Медь, входящая в состав некоторых окислительных ферментов – крови, и цинк – составная часть угольного ангидрида эритроцитов усиливают деятельность инсулина. Калий обнаруживается в основном в эритроцитах в виде хлористой соли. Содержание магния в крови составляет около 2 мг %.

Витамины крови представлены жирорастворимыми витаминами:

содержание витамина А в 100г крови составляет 0,54 – 0,60 мг %, витамина Е – 0,29 мг %, присутствуют также витамины группы В: витамин В – 0,005 мг %, витамин В – 0,0075 мг %, витамин В – 0,25 мг %, присутствуют витамины В, РР.

В и особенно высоко содержание витамина С – 0,6 – 0,8 мг %. В крови обнаружены гормоны инсулин, адреналин, гормоны гипофиза, а также половых и молочных желез.

Кроме того, в крови убойных животных находится большое количество ферментов – более 50. К ним следует отнести протеазу, содержащуюся только в лейкоцитах и принимающую участие в свертывании крови; каталазу, регулирующую окислительно – восстановительные процессы; амилазу, расцепляющую крахмал, липазу, расцепляющую жир, а также протеолитические ферменты, под действием которых происходит распад белков – пепсин, трипсин, химотрипсин.

Пигменты крови включают гемоглобин, билирубин, билевердин, лютеин, уротимин.

Наряду с белковыми веществами в состав крови и ее фракций входят небелковые азотистые и безазотистые вещества, липиды. Небелковые азотистые вещества крови являются продуктами обмена белка и находятся в плазме и сыворотке. Промежуточными продуктами являются полипептиды и аминокислоты, а конечными – мочевина мочевая кислота, аммиак, аммонийные соли, пурины и некоторые другие соединения.

В составе безазотистых органических веществ находятся глюкоген, полисахариды, жирные кислоты, холестерин, лецитин, ксантофилл и другие соединения.

Липиды крови находятся в незначительном количестве, однако из общего количества небелковых органических веществ на их долю приходится примерно 75%. Липиды в основном представлены нейтральным жиром и продуктами его распада, а также лецитином, полистерином [3].

Таким образом, кровь по количеству белков, соотношению аминокислот, степени усвояемости, содержанию различных биологических веществ является высокоценным пищевым сырьем для получения различных комбинированных продуктов питания.

Литература

1. Пожарицкая Л.С., Либерман С.Г., Горбатов В.М. Кровь убойных животных и ее переработка. - М.: Пищевая промышленность, 1971. – 415с

2. Структурно–механические характеристики пищевых продуктов /Под ред. Горбатова А.В. – М.: Легкая и пищевая промышленность, 1982. – 296с

3. Асатиани B.C. Химия крови. - М.: Знание. 1961, - 158с

Тйін

Бл маала сойылан мал анын зерттеуге арналан. ан ртрлі комбинирленген тама німін алуда асабаалы таамды шикізат болып табылады. анны химиялы жне минералды рамы зерттелді. Зерттеу барысында кан ауызында орыны алмастырылмайтын аминышылы жне де анны рамында органикалы емес заттар, «биоэлементтер», ферменттер, пигметтер болатындыы туралы анытама келтірілген. Сонымен оса, тама рамына осылатын анды тиімді пайдалану тама ндірісіні басты масаты болып табылады.

Summary

Given article is devoted a blood test of lethal animals. Blood is most valuable food raw materials for reception of the various combined foodstuff. During of researches chemical and mineral structures of blood are received. In article have been resulted data on the maintenance of irreplaceable amino acids in fibers of blood, about value of inorganic substances, "bio-elements", enzymes, pigments as a part of blood.

Thus, rational use of blood on the food purposes is the important problem of the food industry.

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВОДЫ РЕКИ

ИШИМ И БИОРАЗНООБРАЗИЕ ПЕРИФИТОНА ВОДОЕМА

Акбаева Л.Х., к.б.н., доцент ЕНУ им. Л.Н. Гумилева Проблемы загрязнения водных экосистем были и остаются актуальными на сегодняшний день.

Для получения объективной картины загрязнения водных экосистем ведутся исследования в двух направлениях. Во-первых, применяют методы инструментального химического анализа, во-вторых, все более широко используют биоиндикаторы.

Река Ишим является наиболее крупным водоисточником на территории Акмолинской области со своими притоками – Колутон, Жабай, Терс-Аккан.

По своему режиму река относится к типу равнинных, преимущественно снегового питания. Река вскрывается в середине апреля, а иногда в конце марта или в начале апреля. Вода в половодье бывает мутная, без запаха с низкой окисляемостью, невысоким содержанием взвешенных веществ. За счет разбавления талыми водами содержание солей кальция и магния уменьшается, жесткость снижается. Наиболее высокие показатели минерализации, общей жесткости наблюдаются в засушливый, жаркий месяц лета - июнь.

Половодье заканчивается во второй половине мая – начале июня.

Население сельских мест использует воду для хозяйственно-питьевых целей, как в централизованном, так и в децентрализованном порядке. Кроме того, река Ишим используется рабочими и служащими городов и рабочих поселков в целях рекреации. В верховьях реки эксплуатируется Вячеславское водохранилище, в среднем течении – Сергеевское водохранилище, кроме того, река Ишим служит источником питания Булаевского, Пресновского, Мамлютского и других сельскохозяйственных систем водопроводов. Скорость течения воды в межень составляет 0,2-0,5 м/сек. Ширина реки не превышает 50м, глубина 1.5-2.0 м, встречаются отдельные впадины до 15-18 м.

Максимальный расход воды реки Ишим у г. Астана составляет 1080-1100 куб.м/сек, годовой объем стока 1299967 тыс. куб/год. Среднегодовой расход воды 1,11 куб. м/сек.

Основными источниками загрязнения реки Ишим являются ливневые стоки с территории населенных мест, а также минеральные и органические удобрения, смываемые талыми, дождевыми водами с водосборных площадей.

Также к рассеянным источникам загрязнения можно отнести летние пастбища и стоянки крупного рогатого и мелкого скота.

В качестве абиотических факторов исследовали значения следующих показателей: БПК5, кислотность воды рН, азота нитратного (NO3), нитритного (NO2) и аммонийного (NН4), цинка (Zn), железа (Fe), меди (Cu), хрома (Cr), магний (Mg), кальций (Ca), нефтепродуктов, синтетических поверхностноактивных веществ (СПАВ), сульфатов (SO4), хлоридов (Cl), карбонатов, минерализацию (таблица 1).

Химический анализ воды реки говорит о том, что в районе населенных пунктов и ниже в воде увеличивается содержание азотосодержащих веществ:

аммония солевого (летом увеличение ПДК в 2,5 раз, осенью - в 1,6-1,7), нитритов (летом превышение в городе ПДК – в 1,8 раз, осенью в 1,2 раза ниже города.), в то время как в чистых водоисточниках аммиак, нитриты не регистрируются, а наличие их говорит о свежем или недавнем загрязнении органическими веществами.

Если сравнивать с данными прошлых лет [1], то, например, в 1994 г.

содержание аммония солевого в р. Ишим выше города Акмолы регистрировалось в пределах 0,12-0.2 мг/л, ниже города 0,24-0,35 мг/л. Таким образом, за четырнадцать лет загрязнение в реке Ишим азотосодержащими веществами усилилось в среднем в 4 раза.

Весной также зарегистрировано превышение ПДК по содержанию сульфатов в реке ниже города в 1,4 раза, превышение ПДК по содержанию Fe (в 1,2 раза) и Cu (в 3 раза) выше города и в городской части реки.

Для летнего периода характерно общее повышение жесткости воды в реке до значения 7,0-7,2. При этом регистрируется превышение ПДК по содержанию следующих химических компонентов в реке: нитритов, как уже было указано выше - в 1,8 раз в городе и ниже города, сульфатов – в 2,8 раз в городе и ниже города, Mg – ниже города в 1,2 раза, Cu – в 2 раза выше города и ниже города, аммония солевого – в городе в 1,4 раза и в 2,5 раз ниже города.

Осенью также сохраняется повышение жесткости воды 7,2 и превышение концентраций перечисленных соединений, при этом содержание меди и аммония солевого возрастает еще больше – в 3-4 раза и 5,8 раза соответственно.

Кроме того, в осенний период зафиксировано превышение содержания ПДК для нефтепродуктов – в городе в 2,3 раза и ниже черты города в 2,7 раза.

Сопоставление соответствия содержания концентраций других соединений их ПДК, в том числе и для детергентов (СПАВ) в воде пока не вызывает тревоги, не было также обнаружено хрома и цинка.

Однако показатель БПК5 (биологическая потребность в кислороде) в норме составляет 3, а в реке Ишим осенью этот показатель значительно падает, достигая в среднем 1,6.

Таблица 1 - Некоторые химические показатели качества воды в реке Ишим 2008 г. в окрестностях и в самом городе Астана

–  –  –

1. Ананьев Н.И., Исенов Ш.А., Мейрамов Э.А. Биоресурсы и экологическое состояние Акмолинской области. Акмола.-1997.-134 с

2. Абакумов В.А., Максимов В.Н. Экологические модуляции как показатель фонового состояния водной среды / Научные основы биомониторинга пресноводных экосистем. Труды советско-французского симпозиума. Астрахань.СССР 9-12 сент. 1985г.- С.104-117

3. Научные основы биомониторинга пресноводных экосистем /Тр. Совфранц. Симпозиума. Астрахань 9-12 сентября 1985.-Л.: Гидрометеоиздат 1988.

164 с

Тйін

Есіл зеніні Астана аласына арайтын р трлі блігіні суыны гидрохимиялы крсеткіштеріне байланысты 2008 жылды жазы маусымындаы перифитонны ралуандылыы мен молдыы зерттелді.

Перифитоннны рамында 265 трді бар екендігі аныталды. Оны 11 трі цианобактериялар, 93 трі балдырлар. Жмысты нтижелері перифитонны тррамы аланы серіне сезімтал екендігін корсетті. Мнда кейбір трлеріні ластануа биоиндикаторлы ммкіндіктері талданылан. Жне маалада суойманы келешектегі экологиялы саулыыны ммкіндіктері корсетілген.

Summary

A specific variety and abundance perifiton in the river Ishim for the summer period 2008 depending on hydrochemical parameters in the river Ishim on various sites rather of Astana is studied. In structure of perifiton 265 speciales were revealed.

From them 11 speciales cianobacterium, 93 speciales - seaweed. The results showed that the species composition of periphyton appeared to be sensitive to the influence of the city. The possibility of using certain species as indicators of pollution. Also in the article discusses the prospects for future ecological health of the reservoir.

УРАН НДІРЕТІН ІРДЕ МЕКЕНДЕЙТІН ТЫШАН ТРІЗДЕС

КЕМІРУШІЛЕР ОРШААН ОРТАНЫ БИОИНДИКАТОРЫ

–  –  –

Биогеоценоздарды радиоактивті заттармен ластануы организмдерді мекен ету ортасындаы жаа абиотикалы фактор болып саналады. Сондытан иондаушы сулелерді серіні генетикалы салдарын анытау шін табии популяциялар мен экожйедегі генетикалы процестерді зерттеу керек [1-2].

Жануар популяциялары шін оршаан ортаны радиоактивті ластануыны серін зерттеу, табии бірлестікте пайда болатын генетикалы салдарларды млшерін анытауда негізгі роль атарады [3]. азастанны Солтстік аймаында жргізілген уран ндіру жмыстарыны нтижесінде, жалпы радиоактивті белсенділігі 168,4 мы Кu, клемі 61 млн. тонна радиоактивті алдытар жинаталан [4]. Жануарлар экожйені маызды элементтеріні бірі болып табыландытан, иондаушы сулелерді азаа жне жануарлар популяциясына генетикалы серін зерттеу жалпы биогеоценоз шін теориялы жне практикалы маызы зор [5]. Сторектілерді тест-объектілеріні рамына кіретіндігі жніндегі негізгі ережелер Радиациялы ауіпсіздік жніндегі Халыаралы комиссия жариялымында жарыа шыан [6].

ылыми дебиеттердегі малматтара талдау жасаанда уран ндірісіні ауматарында мекендейтін сторектілер популяцияларыны хромосомаларыны сипаттамалары, тым уалаушылы асиеттері толы зерттелмегені аныталды. Сондытан уран рудасын шыару жне айта деу, радиоактивті алдытарды сатау шараларымен алыптасан крделі радиоэкологиялы жадайды табии сторектілер популяциясы шін потенциалды ауіптілігі бл жмысты маыздылыы мен зектілігін крсетеді.

Зерттеу жмыстары Амола облысыны уран ндіретін ірлерінде:

Степногор тау-химиялы комбинатыны радиоактивті-алдытарды сатайтын оймасыны маында жргізілді. Салыстырмалы айма ретінде Степногор аласыны ндіріс орындарынан 10-20 км ара ашытыта, шыыс баытта орналасан, алыпты радиациялы фонды, географиялы крсеткіштері бойынша сас айма тадалынып алынды. Бл фонды айматан салыстырмалы топ жануарлары сталынды. Сторектілер мекендейтін жерлерді радиациялы жадайы оршаан орта объектілерін (топыра, су, сімдік) зерттеу негізінде бааланып, сырты сулелендіруден туындайтын сіірілетін дозаны млшері айындалды. Жабайы кеміруші тышандарды сырты гамма-сулесінен жне бета-сулесінен алатын дозасын есептеу шін тура дозиметрия дісі олданылды [7-8]. Цитогенетикалы зерттеулерді объектісі ретінде келесі тышантріздес кеміргіштер: лкен тышан (Большой тушканчик - Allactaga major Kerr) жне секіргіш тышан (Тушканчик прыгун - Allactaga saltator Ewersman) тадалынып алынды.

Тышандарды латынша аттарын ысартып Allactaga major Kern – A.m., ал Allactaga saltator Eversman – A.s. деп жазылды. Цитогенетикалы талдаулар мен хромосомалы аберрацияларды зерттеу барысында сторектілерді цитогенетикасына негізделген ылыми-дістемелік нсауа сйкес жмыстар атарылды [9-11].

Алынан нтижелерді талдау Радиометриялы зерттеу нтижесінде Allactaga major Kerr. жне Allactaga saltator Ewersm сталынан жерлерде гамма-сулесіні эквивалентті дозасыны кші 0,65-0,80 мкЗв/са. ауытыды. Альфа-блшектеріні тыызды аымы Allactaga major Kerr. мекендейтін жерлерде 0,97-1,97 блшек/ см2хмин згерсе, бета-сулесіні тыызды аымы 111,47 – 144,06 блшек/ см2хмин ауытып, салыстырмалы топты жануарлары мекендейтін жерлермен салыстыранда гамма–сулесіні экивалентті дозасыны кші орташа шамасы 5,5 есе, бетаблшектеріні аым тыыздыы 15 есеге дейін жоары болды. Тжірибелік топты жануарлары мекендейтін ортада альфа-блшектермен ластану аныталды (кесте 1).

Кесте 1- Кемірушілер сталынан жерлерді радиометриялы крсеткіштері (жер бетінен 5 см ара ашытыта )

–  –  –

Кесте 2 - Цитогенетикалы зерттелген лкен тышандар (Allactaga major Kern) мен секіргіш тышандарды (Allactaga saltator) сйек миы лпаларындаы гиподиплоидты жне гипердиплоидты (анеуплоидты) хромосомалар жиынтыы бар жасушаларды млшері

–  –  –

Цитогенетикалы трыдан зерттелген лкен тышан мен секіргіш тышандарды баылау топтарыны жасушаларында хромосомаларды аберрациялары бар жасушаларды дегейі сйкесінше 0,60±0,19% жне 1,22±0,37% болды. лкен тышандарды тжірибелік тобына жататын 15 жануарлардан зерттелген 1341 метафазалы жасушаларыны ішінен 46 жасушада (немесе 3,39±0,60%) хромосомаларды аберрациялары аныталды.

Басаша айтанда тжірибелік топтаы лкен тышандарды гемопоэтикалы лпаларында хромосомаларында аберрациялары бар жасушаларды саны баылау тобындаы тышандардан 5,65 есе арты боланын атап ту керек.

Секіргіш тышандарды тжірибелік тобында да хромосомаларында аберрациялары бар жасушаларды саны баылау тобыны сас цитогенетикалы сипаттамасынан 3,80 есе кп болды.

Кесте 3 - Цитогенетикалы зерттелген лкен тышандар (Allactaga major Kern) мен секіргіш тышандарды (Allactaga saltator) сйек миы лпаларындаы полиплоидты хромосомалар жиынтыы бар жасушаларды млшері

–  –  –

Уран ндіретін ірлерде мекендейтін биоиндикатор-тышандарда аныталан цитогенетикалы згерістер оларды мекен ету ортасында кездесетін радионуклидтерді жоары млшеріне байланысты болады. йткені осындай техногендік факторларды серінен хромосомалы мутацияларды алыптасатындыы наты длелденген [13-14].

Алынан цитогенетикалы крсеткіштерді малматтарына талдау жасау арылы, Степногорск тау-кен химиялы комбинатыны алды йінділеріні маайынан зерттелген екі трлі тышантріздес кеміргіштерді ішінен, секіргіш тышандарды сйек миы лпаларындаы жасушалара радиация сулесіні серлері цитогенетикалы дісті кмегімен дйекті трде сипатталатыны белгілі болды. Демек, осы тышан трін оршаан ортаа генетикалы мониторинг жасаанда биоиндикатор есебінде пайдалануа болады.

дебиеттер

1. Дубинин Н.П. Современные проблемы в изучении генетических последствий загрязнения окружающей среды // Современные проблемы генетических последствий загрязнений окружающей среды и охраны генофонда.

– Алма-Ата, Наука КазССР - 1989. –С.3-14

2. Бигалиев А.Б., Бигалиев А.А. Проблемы радиационной генетики и экологии в Казахстане в условиях загрязнения природной среды // Астана медициналы журналы «Медико-биологические и экологические проблемы в уранодобывающих регионах». - Астана, 2007. - С.11-12

3. Шевченко В.А., Печкуренков В.Л., Абрамов В.И. Радиационная генетика природных популяции – М.: Наука, 1992. - 221 с

4. Kazymbet P.K., Seisebaev A.T. Problems of complex assessment of radiobioecological situation and public health in uranium-extraction region of Kazakhstan // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2002.- Vol.42, №6. - р.

750-753

5. Криволуцкий Д.А. Наземные животные - биоиндикатор ионизирующих излучений // Биология атомного века. Новое в жизни науке. Серия биология. – М.: Издательство «Знание». – 1983.-№7.-С.37-47

6. Основные принципы оценки воздействия ионизирующих излучений на живые организмы, за исключением человека: Публикация 91 МКРЗ: Перевод с англ. М. Комтехпринт, 2004 – 76 с

7. Осанов Д.П. Дозиметрия и радиационная биофизика кожи. – М.:Энергоатомиздат, 1990.-224 с

8. Маклюк Ю.А., Гащак С.П., Максименко А.М., Бондарьков М.Д., Бресфорд Н. Величина и структура дозовых нагрузок у мелких млекопитающих Чернобыльской зоны через 19 лет после аварии// Ядерна фізика та енергетика №3 (21) 2007, С.81-91

9. Ford C.E., Hamerton J.L. A colchicines, hypotonic citrate, squash sequence for mammalian chromosomes //Stain. Technol.-1956.–V.31, p 247-251

10. Макгрегор Г., Варли Дж. Методы работы с хромосомами животных., М.: Мир, 1989. -286 с

11. Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Ванчугова Н.Н. и др. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность. – Томск: Изд-во ТомГУ, 1992. - 272 с

12. азымбет П.., Алтаева Н.З. Амола облысыны уран ндіретін ірлердегі тышан тріздес кемірушілерді тіршілік ететін ортасыны жне й жануарлары жайылатын жерлерді радиоэкологиялы жадайы // Астана медициналы журналы, Астана, 2009, 145-148 б

13. Зайнуллин В.Г. Генетические эффекты хронического облучения в малых дозах ионизирующего излучения.- Санкт - Петербург: Наука, 1998. -100 с

14. Дубинин Н.П. Радиационный и химический мутагенез. М.: Наука.с Резюме В статье приводится результаты цитогенетического исследования мышевидных грызунов, обитающих в уранодобывающих регионах Акмолинской области. Установлена, высокая степень цитогенетической нестабильности в метафазных пластинках костного мозга мышевидных грызунов. Предлагается использовать мышевидных грызунов в качестве биоиндикаторов генетического мониторинга в уранодобывающих регионах.

Summary

Results of cytogenetically researches of the mice near uranium-mining enterprises Akmolinsk regions were presented in this article. High level of cytogenetical instability in somatic cells of mice which were bred on the pastures within near uranium-mining enterprises for several generations may be caused by chronic radiation in low doses.

БИОЛОГИЯЛЫ ЫЛЫМДАР

УРАН НДІРЕТІН ІРДЕ МЕКЕНДЕЙТІН ТЫШАН ТРІЗДЕС

КЕМІРУШІЛЕР ОРШААН ОРТАНЫ БИОИНДИКАТОРЫ

–  –  –

Биогеоценоздарды радиоактивті заттармен ластануы организмдерді мекен ету ортасындаы жаа абиотикалы фактор болып саналады. Сондытан иондаушы сулелерді серіні генетикалы салдарын анытау шін табии популяциялар мен экожйедегі генетикалы процестерді зерттеу керек [1-2].

Жануар популяциялары шін оршаан ортаны радиоактивті ластануыны серін зерттеу, табии бірлестікте пайда болатын генетикалы салдарларды млшерін анытауда негізгі роль атарады [3]. азастанны Солтстік аймаында жргізілген уран ндіру жмыстарыны нтижесінде, жалпы радиоактивті белсенділігі 168,4 мы Кu, клемі 61 млн. тонна радиоактивті алдытар жинаталан [4]. Жануарлар экожйені маызды элементтеріні бірі болып табыландытан, иондаушы сулелерді азаа жне жануарлар популяциясына генетикалы серін зерттеу жалпы биогеоценоз шін теориялы жне практикалы маызы зор [5]. Сторектілерді тест-объектілеріні рамына кіретіндігі жніндегі негізгі ережелер Радиациялы ауіпсіздік жніндегі Халыаралы комиссия жариялымында жарыа шыан [6].

ылыми дебиеттердегі малматтара талдау жасаанда уран ндірісіні ауматарында мекендейтін сторектілер популяцияларыны хромосомаларыны сипаттамалары, тым уалаушылы асиеттері толы зерттелмегені аныталды. Сондытан уран рудасын шыару жне айта деу, радиоактивті алдытарды сатау шараларымен алыптасан крделі радиоэкологиялы жадайды табии сторектілер популяциясы шін потенциалды ауіптілігі бл жмысты маыздылыы мен зектілігін крсетеді.

Зерттеу нысаны жне дістері. Зерттеу жмыстары Амола облысыны уран ндіретін ірлерінде: Степногор тау-химиялы комбинатыны радиоактивті-алдытарды сатайтын оймасыны маында жргізілді.

Салыстырмалы айма ретінде Степногор аласыны ндіріс орындарынан 10-20 км ара ашытыта, шыыс баытта орналасан, алыпты радиациялы фонды, географиялы крсеткіштері бойынша сас айма тадалынып алынды. Бл фонды айматан салыстырмалы топ жануарлары сталынды. Сторектілер мекендейтін жерлерді радиациялы жадайы оршаан орта объектілерін (топыра, су, сімдік) зерттеу негізінде бааланып, сырты сулелендіруден туындайтын сіірілетін дозаны млшері айындалды. Жабайы кеміруші тышандарды сырты гамма-сулесінен жне бета-сулесінен алатын дозасын есептеу шін тура дозиметрия дісі олданылды [7-8]. Цитогенетикалы зерттеулерді объектісі ретінде келесі тышантріздес кеміргіштер: лкен тышан (Большой тушканчик - Allactaga major Kerr) жне секіргіш тышан (Тушканчик прыгун - Allactaga saltator Ewersman) тадалынып алынды.

Тышандарды латынша аттарын ысартып Allactaga major Kern – A.m., ал Allactaga saltator Eversman – A.s. деп жазылды. Цитогенетикалы талдаулар мен хромосомалы аберрацияларды зерттеу барысында сторектілерді цитогенетикасына негізделген ылыми-дістемелік нсауа сйкес жмыстар атарылды [9-11].

Алынан нтижелерді талдау. Радиометриялы зерттеу нтижесінде Allactaga major Kerr. жне Allactaga saltator Ewersm сталынан жерлерде гамма-сулесіні эквивалентті дозасыны кші 0,65-0,80 мкЗв/са. ауытыды.

Альфа-блшектеріні тыызды аымы Allactaga major Kerr. мекендейтін жерлерде 0,97-1,97 блшек/ см2хмин згерсе, бета-сулесіні тыызды аымы 111,47 – 144,06 блшек/ см2хмин ауытып, салыстырмалы топты жануарлары мекендейтін жерлермен салыстыранда гамма–сулесіні экивалентті дозасыны кші орташа шамасы 5,5 есе, бета-блшектеріні аым тыыздыы 15 есеге дейін жоары болды. Тжірибелік топты жануарлары мекендейтін ортада альфа-блшектермен ластану аныталды (кесте 1).

–  –  –

Allactaga major Kerr. жне Allactaga saltator Ewersm індерінен алынан топыра лгілеріндегі радионуклидтерді млшері зерттелінді. Салыстырмалы топпен салыстыранда топырата 238U млшері 2 есе, 226Ra 15 есе, 232Th 46 есе, Pb 6 есе жоары болды. сімдік лгілерінде 226Ra млшері 2 есе, 210Pb млшері 3 есе, 238U млшері салыстырмалы лгілермен арастыранда 2 есе жоары болды. Су лгілерінде 238U жне 226Ra млшері фонды дегейден 2 есе дейін жоары болды [12]. Радиоактивті ластанан жерлерде мекендейтін тышандар шін сырты ионды сулеленуден сіірген доза млшері баылау тобымен салыстыранда дозалы жктеме млшері 10,57-ден 19,67 есеге дейін жоары болды.

Сонымен, комплексті радиоэкологиялы жмыстарды жргізуді негізінде Степногор тау-химиялы комбинатыны радиоактивті алдытарды сатайтын оймасыны маында мекендейтін кеміруші тышандар немі ионды радиацияны серінде болатындыы аныталды.

Жмыс барысында тышандарды екі трінен де, жне оларды баылау мен тжірибе топтарынан шамамен бірдей жасушалара цитогенетикалы талдау жргізілді. Радиоактивті алдытарды сатайтын ойманы маында мекендейтін Allactaga major Kern. эритроциттеріндегі микроядроларды кездесу жиілігі 2,6±0,6 ‰ болса, ал салыстырмалы тобындаы жануарларды бл крсеткіш 1,2±0,4 ‰ (p0,05) болды. Радиоактивті-ластанан жерлерде мекендейтін Allactaga saltator Eversman. эритроциттеріндегі микроядроларды кездесу жиілігі 3,7±1,1 ‰ болып, осы трге жататын салыстырмалы тобымен салыстыранда сенімді тре 2,65 есе жоары болды (салыстырмалы топта бл крсеткіш- 1,4±0,5 ‰). Бл микроядролы тест бойынша Allactaga saltator Eversman. Allactaga major Kern.-мен салыстыранда мутагенді факторлара жоары сезімталдылыты крсетті.

лкен тышанны гиподиплоидты хромосомаларыны жиынтыы бар жасушаларды дегейін баылау жне тжірибе топтарында салыстыранда, радиация дегейі алыпты млшерден бірнеше есе арты жерлерден сталан тжірибе тобындаы кеміргіштерді гемопоэтикалы тіндерінде осындай клеткаларды млшері баылау тобынан 1,85 есе жоары болатыны аныталды (сйкесінше 10,81±0,82% жне 5,84±0,52%). Тышандарды осы тріндегі (A.m.) тжірибелік топтаы гипердиплоидты хромосомалы жиынтыы бар жасушаларды млшері 2,11±0,57% болса, ал баылау тобындаы бл цитогенетикалы крсеткіш тек ана 0,60±0,17% болып, тжірибелік топта 3,52 есе жоары болды (кесте 2).

Хромосомалары зерттелген тышандарды трлері мен оларды тжірибелік жне баылау топтарындаы полиплоидты жиынтыы бар жасушалар дегейі 3-ші кестеде крсетілген. лкен тышанны тжірибелік тобындаы жануарларды гемопоэтикалы лпаларында полиплоидты жасушаларды млшері 2,37±0,53%, ал баылау тобында тек ана 0,18±0,05% болды, немесе тжірибелік топтаы тышандарды организмінде полиплоидты жасушаларды кездесу жиілігі баылау топтарындаы тышандардан 13,17 есе жоары болды. Секіргіш тышандарды тжірибелік тобыны 1182 метафазалы жасушаларыны 60 жасушасында (4,24±0,75%) полиплоидты хромосомалар жиынтыы болса, ал баылау тобында бл цитогенетикалы крсеткішті дегейі 0,66±0,19% (немесе 415 метафазалы жасушаны тек ана 3 жасушасы) болды. Басаша айтанда тжірибелік топтаы жануарларды сйек миы тінінде полиплоидты жасушаларды млшері салыстырмалы тобымен салыстыранда 6,42 есе жоары боланы аныталды.

Кесте 2 - Цитогенетикалы зерттелген лкен тышандар (Allactaga major Kern) мен секіргіш тышандарды (Allactaga saltator) сйек миы лпаларындаы гиподиплоидты жне гипердиплоидты (анеуплоидты) хромосомалар жиынтыы бар жасушаларды млшері

–  –  –

Барлыы 20 13 7 1597 11,02±1,40 3,12± 14,09±1,72 1,04 Жалпы саны 40 26 14 3381 10,29±1,41 2,43± 12,70±1,71 1,03 Ескерту - * - р0,05, ** - р0,001 баылау тобымен салыстыранда наты айырмашылы.

Цитогенетикалы трыдан зерттелген лкен тышан мен секіргіш тышандарды баылау топтарыны жасушаларында хромосомаларды аберрациялары бар жасушаларды дегейі сйкесінше 0,60±0,19% жне 1,22±0,37% болды. лкен тышандарды тжірибелік тобына жататын 15 жануарлардан зерттелген 1341 метафазалы жасушаларыны ішінен 46 жасушада (немесе 3,39±0,60%) хромосомаларды аберрациялары аныталды.

Басаша айтанда тжірибелік топтаы лкен тышандарды гемопоэтикалы лпаларында хромосомаларында аберрациялары бар жасушаларды саны баылау тобындаы тышандардан 5,65 есе арты боланын атап ту керек.

Секіргіш тышандарды тжірибелік тобында да хромосомаларында аберрациялары бар жасушаларды саны баылау тобыны сас цитогенетикалы сипаттамасынан 3,80 есе кп болды.

Кесте 3 - Цитогенетикалы зерттелген лкен тышандар (Allactaga major Kern) мен секіргіш тышандарды (Allactaga saltator) сйек миы лпаларындаы полиплоидты хромосомалар жиынтыы бар жасушаларды млшері

–  –  –

Ескерту: * - р0,001 баылау тобымен салыстыранда наты айырмашылы Уран ндіретін ірлерде мекендейтін биоиндикатор-тышандарда аныталан цитогенетикалы згерістер оларды мекен ету ортасында кездесетін радионуклидтерді жоары млшеріне байланысты болады. йткені осындай техногендік факторларды серінен хромосомалы мутацияларды алыптасатындыы наты длелденген [13-14].

Алынан цитогенетикалы крсеткіштерді малматтарына талдау жасау арылы, Степногорск тау-кен химиялы комбинатыны алды йінділеріні маайынан зерттелген екі трлі тышантріздес кеміргіштерді ішінен, секіргіш тышандарды сйек миы лпаларындаы жасушалара радиация сулесіні серлері цитогенетикалы дісті кмегімен дйекті трде сипатталатыны белгілі болды. Демек, осы тышан трін оршаан ортаа генетикалы мониторинг жасаанда биоиндикатор есебінде пайдалануа болады.

–  –  –

1. Дубинин Н.П. Современные проблемы в изучении генетических последствий загрязнения окружающей среды // Современные проблемы генетических последствий загрязнений окружающей среды и охраны генофонда.

– Алма-Ата, Наука КазССР - 1989. –С.3-14

2. Бигалиев А.Б., Бигалиев А.А. Проблемы радиационной генетики и экологии в Казахстане в условиях загрязнения природной среды // Астана медициналы журналы «Медико-биологические и экологические проблемы в уранодобывающих регионах». - Астана, 2007. - С.11-12

3. Шевченко В.А., Печкуренков В.Л., Абрамов В.И. Радиационная генетика природных популяции – М.: Наука, 1992. - 221 с

4. Kazymbet P.K., Seisebaev A.T. Problems of complex assessment of radiobioecological situation and public health in uranium-extraction region of Kazakhstan // Радиационная биология. Радиоэкология.- 2002.- Vol.42, №6. - р.

750-753

5. Криволуцкий Д.А. Наземные животные - биоиндикатор ионизирующих излучений // Биология атомного века. Новое в жизни науке. Серия биология. – М.: Издательство «Знание». – 1983.-№7.-С.37-47

6. Основные принципы оценки воздействия ионизирующих излучений на живые организмы, за исключением человека: Публикация 91 МКРЗ: Перевод с англ. М. Комтехпринт, 2004 – 76 с

7. Осанов Д.П. Дозиметрия и радиационная биофизика кожи. – М.:Энергоатомиздат, 1990.-224 с

8. Маклюк Ю.А., Гащак С.П., Максименко А.М., Бондарьков М.Д., Бресфорд Н. Величина и структура дозовых нагрузок у мелких млекопитающих Чернобыльской зоны через 19 лет после аварии// Ядерна фізика та енергетика №3 (21) 2007, С.81-91

9. Ford C.E., Hamerton J.L. A colchicines, hypotonic citrate, squash sequence for mammalian chromosomes //Stain. Technol.-1956.–V.31, p 247-251

10. Макгрегор Г., Варли Дж. Методы работы с хромосомами животных., М.: Мир, 1989. -286 с

11. Ильинских Н.Н., Новицкий В.В., Ванчугова Н.Н. и др. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность. – Томск: Изд-во ТомГУ, 1992. - 272 с

12. азымбет П.., Алтаева Н.З. Амола облысыны уран ндіретін ірлердегі тышан тріздес кемірушілерді тіршілік ететін ортасыны жне й жануарлары жайылатын жерлерді радиоэкологиялы жадайы // Астана медициналы журналы, Астана, 2009, 145-148 б

13. Зайнуллин В.Г. Генетические эффекты хронического облучения в малых дозах ионизирующего излучения.- Санкт - Петербург: Наука, 1998. -100 с

14. Дубинин Н.П. Радиационный и химический мутагенез. М.: Наука.с <

Резюме

В статье приводится результаты цитогенетического исследования мышевидных грызунов, обитающих в уранодобывающих регионах Акмолинской области. Исследователем установлена высокая степень цитогенетической нестабильности в метафазных пластинках костного мозга мышевидных грызунов. Автором предлагается использовать мышевидных грызунов в качестве биоиндикаторов генетического мониторинга в уранодобывающих регионах Акмолинской области.

Summary

The results of cytogenetically researches of the mice near uranium- mining enterprises Akmolinsk regions have been were presented in this article. High level of cytogenetically instability in somatic cells of mice which were bred on the pastures within near uranium-mining enterprises for several generations may be caused by chronic radiation in low doses.

The using of mise in the quality of biondicators of genetic monitoring in the uranium mining Akmolinsk regions is presented by author.

ХИМИОПРЕПАРАТЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ

–  –  –

Значительное распространение бруцеллеза в Республике Казахстан создает серьезные препятствия для развития животноводства и постоянную угрозу здоровью населения. За период, прошедший со времени открытия возбудителей бруцеллеза (D.Bruce, 1886), достигнуты большие успехи в области изучения многих вопросов эпизоотологии и эпидемиологии болезней, их клинических проявлений и патогенеза, разработки средств и методов диагностики, профилактики и т. д. Однако, проблема ликвидации этой болезни представляет значительные трудности вследствие широкого их распространения, вариабельности и убиквитарности возбудителей (способности к обитанию в организме самых разнообразных живых существ), а также в ряде случаев латентного течения инфекций и связанных с этим сложностей диагностики болезней.

Современное животноводство требует от научных, практических специалистов систематизации в проведении каких-либо мер. Многие методы и сегодня перспективны при борьбе с инфекциями. Но ситуация так сложилась, что мы должны решить насколько ценен тот или иной метод, нужны ли современные разработки. Бруцеллезная инфекция научилась защищаться от искусственного воздействия на них, и каждое действие на нее приносит выгоду ей. Она может реверсировать, трансформировать в другую форму, „озлобиться” т.е. индуцировать в вирулентное состояние, изменить генетическую систему, имитировать другую болезнь, персестировать длительное время. Понятие о том, что бруцеллы сохраняются короткое время быстрее „ложное”, т.к. Мырзалиев А.

пересеивая лиофизированные штаммы, спустя 29 лет и засушенные на твердой питательной среде (находились в сухом месте) в течение 1 - 4 лет (срок испытания пришел к выводу, что бруцеллы сохраняют свои основные свойства кроме вирулентности). Поэтому мы должны быть готовыми в кратчайшие сроки купировать и ликвидировать его, иначе возможны вышеописанные случаи.

Необходимость применения антибиотиков существует, даже при лечении людей, при этом рекомендуют комплекс из римфалицина и доксициклина.

Для лечения бруцеллеза людей разрабатывают всевозможные современные препараты антибиотического действия: лактаны, макролиды, хинолоны и другие. В тоже время животным антибиотики применяют с особой осторожностью т.к. возможно искусственное влияние их через продукты питания, которые действуют на человека.

Ряд ученых [1, 2, 3, 4, 5, 6] работали над созданием противобруцеллезных комплексов, были получены весьма положительные результаты, но в основном они не нашли своего применения. Поэтому разработка современных профилактических препаратов перспективно важно для практики.

Материалы и методы Начальным этапом нашей работы явилось изыскание антибиотиков с невысокой стоимостью, активно подавляющих размножение бруцелл с этой целью нами были использованы некоторые антибиотики, которые согласно инструкции влияют губительно на бруцеллы.

В работе были использованы антибиотики:

морфоциклин тетрациклина гидрохлорид окситетрациклин стрептомицин стрептоцид

В качестве иммуностимуляторов были использованы:

масляный адъювант полиоксидоний

В качестве тестовых культур использовали:

Brucella melitensis Rev-1, биотип 1 Brucella abortus 82 В качестве лабораторных животных были использованы морские свинки.

Результаты исследований Результаты определения чувствительности бруцелл штаммов melitensis Rev-1 и abortus 82 по отношению к различным антибиотикам представлены в таблицах 1, 2.

Таблица 1 – Чувствительность бруцелл к антибиотикам

–  –  –

Из данных таблицы 1, 2 видно, что наиболее активным препаратом является морфоциклин, рост бруцелл наблюдается в разведениях 0,25 мкг/мл и ниже, следующим по активности является тетрациклина гидрохлорид, затем следуют окситетрациклин, стрептомицин. Антибиотики, смешанные в равных количествах со стрептомицином или стрептоцидом слабо снижают противобруцеллезную активность.

При определении бруцелл выделенных в Кустанайской области было определено, что они обладают высокой чувствительностью к тетрациклину гидрохлориду, морфоциклину, тетрахлориду, что позволяет вести дальнейшие работы по созданию профилактических препаратов с учетом видовой принадлежности полевого штамма и региональных особенностей.

Известно, что вышеописанные препараты имеют краткий срок действия.

Поэтому нами решено было продолжить исследования и определить возможность действия их при совместном введении с препаратами, пролонгирующими и иммуностимулирующими их действие. С этой целью после серии экспериментальных работ была создана композиция из масляного адъюванта, антибиотика и полиоксидония, которую использовали с целью определения профилактической эффективности на морских свинках, для этого было создано 4 группы морских свинок по 10 голов и 4 по 5 морских свинок, которые заражены двухсуточной агаровой культурой: Бр. Мелитензис Rev-1, биотип 1, B.abortus 82 биотип 3, в дозе 200 микробных клеток. Первой – четвертой группам животных одновременно проводили заражения и вводили препарат, состоящий из 20 тыс. ед. тетрахлорида, 15 тыс. ед. стрептомицина, 6 см масляного адъюванта и 3см3 раствора полиоксидония, доза на 1 животное 1см3, 5-8 группы животных служили контролем заражения.

Введение лекарственного препарата проводили четырехкратно через каждые 10 дней. Полученные при этом результаты отражены в таблице 3.

Таблица 3 – Профилактическая активность лекарственной смеси при бруцеллезе морских свинок

–  –  –

Анализируя результаты исследований, приведенные в таблице 3 можно сделать вывод, что от морских свинок первой и третьей группы культуры бруцелл выделены соответственно группам 2, 1, а противостояло заражению 90% животных. Эффективным оказался препарат при введении его морским свинкам зараженным полевыми штаммами бруцелл (2, 4 группы).

Выводы Комплекс антибиотиков, тетрациклин гидрохлорид + стрептомицина сульфат оказывает губительное действие на бруцелл в том числе на бруцелл выделенных в Костанайской области.

Литература

1. Моисеев Д.В. Комбинированный метод лечения бруцеллеза //Советская медицина. – 1948.-№3.-С.27-30

2. Уралев В.С. К вопросу о комбинированной терапии бруцеллеза антибиотиками с вакциной//Тр. Ростовской противочумный институт. – 1957.Т.12.- С. 467-480

3. Карпеева В.Е. Действие на бруцелл антибиотиков химиотерапевтических препаратов и их комбинаций в опытах in vitro и in vivo //Тр. ВИЭВ.М.: Сельхозиздат.- 1959.-Т.22.-С.286-295

4. Ariza J Gudiol F Pallaris R Rufi G Fernandez – Viladrich P. Comparative trial of rifampicin – doxycycline versus tetracycline – streptomycin in the therapy of human brucellosis. Antimicrob Agents Chemother 1985; 28: Р. 548-51

5. Канжигитов Е.К. Антибиотикотерапия экспериментального бруцеллеза животных //Достижения ветеринарной науки Казахстан в решении проблем защиты животных от инфекционных и инвазионных болезней. Сборник научных трудов, посвященных 100- летию КазНИВИ, Том LI.- С. 121-124

6. Лесков В.П. Иммуностимуляторы //Аллергия, астма и клин. Иммун.С.12-25 <

Тйін

Жмыста бруцеллаларды антибиотиктерге сезімталдыы, дрілік оспаларды профилактикалы белсенділігі жне препараттарды кешенді трде бруцеллезді алдын алу шараларын жргізу жмыстарында олдану ммкіншіліктері туралы мліметтер берілген.

Майлы адъювант, антибиотик жне полиоксидоний композициясыны профилактикалы тиімділігі айындалды. Тетрациклин гидрохлорид пен стрептомицин сульфат кешеніні бруцеллаларды жоятын сері аныталды.

Summary

In the work materials about sensitivity the brucells to antibiotics are presented, to preventive activity of a medicinal mix at brucellosis at porpoises and perspectivity of their application in a complex with the immunomodulator for the purpose of its preventive maintenance.

The effectiveness of prophylactic compositions of oil adjuvant, antibiotics, and polyoxidonium was determined. Destructive effect on Brucella complex antibiotics tetracycline hydrochloride + streptomycin sulfate. Wasd defined the efficacy against field strains of Brucella was determined.

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВОДЫ РЕКИ

ИШИМ И БИОРАЗНООБРАЗИЕ ПЕРИФИТОНА ВОДОЕМА

–  –  –

Проблемы загрязнения водных экосистем были и остаются актуальными на сегодняшний день.

Для получения объективной картины загрязнения водных экосистем ведутся исследования в двух направлениях. Во-первых, применяют методы инструментального химического анализа, во-вторых, все более широко используют биоиндикаторы.

Река Ишим является наиболее крупным водоисточником на территории Акмолинской области со своими притоками – Колутон, Жабай, Терс-Аккан.

По своему режиму река относится к типу равнинных, преимущественно снегового питания. Река вскрывается в середине апреля, а иногда в конце марта или в начале апреля. Вода в половодье бывает мутная, без запаха с низкой окисляемостью, невысоким содержанием взвешенных веществ. За счет разбавления талыми водами содержание солей кальция и магния уменьшается, жесткость снижается. Наиболее высокие показатели минерализации, общей жесткости наблюдаются в засушливый, жаркий месяц лета - июнь.

Половодье заканчивается во второй половине мая – начале июня.

Население сельских мест использует воду для хозяйственно-питьевых целей, как в централизованном, так и в децентрализованном порядке. Кроме того, река Ишим используется рабочими и служащими городов и рабочих поселков в целях рекреации. В верховьях реки эксплуатируется Вячеславское водохранилище, в среднем течении – Сергеевское водохранилище, кроме того, река Ишим служит источником питания Булаевского, Пресновского, Мамлютского и других сельскохозяйственных систем водопроводов. Скорость течения воды в межень составляет 0,2-0,5 м/сек. Ширина реки не превышает 50м, глубина 1.5-2.0 м, встречаются отдельные впадины до 15-18 м.

Максимальный расход воды реки Ишим у г. Астана составляет 1080-1100 куб.м/сек, годовой объем стока 1299967 тыс. куб/год. Среднегодовой расход воды 1,11 куб. м/сек.

Основными источниками загрязнения реки Ишим являются ливневые стоки с территории населенных мест, а также минеральные и органические удобрения, смываемые талыми, дождевыми водами с водосборных площадей.

Также к рассеянным источникам загрязнения можно отнести летние пастбища и стоянки крупного рогатого и мелкого скота.

В качестве абиотических факторов исследовали значения следующих показателей: БПК5, кислотность воды рН, азота нитратного (NO3), нитритного (NO2) и аммонийного (NН4), цинка (Zn), железа (Fe), меди (Cu), хрома (Cr), магний (Mg), кальций (Ca), нефтепродуктов, синтетических поверхностноактивных веществ (СПАВ), сульфатов (SO4), хлоридов (Cl), карбонатов, минерализацию (таблица 1).

Химический анализ воды реки говорит о том, что в районе населенных пунктов и ниже в воде увеличивается содержание азотосодержащих веществ:

аммония солевого (летом увеличение ПДК в 2,5 раз, осенью - в 1,6-1,7), нитритов (летом превышение в городе ПДК – в 1,8 раз, осенью в 1,2 раза ниже города.), в то время как в чистых водоисточниках аммиак, нитриты не регистрируются, а наличие их говорит о свежем или недавнем загрязнении органическими веществами.

Если сравнивать с данными прошлых лет [1], то, например, в 1994 г.

содержание аммония солевого в р. Ишим выше города Акмолы регистрировалось в пределах 0,12-0.2 мг/л, ниже города 0,24-0,35 мг/л. Таким образом, за четырнадцать лет загрязнение в реке Ишим азотосодержащими веществами усилилось в среднем в 4 раза.

Весной также зарегистрировано превышение ПДК по содержанию сульфатов в реке ниже города в 1,4 раза, превышение ПДК по содержанию Fe (в 1,2 раза) и Cu (в 3 раза) выше города и в городской части реки.

Для летнего периода характерно общее повышение жесткости воды в реке до значения 7,0-7,2. При этом регистрируется превышение ПДК по содержанию следующих химических компонентов в реке: нитритов, как уже было указано выше - в 1,8 раз в городе и ниже города, сульфатов – в 2,8 раз в городе и ниже города, Mg – ниже города в 1,2 раза, Cu – в 2 раза выше города и ниже города, аммония солевого – в городе в 1,4 раза и в 2,5 раз ниже города.

Осенью также сохраняется повышение жесткости воды 7,2 и превышение концентраций перечисленных соединений, при этом содержание меди и аммония солевого возрастает еще больше – в 3-4 раза и 5,8 раза соответственно.

Кроме того, в осенний период зафиксировано превышение содержания ПДК для нефтепродуктов – в городе в 2,3 раза и ниже черты города в 2,7 раза.

Сопоставление соответствия содержания концентраций других соединений их ПДК, в том числе и для детергентов (СПАВ) в воде пока не вызывает тревоги, не было также обнаружено хрома и цинка.

Однако показатель БПК5 (биологическая потребность в кислороде) в норме составляет 3, а в реке Ишим осенью этот показатель значительно падает, достигая в среднем 1,6.

Таблица 1 - Некоторые химические показатели качества воды в реке Ишим 2008 г. в окрестностях и в самом городе Астана

–  –  –

Содержание в реке необходимого количества кислорода является одним из основных санитарных требований, предъявляемых к качеству воды.

Вредное действие оказывают все загрязнения, которые так или иначе содействуют снижению содержания кислорода в воде. Поверхностно активные вещества – жиры, масла, смазочные материалы – образуют на поверхности воды пленку, которая препятствует газообмену между водой и атмосферой, что снижает степень насыщенности воды кислородом. Значительный объем таких соединений сбрасывается в реку вместе с промышленными и бытовыми стоками.

Кроме того, тревогу вызывает значения рН в районе Парк-мост весной 8,8, и 8,6 ниже города, что также свидетельствует о загрязнении промышленными стоками. Известно, что в водоемах со значениями превышающими рН 8,5 рыба не живет.

Если сравнить с данными за 1994 год, то специфические загрязнения, такие как: нефтепродукты, синтетические поверхностно-активные вещества, цинк, медь, фенолы на тот период отсутствовали [1].

Существенное влияние на загрязнение воды рек оказывают города Астана, Атбасар, с. Балкашино и др. Отсутствие ливневой канализации способствует попаданию ливневых вод с территории населенных мест в открытые водоемы, а ливневые воды по своему химическому и бактериологическому составу приравниваются к фекально-хозяйственным водам. В них содержится и патогенная микрофлора, и яйца гельминтов. В 1 литре сточных вод г. Астаны содержится от 5 до 15 яиц различных гельминтов.

Численные соотношения разных видов, популяций и целых сообществ часто служат лучшим индикатором, чем численность одного вида, так как целое лучше, чем часть, отражает общую сумму условий. Такой подход считается продуктивным при биологической индикации загрязнения водной среды тяжелыми металлами на основе изучения фитобентосных сообществ.

По мнению ряда авторов [2] сообщество перифитона оказывается более чувствительным индикатором качества воды, чем фитопланктон вследствие того, что организмы перифитона в целом образуют сообщество с гораздо большим видовым разнообразием и гораздо менее подвижное в пределах водоема, нами было изучено обилие видов перифитона, взятых на трех участках реки Ишим (2 км выше города, в городе – парк мост, 2 км ниже города) в течение вегетационного периода.

Перифитон собирался малой сетью Джеди (диаметр 19 см, сито №72), фиксировался в 4 %-ном формалине. Наиболее мелкие организмы концентрировались до 25 мл и просчитывались в двух камерах Богорова.

За период исследований в составе перифитона нами было обнаружено 265 видов. Среди них 11 видов принадлежали цианобактериям, представленными тремя основными порядками: Chroococales, Nostocales, Oscillatoriales, 93 видов принадлежали водорослям, среди которых наиболее разнообразными были диатомовые (Diatomeae).

Как известно, диатомовые водоросли являются очень чувствительными к загрязнению водоемов [3]. В этой связи мы изучали разнообразие диатомовых, как индикаторов загрязнения по классификации М. Лафона, М. Коста и др. [3].

Выше города в течение вегетационного периода в реке Ишим насчитывалось до 6 родов диатомовых, среди которых Asterionella, Caloneis, Cocconeis, Diatoma, Fragilaria, Gomphoneis. Эти представители диатомовых согласно классификации упомянутых авторов соответствуют среднечувствительным (4 класс из 5) к загрязнению биоиндикаторам. В районе парк-мост, что соответствует течению реки в центре города, нами были встречены представители тех же родов, за исключением Caloneis, Fragilaria, но к ним прибавился еще один представитель Melosira, который можно отнести к классу среднечувствительных или индифферентных (3 класс). Ниже черты города по течению реки из перечисленных диатомовых также не встречались Caloneis, Fragilaria, а также Asterionella,Gomphoneis. Из чего можно сделать вывод об умеренном загрязнении реки Ишим.

В дальнейшей работе целесообразно исследовать воды реки на содержание ртути, ряда тяжелых металлов, что составляет нашу ближайшую задачу.

В связи с быстрыми темпами урбанизации и несколько замедленным строительством очистных сооружений или их неудовлетворительной эксплуатацией водные бассейны и почва загрязняются бытовыми отходами.

Очистные сооружения решают проблему сохранения качества пресных вод лишь до определенной стадии развития экономики конкретных географических регионов. Затем наступает момент, когда местных гидроресурсов уже не хватает для разбавления возросшего количества очищенных стоков. Тогда начинается прогрессирующее загрязнение гидроресурсов, наступает их качественное истощение. Кроме того, на всех станциях очистки по мере роста стоков встает проблема размещения значительных объемов отфильтрованных загрязняющих веществ. Таким образом, очистка промышленных и коммунальных стоков дает лишь временное решение местных задач охраны вод от загрянения. Кардинальные пути защиты от загрязнения и разрушения природноаквальных и сопряженных с ними природных территориальных комплексов заключается в уменьшении или даже полном прекращении сброса в водоемы отработанных, в том числе и очищенных сточных вод.

В будущем очистные сооружения не будут сбрасывать отработанные воды в водоемы, а станут одним из технологических звеньев цепи замкнутого водообеспечения.

Прогресс техники, тщательный учет местных гидрологических, физико- и экономико-географических условий при планировании и формировании территориально-производственных комплексов позволяет в перспективе обеспечить количественное и качественное сохранение всех звеньев круговорота пресной воды, превратить ресурсы пресных вод в неисчерпаемые.

Анализируя полученные данные, можно заключить, что вода в реке Ишим перед г. Астана получает большое количество неорганических веществ из водоема-охладителя ГРЭС и при протекании через город значительно загрязняется минеральными солями). Это говорит о большой антропогенной нагрузке.

Литература

1. Ананьев Н.И., Исенов Ш.А., Мейрамов Э.А. Биоресурсы и экологическое состояние Акмолинской области. Акмола.-1997.-134 с

2. Абакумов В.А., Максимов В.Н. Экологические модуляции как показатель фонового состояния водной среды / Научные основы биомониторинга пресноводных экосистем. Труды советско-французского симпозиума. Астрахань.СССР 9-12 сент. 1985г.- С.104-117

3. Научные основы биомониторинга пресноводных экосистем /Тр. Совфранц. Симпозиума. Астрахань 9-12 сентября 1985.-Л.: Гидрометеоиздат 1988 164 с

Тйін

Есіл зеніні Астана аласына арайтын р трлі блігіні суыны гидрохимиялы крсеткіштеріне байланысты 2008 жылды жазы маусымындаы перифитонны ралуандылыы мен молдыы зерттелді.

Перифитоннны рамында 265 трді бар екендігі аныталды. Оны 11 трі цианобактериялар, 93 трі балдырлар. Жмысты нтижелері перифитонны тррамы аланы серіне сезімтал екендігін крсетті. Мнда кейбір трлеріні ластануа биоиндикаторлы ммкіндіктері талданылан. Жне маалада суойманы келешектегі экологиялы саулыыны ммкіндіктері крсетілген.



Pages:   || 2 |
Похожие работы:

«МБУ СОШ № 93 Интегрированный урок: "Функции в математике, физике и экологии" 7 класс.Разработали: учитель математики 1 категории Авдеева Елена Александровна, учитель физики 1 категории Кислицына Марина Владимировна Цели: Образовательные: формировать умение решать прикладные задачи;закрепить определения линейной функции и...»

«http://disclosure.primeАГЕНТСТВО ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ "ПРАЙМ" tass.ru/ Тел.: +7 (495) 974-76-64, 8-800-333-50-50. Факс: +7 (495) 637-45-60 E-mail: analitik@prime-tass.ru № 5(24) май 2011 г.В выпуске: ПРОЕКТ РАСПРЕДЕЛ...»

«1. Цель освоения дисциплины Целью освоения дисциплины "Агроэкология" является формирование навыков рационального использования потенциальных возможностей почвы, растений и животных при производстве сельскохозяйственной продукции.2. Место дисциплины в структуре ООП ВПО Дисциплина "Агроэкология" относится к вариативной части...»

«Феликс Петрович Филатов Клеймо создателя http://www.litres.ru/pages/biblio_book/?art=11961190 ISBN 978-5-4474-2574-6 Аннотация Книга доктора биологических наук Ф. П. Филатова "Клеймо создателя" посвящена одной из версий происхождения жизни на Земле, аргументированной формальными особе...»

«ОБЩЕСТВОЗНАНИЕ (ФК ГОС),6-9 КЛ Рабочая программа составлена на основе следующих документов: Закон РФ "Об образовании" Федеральный компонент государственного образовательного стандарта, утверждённый приказом Минобразования РФ от 05.03.2004 года № 1089; "Санитарно-эпидемиол...»

«Картография и геоинформатика УДК 528.9: 004.94 ПРИРОДНО-РЕСУРСНАЯ ГЕОИНФОРМАЦИОННАЯ МОДЕЛЬ РЕГИОНА КАК СРЕДСТВО ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПЛАНИРОВАНИЯ И ВЕДЕНИЯ ПРИРОДОПОЛЬЗОВАНИЯ Ольга Николаевна Николаева Сибирский государственный университет геосистем и технол...»

«МИНИСТЕРСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ЭКОЛОГИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО НЕДРОПОЛЬЗОВАНИЮ ПРИКАЗ № 853 г.МОСКВА 09.10.2013 О проведении аукциона на право пользования участком недр федерально...»

«УДК 577.323.23 Вестник СПбГУ. Сер. 4. 2012. Вып. 1 Р. А. Белых, И. Л. Волков, Н. А. Касьяненко ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ МОЛЕКУЛЫ ДНК С ИОНАМИ АЛЮМИНИЯ В РАСТВОРЕ Введение. Ионы металлов играют важную роль в биологических системах. Например, их присутствие необходимо для работы ДНК-полимеразы. Они играют и стр...»

«ГЛАДЫШЕВ ПАВЕЛ АЛЕКСАНДРОВИЧ РАЗРАБОТКА ФОТОБИОРЕАКТОРОВ ДЛЯ ЗАМКНУТЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ ЖИЗНЕОБЕСПЕЧЕНИЯ Специальность 03.00.23 – Биотехнология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата тех...»

«8 АНАЛИЗ АЛЬТЕРНАТИВНЫХ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ НАМЕЧАЕМОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ В соответствии с Приказом Госкомэкологии от 16.05.2000 г. №372 /1/ в настоящем разделе выполнен анализ альтернативных вариантов реализации намечаемой деятельн...»

«Рабочая программа дисциплины Редкие растения Направление подготовки 05.03.06 Экология и природопользование Квалификация (степень) выпускника Бакалавр Форма обучения Заочная Балашов СОДЕРЖАНИЕ 1....»

«1.Сохранение биологического разнообразия: от экосистемы к экосистемному подходу (В. Н. Большаков, А. А. Лущекина, В. М. Неронов) По результатам совещаний Конференции сторон, входящих в Конвенцию о биологическом разнообразии, и между...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского" Биологический факультет Кафедра биохимии и физиологии растений УТВ...»

«26.02.2016 – 03.03.2016, № 8 СУДЕБНЫЙ ВЗГЛЯД Главная статья Конкуренция в ЕС: движемся в правильном направлении Компетентное мнение Последние события на пути имплементации правил конкуренции ЕС в украинску...»

«1 ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА Рабочая программа основного общего образования по учебному курсу "Биосфера и человечество" 9 класс составлена в соответствии с федеральным компонентом государственного стандарта общего образования, одобренный совместным решением коллегии Минобразования Ро...»

«8. ФОНД ОЦЕНОЧНЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ПРОМЕЖУТОЧНОЙ АТТЕСТАЦИИ ОБУЧАЮЩИХСЯ ПО ДИСЦИПЛИНЕ (МОДУЛЮ). Общие сведения Физики, биологии и инженерных 1. Кафедра технологий 06.03.01 "Биология" профиль Общая 2. Направление подготовки биология 3. Дисциплина...»

«Государственное управление. Электронный вестник Выпуск № 55. Апрель 2016 г. П р о б л е м ы у п р а вл е н и я: т е о р и я и пр а кт и ка Блинов В.Н., Жуйков Е.О., Зигаева М.А. Представления руководителей сибирских компаний малого бизнеса об управленческих ошибках Блин...»

«Клемешова Кристина Валерьевна АДАПТИВНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ АКТИНИДИИ СЛАДКОЙ (Actinidia deliciosa Chevalier) В УСЛОВИЯХ ВЛАЖНЫХ СУБТРОПИКОВ РОССИИ Специальность 03.01.05 – физиология и биохимия растений Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата се...»

«Омский государственный университет Химический факультет Кафедра неорганической химии Дополнительная обучающая программа "Прикладная экология" Методические материалы и рабочая программа по курсу ГЕОХИМИЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ для студентов химического факультета Омск2005 Учебная программа "Геохим...»

«ПРОТОКОЛ ИТОГОВ ЗАКУПОК № ПИ-247606 СПОСОБОМ ЗАПРОС ЦЕНОВЫХ ПРЕДЛОЖЕНИЙ г. Астана Дата:03.05.2016 Организатор закупок способом запроса "Aкмoлинcкиe мeжcиcтeмныe элeктричecкиe ceти" ценовых предложений Заказчик закупок способом запроса ценовых "Электр желілерін басару жніндегі азастан компаниясы...»

«А.П.Левич. Субстанциональное время открытых систем // Метафизика. 2013. Т. 2. №1(7). С. 50-73 СУБСТАНЦИОНАЛЬНОЕ ВРЕМЯ ОТКРЫТЫХ СИСТЕМ А.П. Левич Кафедра биофизики биологического факультета Московского государственного универ...»

«Наносистеми, наноматеріали, нанотехнології © 2010 ІМФ (Інститут металофізики ім. Г. В. Курдюмова НАН України) Nanosystems, Nanomaterials, Nanotechnologies 2010, т. 8, № 4, сс. 787—798 Надруковано в Україні. Фотокопіювання дозволено тільки відповідн...»

«УДК 597-153:591.524:11(571.64) Френкель Светлана Эдуардовна Дрифт беспозвоночных как кормовая база молоди лососей в типичной малой реке Сахалина Специальность 03.02.10 – гидробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва-2011 Р...»

«УДК 631.5 Содержание тяжелых металлов Pb, Ni, Zn, Cu, Mn, Zr, Cr, Co и Sn в почвах Центральной зоны Республики Беларусь Позняк С.С. Международный государственный экологический университет имени А.Д. Сахарова Исследования по изучению содержания тяжелых металлов в почвах Центральной зоны Республики Б...»

«СИМВОЛ ЭПОХИ: ЛЮДИ, КНИГИ, СОБЫТИЯ ЛЮДИ, КНИГИ, СОБЫТИЯ СИМВОЛ ЭПОХИ: Аллегория медицинских профессий. Гравюра Хендрика Гольциуса. 1587. УДК 612.017:001.38 Хетагурова Л.Г.*, Рапопорт С.И.**, Ботоева Н.К.*** Л.Г. Хетагурова С.И. Рапопорт Н.К. Ботоева Этапы становления хронобиологии и хрономедицины в России (исторический очер...»

«УДК 574.5; 577.472 ДОЛГОВРЕМЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ЗООПЛАНКТОННЫХ СООБЩЕСТВ ОЗЕРА ИМАНДРА В УСЛОВИЯХ РАЗНОУРОВНЕВОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ СТОКАМИ ГОРНОРУДНОГО ПРОИЗВОДСТВА О.И. Вандыш, Н.А. Кашулин, А.А. Черепанов Институт проблем промышленной экологии Севера КНЦ РАН Аннотация Проанализированы долговре...»

«СОЦИАЛЬНО-ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ ОТЧЕТ 2012 СОЦИАЛЬНО-ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ ОТЧЕТ СОЦИАЛЬНО-ЭКОЛОГИЧЕСКИЙ ОТЧЕТ 2012 ОБРАЩЕНИЕ ИНФОРМАЦИЯ ИНФОРМАЦИЯ КОРПОРАТИВНОЕ ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ СОЦИАЛЬНАЯ ПРИЛОЖЕНИЯ ПРЕЗИДЕНТА ОБ ОТЧЕТЕ О...»

«"УТВЕРЖДЕНО" Решением Совета директоров ОАО "МРСК Юга" Протокол № 2/2007 от 03.09.2007г. Председатель Совета директоров А.Н. Раппопорт ПОЛОЖЕНИЕ ОБ ОБЕСПЕЧЕНИИ СТРАХОВОЙ ЗАЩИТЫ ОАО "МРСК Юга" НА ПЕРИОД...»








 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.