WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

«1 УДК 577.113.3.017 Обзорная статья БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ФУРАНО-, ПИРРОЛО- И ТИОФЕНО[2,3-d]ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНОВЫХ НУКЛЕОЗИДОВ – СИНТЕЗ И ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СВОЙСТВА © 2013 г. М. А. ...»

1

УДК 577.113.3.017

Обзорная статья

БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ФУРАНО-, ПИРРОЛО- И ТИОФЕНО[2,3-d]ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНОВЫХ НУКЛЕОЗИДОВ – СИНТЕЗ И

ПРОТИВОВИРУСНЫЕ СВОЙСТВА

© 2013 г. М. А. Иванов, Л. А. Александрова#

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН,

119991, Москва, ул. Вавилова, 32

Поступила в редакцию 10.04.2012 г. Принята к печати 01.06.2012г.

В обзоре рассмотрены методы синтеза фурано-, тиофено- и пирроло[2,3d]пиримидиновых дезоксирибонуклеозидов и их производных и исследования взаимосвязи структура – противовирусная активность полученных соединений в отношении вирусов варицелла-зостер, гепатита С и ряда других.

Ключевые слова: нуклеозиды; фурано-, тиофено- и пирроло[2,3-d]пиримидиновые нуклеозиды; алкины; 5’-O-трифосфаты нуклеозидов; вирус гепатита С; вирус диареи крупного рогатого скота; РНК-полимераза вируса гепатита С; NTP-аза / хеликаза вируса гепатита С.

ВВЕДЕНИЕ

Лечение заболеваний, вызываемых вирусными инфекциями, требует создания все новых и новых эффективных антивирусных агентов. Среди них производные и аналоги нуклеозидов играют важную роль в противовирусной и противоопухолевой химиотерапии. К настоящему времени на основе модифицированных нуклеозидов создано несколько десятков эффективных препаратов для лечения заболеваний, вызываемых ДНКсодержащими вирусами (вирусами группы герпеса, гепатита В и многими другими) и ретровирусами (вирус иммунодифицита человека) [1-3].



Весьма перспективными в этом отношении представляются бициклические производные пиримидиновых нуклеозидов – фурано[2,3-d]пиримидиновые 2’Сокращения: БПН бициклический пиримидиновый нуклеозид; TMС-трифлат –

– триметилсилилтрифторметансульфонат; ФПН – фуранопиримидиновый нуклеозид; BSA – бис-N,Oтриметилсилилацетамид; BVDV – вирус диареи крупного рогатого скота; СС50 – доза препарата, вызывающая гибель 50% неинфицированных клеток; СMV – цитомегаловирус; DBAD – дибензилазодикарбоксилат; EC50 – эффективная концентрация, требуемая для подавления развития вируса на 50%; Fmoc – 9-флуоренилметилоксикарбонил; HCV – вирус гепатита С; HCMV – цитомегаловирус (герпесвирус человека тип 5); HMDS – 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазан; HSV-1 – вирус герпеса тип 1; HSV-2

– вирус герпеса тип 2; IS – индекс селективности (отношение CC50 к EC50); MCC – минимальная цитотоксическая концентрация, требуемая для заметного изменения морфологии клеток; Pd[PPh3]4 – тетракис(трифенилфосфин)палладий (0); TK- VZV – штамм вируса варицелла зостер с дефицитом тимидин киназы; TK+ VZV – штамм вируса варицелла зостер без дефицита тимидин киназы; VV – вакциния вирус;

VZV – варицелла зостер вирус.

# Автор для переписки (тел.: 8(499) 135-60-65; факс: (499) 135-14-05; эл. почта: ala2004_07@mail.ru).

дезоксирибонуклеозиды, синтез и противовирусная активность которых была недавно описана [4-6]. В инфицированных культурах клеток эти соединения продемонстрировали высокую активность против VZV, значительно превышающую активность антигерпетических препаратов ACV и GCV (значение индекса селективности доходит до 1000000) [7]. Другим достоинством данной группы соединений является их низкая цитотоксичность. Открытие противовирусных свойств в ряду фуранопиримидиновых 2’дезоксирибонуклеозидов послужило толчком к активному синтезу и исследованию бициклических аналогов нуклеозидов [5, 8].

Формулы 1 В настоящем обзоре рассмотрены методы синтеза фурано-, тиофено- и пирроло[2,3-d]пиримидиновых дезоксирибонуклеозидов (1)-(3) и их производных и исследования взаимосвязи структура – противовирусная активность полученных соединений в отношении вируса VZV. Кроме того, описан синтез модифицированных по углеводному фрагменту производных фурано[2,3-d]пиримидиновых нуклеозидов и их противовирусная активность в отношении вирусов группы герпеса, гепатита С и ряда других.

Методы получения фурано-, тиофено- и пирроло[2,3-d]пиримидиновых нуклеозидов

Чаще всего фурано- и пирроло[2,3-d]пиримидиновые нуклеозиды синтезируют из 5-алкинилированных нуклеозидов при конденсации ацетиленового заместителя и гетероатома в 4-положении пиримидинового основания. Первые бицклические пиримидиновые нуклеозиды, полученные в ходе реакции присоединения терминальных алкинов к арильным соединениям, рассматривались как побочные продукты синтеза.

Впервые алкинилированный нуклеозид, 5-этинил-2’-дезоксиуридин, был синтезирован в 1976 году. [9]. Развитие методов синтеза алкинилированных нуклеозидов можно разделить на два периода. Первоначально конструировали алкинильный заместитель на основе группы, введённой в 5-е положение нуклеозида или гетероциклического основания [9]. В других методах вначале осуществляли синтез алкинилированного гетероциклического основания с последующим гликозилированием [10-12].

Второй период химии алкинилированных нуклеозидов связан с разработкой эффективных методов присоединения терминальных алкинов к арилгалогенидам, что привело не только к большему числу синтезированных алкинилированных нуклеозидов, но и повлияло на разнообразие используемых в реакции оснований, нуклеозидов и ацетиленовых заместителей [13-16]. Этапы развития методов получения алкинилированных нуклеозидов подробно описаны в обзорах [17, 18].

Современные методы синтеза фуранопиримидиновых нуклеозидов

Получение бициклических соединений можно проводить как в две стадии, с выделением промежуточного алкина, так и в одну стадию, без выделения алкинилированного соединения.

Первый метод является продолжением реакции Соногашира, которая заключается в присоединении к галогензамещенным нуклеозидам терминальных алкинов RCCH в присутствии Pd(OAc)2, Pd(OAc)2/PPh3 [11], Pd[PPh3]4 или Pd[PBu3]4 [14] и органических оснований в мягких условиях. Если в качестве катализаторов реакции используют не только соединение палладия, но и CuI, а в качестве одного из растворителей и основания – триэтиламин [15], то реакция протекает при комнатной температуре [15, 16] (схема 1).

Алкинилирование галогензамещенных нуклеозидов всегда сопровождается образованием бициклического продукта (1) (схема 1). Процесс получения БПН можно сделать доминирующим. Циклизации способствуют повышенная температура, наличие основания и, самое главное, избыток солей меди (CuI). Так, Робинс и Барр [19] обнаружили, что образование бициклической системы легко протекает при кипячении алкинилированных нуклеозидов в смеси метанол - триэтиламин в присутствии CuI.

Таким образом, для получения БПН, через установленное время, необходимое для исчерпывающего введения терминального алкина в 5-положение остатка урацила [14-16], в реакционную массу вводят дополнительные количества Et3N и CuI. Затем смесь нагревают в течение нескольких часов (схема 1) [19].

Схема 1 Во втором методе, для катализа процесса присоединения алкина к основанию и последующей циклизации, используют металлический палладий на угле (Pd/C); СuI и Et3N. Реакцию проводят в кипящем ацетонитриле [20]. Столь жёсткие условия не позволяют выделить промежуточный образующийся алкинилированный нуклеозид.

Поэтому этим способом можно получить только фуранопиримидиновые нуклеозиды.

В третьем методе получения БПН исходным веществом является алкинилированный нуклеозид, подвергаемый циклизации в присутствии СuI и Et3N.

Схема получения БПН совпадает с методом 1, с тем исключением, что алкинилированный нуклеозид должен быть выделен из реакционной смеси [19]. Очевидно, что этот способ в настоящее время не имеет практического применения, поскольку методики прямого получения бициклических соединений менее трудоёмки и более экономичны.

Атом кислорода фуранового кольца ФПН можно замещать на другие гетероатомы;

например, пирролопиримидиновые нуклеозиды в работе [21] получали замещением кислорода в седьмом положении ФПН на NH-группу действием аммиака в метаноле при повышенном давлении и нагревании (схема 2).

Схема 2 Введение атома серы в 7-положение ФПН представляет более трудоемкий процесс.

В работе [22] представлено несколько методов получения тиофенопиримидиновых нуклеозидов, которые будут рассмотрены ниже.

Механизм образования бициклических фурано[2,3-d]пиримидиновых нуклеозидов Первой стадией синтеза БПН в методах 1 и 2 является получение алкинилированных нуклеозидов по методу Соногаширы. Реакция, как правило, проводится с использованием гомогенных катализаторов платиновой группы. Особенно широкое распространение получили металлоорганические комплексы Pd, растворимые в диполярных органических растворителях. На схеме 3 приведен основной каталитический цикл образования алкинилированного нуклеозида.





Схема 3 Каталитический цикл Pd – Cu-катализируемого кросс-сочетания терминального алкина с замещенным sp2-углеродным атомом состоит из несколько стадий (циклов).

Формально первой стадией кросс-сочетания по методу Соногаширы является диссоциация Pd[PPh3]4 до Pd[PPh3]2. Именно 16-электронная форма палладиевого комплекса является активной и участвует в каталитическом цикле. Цикл А заключается в синхронном расщеплении связи нуклеозид-иод и окислительном присоединении молекул нуклеозида и иода к каталитическому центру. Результатом цикла В является замещение в каталитическом центре иода на терминальный алкин. На этой стадии необходимо образование ацетиленида меди, который и реагирует с органопалладиевым интермедиатом по схеме трансметаллирования.

Для этой реакции требуется наличие амина, который необходим для образования ацетиленида меди:

В процессе цикла происходит восстановительное отщепление С алкинилированного нуклеозида с образованием исходного каталитического комплекса Pd[PPh3]2 [23, 24].

Вторая стадия образования ФПН сопровождается замыканием конденсированного фуранового кольца. Система номенклатуры возможных типов циклизации относит образование фуранового кольца к реакциям эндо-диг-типа [25]. Приставка эндообозначает сдвиг электронной плотности от нуклеофила к эндоциклическому атому. Диг означает участие тройной связи в образовании замкнутой системы (рис. 1).

Рис.1 Эндо-процессы с участием тройных связей сопряжены со стерическими затруднениями, обусловленными линейной природой тройной связи, однако в этом процессе ее искажение для достижения подходящего переходного состояния происходит легко. Тем не менее, алкинилированные нуклеозиды являются стабильными соединениями и долго сохраняются в неизменном состоянии. Для замыкания фуранового кольца необходим катализатор. Как сказано выше, обычно применяют соли Сu(I) в комбинации с органическими основаниями. Впоследствии, для синтеза БПН были введены другие катилизаторы.

В 2004 г. было предложено использовать для проведения стадии циклизации алкинилпиримидинового нуклеозида каталитические количества ионов серебра (cхема 4) [26, 27].

Схема 4 В качестве источника ионов серебра был использован AgNO3. Преимуществом данного метода являлось использование каталитических количеств серебра (0.15 экв.

AgNO3 по отношению к алкинилированному нуклеозиду (7)), высокий выход на стадии циклизации (95-98%), легкость очистки продукта (10). Его недостатком являлась необходимость обязательной защиты гидроксильных групп, так как они способны координироваться с ионами Ag+, вследствие чего понижался выход продуктов реакции [26].

Каталитическими свойствами для получения фуранов из соединений, содержащих в своей структуре кетогруппу и тройную связь, обладают многие металлы. В литературе описано использование соединений, содержащих ионы серебра [27-29], рутения [30] палладия [31-33], золота [33-36] и ртути [37]. Перечисленные катализаторы можно использовать для получения БПН, однако они обладают рядом недостатков. Большинство из них дорогостоящи. Некоторые из них ядовиты, что недопустимо, так как эти катализаторы рассматриваются в качестве ингредиентов синтеза компонентов лекарственных препаратов.

В работе [38] рассмотрена возможность применения солей цинка в качестве катализаторов циклизации алкинилированных нуклеозидов. Исследование модельной реакции циклизации 1-п-толил-3-бензоилпропина-1(11) в -п-толил-’-фенилфуран (12) (cхема 5) показало, что каталитическая активность солей цинка изменяется следующим образом Zn(OAc)2 Zn(OTf)2 ZnI2 ZnBr2 ZnCl2 Zn4(OCOCF3)6O.

Схема 5 Использование ZnCl2 и тетраядерного кластера -оксо-цинка (Zn4(OCOCF3)6O) привели к получению продукта (12) с количественным выходом. При циклизации 5’,3’-диО-ацетильных производных алкинилированных 2’-дезоксирибонуклеозидов (13a), (13b) выходы при использовании ZnCl2 и Zn4(OCOCF3)6O были столь же высоки.

Формулы 2 Таким образом, синтез БПН в современной химии проводится в два этапа. Первый

– реакция Соногаширы. Ее результатом является алкинилированный нуклеозид (соединение (5), схема 1). Второй – реакция эндо-диг-циклизации, обычно катализируемая солями одновалентной меди или других металлов в присутствии органического основания. Оба этапа можно проводить последовательно без выделения соединения (5).

БПН можно получать в одну стадию, используя в качестве катализатора палладий на угле.

Этот способ удобен, однако большинство исследователей, тем не менее, применяют комплексные палладиевые катализаторы с целью получения промежуточных алкинилированных нуклеозидов (последние, хотя и представляют интерес в качестве биологически активных соединений, не рассматриваются в настоящем обзоре). В последние годы по методу 1 (схема 1) [6] был синтезирован широкий ряд бициклических пиримидиновых нуклеозидов.

БПН являются субстратами для ТК VZV. Причем, они фосфорилируются последовательно до монофосфатов, а затем, этим же ферментом до дифосфатов, что отличает ТК VZV от большинства других киназ. Обычно вирусные киназы фосфорилируют нуклеозиды до монофосфатов. Образовавшиеся монофосфаты, фосфорилируются цитозольными киназами до ди- и трифосфатов [39]. Фосфорилирование БПН именно вирусными киназами подтверждается тем фактом, что штаммы ТК-VZV не подавляются БПН [40, 41].

В работе [5] описан эксперимент, в ходе которого BVDU (52) или БПН обрабатывали ТК VZV и клеточной NDP-киназой эритроцитов человека. В результате среди продуктов был обнаружен трифосфат BVDU, однако, не было обнаружено следов трифосфатов БПН. Хотя авторы не исключают возможности того, что БПН могут узнаваться другими NDP-киназами или какими-либо другими ферментами клетки, это наблюдение позволяет предположить, что анти-VZV-активность БПН не связана с фосфорилированием до трифосфатов и, соответственно, не является причиной ингибирования ДНК-полимеразы[5].

Таким образом, механизм противовирусного действия БПН пока не установлен.

Опубликована серия работ, посвященная синтезу и изучению противовирусной активности бициклических производных нуклеозидов и нуклеотидов [53-54] пиримидинового ряда с различными модификациями: в бициклическом основании [21, 22, 53, 54, 60], остатке пентозы [52–54, 60, 63–65, 71, 76, 84] и заместителе в 6-ом положении БПН [6, 7, 42, 43, 45, 46]. Данные ингибирования нескольких штаммов VZV фуранопиримидиновыми дезоксирибонуклеозидами с различными заместителями при 6ом атоме углерода приведены в таблице 1.

ТАБЛИЦА 1 Химические модификации бициклических производных нуклеозидов Модификации бициклических производных нуклеозидов по гетероциклическому основанию Для изучения зависимости ингибирующей активности от структуры заместителя по описанному выше методу 1 были синтезированы несколько серий БПН [6].

БПН с различной длиной алкильного заместителя в положении 6 бициклической системы. В работе МакГьюгона [6] проведена оценка способности БПН с различной длиной алкильного заместителя ингибировать репликацию вирусов HSV-1, HSV-2, VV, CMV, VZV TK+ и VZV TK-. Оказалось, что противовирусная активность соединений (14)–(18) в отношении вирусов VZV коррелирует с длиной алкильной боковой цепи [6]. Из данных табл. 1 видно, что оптимальными по своим показателям оказались БПН с боковой цепью С8 – С10 (соединения (15)–(17)); их ингибирующая активность варьировала в пределах EC50=0.008–0.024 мкM. Все соединения проявляли очень низкую цитотоксичность и, в результате, обладали высокими значениями индекса селективности: 6250–10000. Короткая боковая цепь (С6) и слишком длинная (С12) приводили к низкой противовирусной активности. Все соединения оказались неактивными в отношении штаммов, дефицитных по тимидинкиназе, что подтверждает предложенный выше механизм противовирусного действия.

Дальнейшие исследования показали, что производные (14)–(18) не оказывают влияния на вирусы HSV-1, HSV-2, CMV и VV, даже при 100 мкM-концентрации, проявляя тем самым абсолютную специфичность по отношению к VZV, в противоположность таким известным препаратам, как ацикловир (50), ганцикловир (51) и бривудин (52) [6].

Формулы 3 Определяющее влияние структуры боковой цепи на активность соединений в ряду фуранопиримидиновых 2’-дезоксирибонуклеозидов побудило исследователей провести систематическое изучение влияния структуры боковой цепи БПН на их биологические свойства.

БПН, содержащие галогеналкильный заместитель в положении 6 Та же группа исследователей синтезировала серию бициклической системы.

терминальных галоген-замещенных БПН (19)–(22) с одинаковой длиной алкильной цепи, выбрав в качестве исходного соединения БПН (17) с линкером -C10H21, проявивший высокую анти-VZV-активность [42]. Полученные соединения, особенно F- и Clзамещенные, оказались более активными противовирусными агентами, чем незамещенное соединение (17) (табл. 1) [42].

В 2005 г.была Тиофено[2,3-d]пиримидиновые 2’-дезоксирибонуклеозиды.

синтезирована серия тиофенопиримидиновых 2’-дезоксирибонуклеозидов с алкильными линкерами длиной от –С4Н9 до -С12Н25 (28) (схема 6) [22]. Авторам не удалось алкинилировать по методу Соногаширы ацетилированный по 5’, 3’-гидроксилам 4-тио-2’дезоксиуридин (24). Алкинильный заместитель был введен после блокирования тиогруппы метильной группой. Образование тиофенового цикла происходило без применения катализатора одновременно с удалением метильной защитной группы.

Схема 6 Анти-VZV-активность данных БПН сравнима с активностью фуранопиримидиновых нуклеозидов (14)–(18) и имеет аналогичную зависимость от длины линкера. Максимум активности приходится на линкер –С8Н17 (28c) (ЕС50=0.002 мкМ, IS=26500). Уменьшение и увеличение длины углеводородной цепочки приводит к резкому падению анти-VZV-активности [22].

БПН, содержащие в 6-ом положении бициклической системы терминальный алкенильный или алкинильный заместитель. В целом, активность производных соответствующих н-алкильных терминальных алкенов оказалась ниже, чем их производных. Соединение (29) проявляло меньшую активность, чем соединение (15) с тем же числом атомов углерода в 6-заместителе. Производное (31) с аналогичной длиной алкинильногозаместителя обнаруживало резкое падение противовирусных свойств. Из общей тенденции уменьшения биологической активности соединений, содержащих в заместителе ненасыщенную концевую связь, выпало соединение (30) (EC50=0.01 мкМ;

IS=20000) [43]. Вероятно, данное исключение связано с его липофильностью (СlogP=3.0).

В работе [44] отмечалась зависимость активности соединений от их липофильности, которая характеризуется ClogP (значением логарифма коэффициента липофильности, который определяется по распределению соединения в стандартной системе 1-октанол — вода [44]). Наиболее активные БПН имели значение коэффициента ClogP 2.5–3.5, однако в ряду пара-фенилпроизводных (32)–(34) зависимости “ClogP – активность” выявлено не было.

4-Фенилзамещенные БПН. Нуклеозид (32), содержащий в пара-положении фенильного заместителя н-пентильную группу, является на сегодняшний день наиболее активным соединением в отношении VZV (EC50=0.1-0.3 нМ; IS2106). Соединение (33) с изопентильным заместителем в том же положении оказалось в 10 раз менее активно. При дальнейшем разветвлении пентильного заместителя, противовирусные свойства полностью терялись. EC50 соединения (34) составляло более 80 мкМ. БПН, содержащие пара-положении разветвленные алкильные радикалы в фенилсодержащих фуранопиримидиновых 2’-дезоксирибонуклеозидов, показали более низкую активность по сравнению с неразветвленными аналогами [7].

Нуклеозид (35) с бифенильным заместителем, проявлял среднюю активность (EC50=0.031 мкМ; IS=6500) [44].

БПН, содержащие ненасыщенные связи при первом атоме линкера. Робинс и сотрудники [45] синтезировали БПН с заместителями, содержащими ненасыщенные связи при первом атоме линкера. В данном случае наличие кратных связей также приводило к снижению активности. Соединение (42) сильно уступало в анти-VZV-активности аналогу с аналогичной длины насыщенным линкером (17). БПН (43) и (44) с арилацетиленовыми заместителями практически не обладали противовирусной активностью. Следует отметить, что их восстановленные аналоги (45) и (46) также оказались неактивны [45].

БПН с протяженными алкильными п-(н-Алкокси)фенильные БПН.

заместителями плохо растворимы в водных растворах. С целью увеличения растворимости БПН была синтезирована серия п-(н-алкокси)фенильных производных БПН (36). Активность этих соединений оказалась невысокой (EC500.5 мкМ) [46].

п-Галогенфенилзамещенные соединения. В ряду фенилсодержащих БПН были синтезированы п-бром- и п- хлорфенилзамещенные соединения (37) и (38). параБромпроизводное оказалось в 10 раз активнее ацикловира (EC50=0.1 мкМ), тогда как EC50 пара-хлорпроизводного 0.5 мкМ [46].

БПН с фенилоксиалкильной или фенилтоалкильной группой. Активность БПН (39) и (40) с атомом кислорода между алкильной и арильной группами [47] оказалась еще меньше, чем в серии (36): ((39) - 13-25 мкМ: EC50 (40) - 2.8-3.2 мкМ) [47]. Введение атома кислорода в боковую цепь увеличивало растворимость соединений в воде, но неблагоприятно влияло на противовирусную активность [44, 47]. Поэтому атом кислорода заменили на более липофильный атом серы (41) [47], в результате чего активность против вируса VZV(OKA) увеличилась на порядок (EC50=0.67 мкМ) [47], но все же значительно уступала активности соединений с н-алкильными и фенильными заместителями.

БПН, содержащие в качестве заместителя производные пиридина и пиримидина. В работе [45] рассмотрены БПН, содержащие в 6-ом положении остатки производных пиридина и пиримидина. Соединения (47)–(49) получали по методу 1 (схема

1) из соответствующих соединений, содержащих алкильный заместитель. метаАлкилпиридиновое производное (47), как и орто-алкилпиридиновое производное (48), проявили анти-VZV-активность, заслуживающую внимание (ЕС50=0.045 мкМ; IS=1000 и ЕС50=0.06 мкМ; IS=800, соответственно). Введение второго атома азота в алкилгетероарильную часть молекулы приводило к потере противовирусных свойств: так значение ЕС50 для наиболее активного алкилпиримидинового производного (49) составляло: 0.63 мкМ [45].

Таким образом, в результате исследований влияния структуры заместителя в 6-ом положении БПН на анти-VZV-активность определился безусловный лидер в этом классе соединений – 3-(2-дезокси--D-рибофуранозил)-6-п-пентилфенил-2,3-дигидрофурано[2,3d]пиримидин-2-он (32).

В сравнении с другими БПН соединение (32) проявляет беспрецедентную активность ЕС50=0.1 нМ, IS=2106 (штамм VZV (YS)). Поэтому это производное было выбрано для клинических испытаний и получило шифр Cf1743. Поскольку оно плохо растворяется в воде, для создания его лекарственной формы необходимо было увеличить его растворимость и биодоступность.

Валиновые эфиры нуклеозидов хорошо зарекомендовали себя как пероральные пролекарства [48] (например, валацикловир как депо-форма ацикловира [49]). МакГьюган и сотрудники синтезировали 5’-валиновый эфир соединения (32) и показали его возросшую растворимость в воде и биодоступность. Полученный хорошо растворимый (более, чем в 500 раз по сравнению с (32)) и стабильный хлоргидрат 5’-валинового эфира (54), обозначенный FV100, проходит в настоящее время клинические испытания (схема 7) [50].

Схема 7 В ходе клинических испытаний пациенты принимали FV100 в дозах от 100 мг до 800 мг один раз в день в течение недели. Период полураспада FV100 не зависел от дозы и составлял от 3.1 до 4.5 ч. Несмотря на короткий период полураспада, концентрация Сf1743 (32) в плазме оставалась выше ЕС50, равной 170 пг/мл, в течение 24 ч после однократного приема препарата любой концентрации [51]. Полученные данные позволили в 2009 г.приступить ко второй стадии клинических испытаний.

Модификации бициклических производных нуклеозидов по углеводному остатку.

1. 2’,3’-Дидезоксипроизводные фуранопиримидиновых рибонуклеозидов (55)– МакГьюган и сотрудники синтезировали серию 3-[2,3-дидезокси--Dрибофуранозил]-6-R-2,3-дигидрофурано[2,3-d]пиримидин-2-онов.

Формирование фуранопиримидинового основания проводили по методу 1 (схема 1) [6]. Показано практически полное отсутствие противовирусного эффекта в отношении вируса VZV при нетоксичной концентрации (более чем 50 мкM). Таким образом, авторы пришли к выводу, что в семействе бициклических нуклеозидов 3’-гидроксигруппа имеет большое значение для противо-VZV-активности [52].

В то же время, 2’,3’-дидезоксипроизводные замещенных фуранопиримидиновых нуклеозидов с алкильными линкерами длиной 9-11 атомов (соединения (57)–(59)) проявляли противовирусную активность в отношении HCMV (штаммы AD-169 и Davis) in vitro (табл. 2), сравнимую с действием контрольных GCV (51) и цидофовира (61) и значительно превышающую активность фоскарнета (62) [52]. При увеличении или уменьшении длины линкера наблюдалось уменьшение анти-HCMV-активности [52].

ТАБЛИЦА 2 Формулы 4

2. Производные бициклических пиримидиновых нуклеозидов рибо-ряда (64)– N7Синтезированы производные бициклических фурано-, пирроло- и (66).

метилпирроло[2,3-d]пиримидиновых нуклеозидов рибо-ряда, и изучена их активность в качестве ингибиторов репродукции HCV-вируса в системе HCV-репликона и BVDVвируса, являющегося суррогатной моделью HCV.

Формулы 5 Фурано-аналоги синтезированы по стандартной методике 1 (схема 1) [6]. При N7-метилпирроло[2,3-d]пиримидиновых получении пирроло- и нуклеозидов исследователям удалось провести замещение кислорода в 7-положении фуранового кольца на NH- и NCH3-группы в более мягких условиях, чем предложено ранее в работе [21]: обработкой соответствующего ФПН (64а) водными растворами аммиака или метиламина при нормальном давлении и комнатной температуре [53-54].

Только 3-(-D-рибофуранозил)-6-децил-2,3-дигидрофурано[2,3-d]пиримидин-2-он (64b) показал умеренную антивирусную активность в системе клеточного репликона HCV и эффективно подавлял репликацию BVDV-вируса (EC50 1.9 мкМ), все остальные соединения оказались неактивны. Цитотоксическое действие в исследуемом диапазоне концентраций не отмечено ни для одного из синтезированных веществ [53, 54].

После нескольких неудачных попыток было впервые проведено химическое фосфорилирование соединений (64а), (64g) и (66). 5’-Трифосфаты БПН получили действием POCl3 в триэтилфосфате в присутствии “протонной губки”, 1,8бис(диметиламино)нафталина, с последующей конденсацией с трибутиламмониевой солью пирофосфорной кислоты[53-54] по методу, разработанному Т. Ковач [55].

Субстратные свойства трифосфатов производных (64a), (64g) и (66) были изучены в отношении РНК-зависимой РНК-полимеразы (КФ 2.7.7.48, белок NS5B [56]) и NTPзависимой NTP-азы / хеликазы (белок NS3 [57-59] вируса гепатита С). Было показано, что трифосфаты не являются субстратами РНК-полимеразы, но проявляют высокую субстратную активность по отношению к NTP-азе /хеликазе [53].

2’-С-Замещеные аналоги производных БПН рибо-ряда (70), (71). 2’-СЗамещеные аналоги рибонуклеозидов являются многообещающими ингибиторами роста РНК-содержащих вирусов, включая HCV [60]. Одно из наиболее активных производных в этой серии соединений – 2’-С--метилцитидин, сильный ингибитор Flaviviridae в клеточной культуре [61, 62].

В 2009 г. синтезированы бициклические 3-(2-C--метил--D-рибофуранозил)-6-Rдигидрофурано- и дигидропирроло[2,3-d]пиримидин-2-оны (70) и (71) (схема 8), и изучена их активность в качестве ингибиторов репликации вируса гепатита С (HCV) в системе HCV-репликона [60].

Схема 8 Синтез осуществляли исходя из 5-йод-2’,3’,5’-три-О-бензоил-2’-С--метил-Dуридина (68), полученного прямым сочетанием 5-йодурацила и 1,2,3,5-тетра-О-бензоил-2С-метил--D-рибофуранозы (67). 3-(2-C--Метил--D-рибофуранозил)-6-R-2,3дигидрофурано[2,3-d]пиримидин-2-он (69) был получен по методу 2 (схема 1) с последующим удалением бензоильных групп действием аммиака в метаноле, приводящим к соединению (70). 3-(2-C--Метил--D-рибофуранозил)-6-R-2,3-дигидропирроло[2,3d]пиримидин-2-он (71) был получен из соединения (70) действием аммиака в метаноле в более жестких условиях, чем на стадии удаления бензоильных групп [60] (cхема 8).

Все соединения показали низкую анти-HCV-активность (ЕС50 в пределах 31-85 мкM) [60].

Ациклические производные БПН (72), (73). Синтезированы серии 6-R-3-[(2гидроксиэтокси)метил]фурано[2,3-d]пиримидин-2(3Н)-онов (72a), и 6-R-3-[(2гидроксиэтокси)метил]пирроло[2,3-d]пиримидин-2(3Н)-онов (72b), производных БПН, углеводный остаток в которых заменен на ациклический (2-гидроксиэтокси)метильный фрагмент [21].

Формулы 6 Соединения (72a, 72b), (73) не проявили высокой ингибирующей активности относительно VZV. Минимальные значения ЕС50 для них находились в пределах 2.6 –11.0 мкМ. Заслуживает внимания тот факт, что незначительная активность в отношении VZV (штамм ОКА), оказалась практически одинаковой как против ТК--VZV, так и против ТК+VZV-штамма. Подавление HCMV происходило при той же концентрации, (ЕС50=4.0 мкМ (73, n=8-9)). Все это указывает на иной механизм антивирусного действия, чем у нуклеозидных аналогов, содержащих природный углеводный остаток. Сопоставимая активность соединений в отношении VZV и HCMV указывает на общий меxанизм их действия [21].

N3- и О2- Замещенные производные фуранопиримидинов (74) – (76) были синтезированы в соответствии со схемой 9 [63].

Схема 9 Соединения (74) получали в две стадии из 5-йодурацила по методу 1 (схема 1) [39].

и вводили в реакцию с различными алкилирующими агентами, что приводило как к N3так и О2-алкилированным продуктам (75) и (76), соответственно. Соединения (75) и (76) были протестированы на анти-HCMV-активность (штаммы AD169 и Davis). О2Замещенные продукты (68) обладали равной или более высокой активностью в сравнении с N3-замещенными продуктами.

Продукт (76, R1=C7H15 и R2=циклопентил) проявил наилучшую активность из всей серии соединений (ЕС50=3 мкМ), равную активности GCV (51) (см. табл. 2) [63].

Тест на анти-VZV-активность показал, что все соединения неактивны, что объясняется невозможностью (из-за отсутствия 5’-гидроксильной группы) 5’-Офосфорилирования, необходимого для ингибирования VZV.

БПН, содержащие галогены в углеводном остатке (77)–(80), (84)–(86). Для дальнейшего изучения влияния модификации углеводного фрагмента на анти-VZVактивность БПН МакГьюган и сотрудники синтезировали 3’-хлор- (77), 5’-хлор- (78), 3’фторзамещенные аналоги БПН (79), и так же 2’-дезоксиксилопроизводные БПН (80) [64, 65].

Формулы 7 Соединения (77а,b) оказались в 10000 раз менее активными против VZV, чем соответствующие фуранопиримидиновые 2’-дезоксирибонуклеозиды (14) и (31). 5’-Clзамещенные БПН (78а,b) не проявляли анти-VZV- активность вплоть до ЕС50=5 мкМ, что подтверждает механизм противовирусного действия, включающий стадию фосфорилирования 5’-гидроксильной группы. Уменьшение активности 3’-Сl производных (77) указывало на необходимость 3’-ОН-групп для проявления анти-VZV-активности [64].

Соединения (79a,b), (80a,b) проявили незначительную анти-VZV-активность [65].

Формулы 8 Введение атома фтора в молекулы нуклеозидов часто повышает их биологическую активность. Например, 4’-азидоцитидин (81) ингибирует репликацию вируса гепатита С с ЕС50=1.28 мкМ [66, 67], а 4’-азидо-2’-фтор-2’-дезоксиарабиноцитидин (82) и 4’-азидодифтор-2’-дезоксицитидин (83) подавляют вирус гепатита С значительно эффективнее исходного соединения (ЕС50 24 и 66 нM, соответственно) [68-70].

Формулы 9 МакГьюган и сотрудники на основе наиболее активного БПН- 3-(2-дезокси--Dрибофуранозил)-6-п-пентилфенил-2,3-дигидрофурано[2,3-d]пиримидин-2-она (32) синтезировали серию 2’-фторпроизводных [71], однако, полученные соединения практически полностью потеряли анти-VZV-активность: 2’-фтор-2’-дезоксиарабинопроизводное (84) (ЕС50=0.007 мкМ, IS=7000), 2’-фтор-2’-дезоксирибопроизводное (85) и 2’дифтор-2’-дезоксирибопроизводное (86) противовирусной активностью не обладали.

Формулы 10 Авторы предположили, что отсутствие противовирусной активности может быть вызвано тем, что вирусные киназы не узнают БПН (84)-(86) и, соответственно, не фосфорилируют эти соединения. Ранее МакГьюган разработал метод введения в клетки депо-форм монофосфатов нуклеозидов в виде “ProTide”-соединений фосфоамидных коньюгатов О-эфиров 5’-монофосфатов нуклеозидов и N-[О-алкил(арил) аминокислот] (рис. 2) [72, 73].

Рис. 2 Незаряженные “ProTide”-производные проникают в клетку и далее под действием клеточных ферментов и гидролиза промежуточных неустойчивых форм образуют монофосфаты [72]. Примером могут служить работы МакГьюгана и др, синтезировавших “ProTide”-производные 4’-азидоуридина [74, 75]. Полученные соединения ингибировали репликацию HCV в системе репликона вируса HCV in vitro в 450 раз эффективней, чем исходный 4’-азидоуридин. В связи с этим был осуществлен синтез “ProTide”производных всех 2’-фторзамещенных соединений (84-86) [76]. Однако все они оказались неактивными [76].

БПН, состоящие из фуранопиримидинового основания и производного Lаскорбиновой кислоты (90), (91). L-Аскорбиновая кислота является одной из важнейших биомолекул. Она действует как антиоксидант и ловушка радикалов в широком классе аэробных организмов [77] и таким образом защищает компоненты клетки от разрушения под действием свободных радикалов и оксидантов [78]. Было обнаружено, что производные L-аскорбиновой кислоты вызывают апоптоз в опухолевых клетках, обладают иммуностимулирующей активностью [79-80] и/или препятствуют окислению липидов биомембран [81-82]. Сочетание лекарств с L-аскорбиновой кислотой может улучшать их проникновение в мозг. Исследователи работы [83] рассчитывали, что замена природного сахара в БПН на производное L-аскорбиновой кислоты не только усилит его противовирусное действие против VZV, но и придаст им новые, ранее не известные для этого класса соединенийсвойства.

БПН, состоящие из фуранопиримидинового основания и производного Lаскорбиновой кислоты синтезировали по методу 1 схемы 1 [6]. Исходная 5-йодурацилди-О-бензил-4’,5’-дидегидро-5’,6’-дидезокси-L-аскорбиновая кислота (IUAA) (87) [84], ключевой предшественник кросс-сочетания с алкинами, была синтезирована конденсацией 5’,6’-ди-О-ацетил-2’,3’-ди-О-бензил-L-аскорбиновой кислоты (АВАА) [85с 5-йодурацилом (cхема 10).

Cхема 10 IUAA (87) была получена в виде смеси Z- и E- изомеров, с преобладанием Eизомера (80-90%). Эти изомеры были разделены посредством колоночной хроматографии и в дальнейших синтезах использовался чистый E-изомер. Различные заместители в С5позицию пиримидинового кольца вводились в IUAA реакцией Соногаширы (cхема 11).

Схема 11 Соединения (88)-(91) испытывали против широкого спектра вирусов. Ни одно из них не проявило сколь-либо значимой противовирусной активности. БПН (90с) оказалось единственным соединением, ингибирующим репликацию обоих лабораторных линий CMV (штаммы AD-169 и Davis).

Отсутствие гидроксильных групп в производных аскорбиновой кислоты исключает возможность фосфорилирования соединений. Поэтому не удивительна равная анти- VZVактивность против ТК+- и ТК--линий, EC501.6 мкМ для (90с).

В то же время, эти аналоги БПН проявили противоопухолевые свойства.

Среди, изученных в данной работе соединений, 6-бутил- (90а) и 6-п-бромфенил (91b) фурано[2,3d]пиримидиновые производные L-аскорбиновой кислоты продемонстрировали наибольшую противоопухолевую активность, в частности против злокачественной лейкемии (L1210 ЕC50: (90a), 4.4 мкM; (91b), 9.5 мкM) и T-лимфоцитов (Molt4/C8 ЕC50:

(90a), 9 мкM; (91b), 9.6 мкM; CEM ЕC50: (90a), 7.7 мкM; (91b), 8.3 мкM).

Механизм противовирусного/противоопухолевого действия БПН-производных аскорбиновой кислоты остается неясным и требует дальнейшего изучения.

Таким образом, бициклические фурано[2,3-d]пиримидиновые 2’дезоксирибонуклеозиды являются уникальным классом противовирусных соединений, избирательно действующих на VZV. Отсутствие активности по отношению к ТК-штаммам VZV объясняется необходимостью их фосфорилирования тимидинкиназой VZV для получения биологически активных форм БПН. Значительная противовирусная активность наблюдается исключительно в ряду фурано[2,3-d]пиримидиновых 2’дезоксирибонуклеозидов. Наиболее активным соединением оказался 3-(2-дезокси--Dрибофуранозил)-6-п-пентилфенил-2,3-дигидрофурано[2,3-d]пиримидин-2-он (32), его лекарственная форма на основе 5’-валинового эфира проходит в настоящее время клинические испытания. В то же время, БПН, содержащие в качестве углеводного фрагмента остатки рибозы, 2,3-дидезоксирибозы и др., не проявляют заметного противовирусного действия.

Благодарности Работа выполнена при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (гранты № 11-04-00603 и № ОФИ-М 11-04-12035) и Программы фундаментальных исследований Президиума РАН “По молекулярной и клеточной биологии”.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. De Clercq E. // Adv. Virus. Res. 2009. V. 73. P. 1-53.

2. De Clercq E. // Int. J. Antimicrob. Agents. 2009. V. 33. P. 307-320.

3. Watanabe, K.A., Patterson, S.E. // in Frontiers in nucleosides and nucleic acids /Eds. Schinazi R. F. and Liotta D. C.,IHL Press. Tucker. GA. 2004. P. 3-55.

4. De Clercq E. // Nat. Rev. Drug Discov. 2002. V. 1. P. 13–25.

5. Balzarini J., McGuigan C. // J. Antimicrob. Chemotherapy. 2002. V.50. P. 5–9.

6. McGuigan C., Yarnold C.J., Jones G.,Velazquez S., Barucki H., Brancale A., Graciela A., Shoek R., De Clercq E., Balzarini J. // J. Med. Chem. 1999. V. 42. P. 4479–4484.

7. Luoni G., McGuigan C., Andrei G., Shoek R. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2005. V. 15. P.

3791–3796.

8. Sienaert R., Naesens L., Brancale A., Carangio A., Andrei G., Snoeck R., Van Kuilenburg A., De Clercq E., McGuigan C., Balzarini J. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2003.

V. 22. P. 995–997.

9. Perman J., Sharma R.A., Bobek M. // Tetrahedron Lett. 1976. P. 2427-2430.

10. Jones A.S., Walker R.T. // Nuсl. Acids Spec. Publ. № 1. 1975. P. l-4.

11. Barr P.J., Jones A.S., Walker R.T. // Nucl. Acids Res. 1976. V. 3. P. 2845-2849.

12. Jones A.S., Serafinowski P., Walker R.T. // Tetrahedron Lett. 1977. P. 2459-2460.

13. Dieck H.A., Heck F.R. // J. Organometal. Chem. 1975. V. 93. P. 259-263.

14. Cassar L. // J. Organometal. Chem. 1975. V. 93. P. 253-257.

15. Sonogashira K., Tohda Y., Hagihara N. // Trahedron Lett. 1975. P. 4467-4470.

16. Rossi R., Carpita A., Bellina F. // Org. Prep. Proc. Int. 1995. V. 27. P. 127-160.

17. Коршун В. А., Манасова Е. В., Берлин Ю. А. // Биоорган. химия. 1997. Т. 23. C. 324-387.

18. Agrofoglio L. A., Gillaizeau I., Saito Y. // Chem. Rev. 2003. V. 103. P. 1875-1916.

19. Robins M.J., Barr P.J. // Trahedron Lett. 1981. V. 22. P. 421-424.

20. Толстиков Г.А., Мустафин А.Г., Гатаулин А.Г., Спирихин Л.В., Султанова В.С., Абдрахманов И.Б. // Изв. АН. Сер.xим. 1993. С. 596–597.

21. Janeba Z., Balzarini J., Andrei G., Snoeck R., De Clercq E., Robins M.J. // J. Med. Chem.

2005. V. 48. P. 4690-4696.

22. Brancale A., McGuigan C., Algain B., Savy P., Benhida R., Fourrey J.-L., Andrei G., Shoek R., De Clerq E., Balzarini J. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001. V. 11. P. 2507-2510.

23. Sonogashira K., Tohda Y., Hagihara N. // Tetrahedron Lett. 1975. P. 4467.

24. Sonogashira K. // J. Org. Chem. 2002. V. 653. P. 46-49.

25. Джилкрист Т. // Химия гетероциклических соединений: Пер. с англ. М.: Мир 1996. С.

81–83.

26. Aucagne V., Amblard F. // Synlett. 2004. P. 2406-2408.

27. Marshall J.A., Wang X.L. // J. Org. Chem. 1991. V. 56. P. 960-969.

28. Marshall J.A., Bartley G.S. // J. Org. Chem. 1994. V. 59. P. 7169-7171.

29. Marshall J.A., Wang X.L. // J. Org. Chem. 1991. V. 56. P. 6264-6266.

30. Marshall J.A., Robinson E.D. // J. Org. Chem. 1990. V. 55. P. 3450-3451.

31. Utimoto K. // Pure Apple. Chem. 1983. V. 55. P. 1845-1852.

32. Sheng H., Lin S., Huang Y. // Synthesis. 1987. P. 1022-1023.

33. Fukuda Y., Shiragami H., Utimoto K., Nozaki H. // J. Org. Chem. 1991. V. 56. P. 5816-5819.

34. Hashmi A.S.K., Schwarz L., Choi J.-H., Frost T.M. // Angew. Chem. 2000. V. 39. P. 2285Hashmi A.S.K., Schwarz L., Rubenbauer P., Blanco M.C. // Adv. Synth. Catal. 2006. V. 348.

P. 705-708.

36. Zhou C.-Y., Chan P.W.H., Che C.-M. // Org. Lett. 2006. V. 8. P. 325-328.

37. Mnard D., Vidal A., Barthomeuf C., Gosselin P. // Synlett. 2006. P. 57-60.

38. Sniady A., Durham A., Morreale M. S., Marcinek A., Szafert S., Lis T., Brzezinska K. R., Iwasaki T., Ohshima T., Mashima K., Dembinski R. // J. Org. Chem. 2008. V. 73. P. 5881Льюин Б. Клетки. // Бином. 2011.

40. Migliore M. // J. Antiv. Chem. Chemother. 2010. V. 20. P. 107–115.

41. Balzarini J., McGuigan C. // Biochim. Biophys. Acta. 2002. V. 1587. P. 287–295.

42. Brancale A., McGuigan C., Andrei G., Snoeck R., De Clercq E., Balzarini J. // Bioorg. Med.

Chem. Lett. 2000. V. 10. P. 1215-1217.

43. Srinivasan S., McGuigan C., Andrei G. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2001. V.

20. P. 763–766.

44. Brancale A., Srinivasan S., Andrei G., Shoek R. // J. Antiv. Chem & Chemother. 2000. V. 11.

P. 383-393.

45. Robins M. J., Nowak I., Rajwanshi V. K., Miranda K., Cannon J. F., Peterson M. A., Andrei G., Snoeck R., De Clercq E., Balzarini J. // J. Med. Chem. 2007. V. 50. P. 3897-3905.

46. Blewett S., McGuigan C., Barucki H., Andrei G. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids.

2001. V. 20. P. 1063–1066.

47. Carandio A., McGuigan C., Cachard D., Andrei G. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2001. V. 20. P. 653–656.

48. McGuigan C., Balzarini J. // J. Antimicrob. Chemother. 2009. V. 64. P. 671–673.

49. Snoeck R., Andrei G., De Clercq E. // Int. J. Antimicrob. Agents. 1994. V.4. P. 211-26.

50. McGuigan C, Pathirana R. N., Migliore M., Adak R., Luoni G., Jones AT., Dez-Torrubia A., Camarasa M. J., Velzquez S., Henson G., Verbeken E., Sienaert R., Naesens L., Snoeck R., Andrei G., Balzarini J. // J. Antimicrob. Chemother. 2007. V. 60. P. 1316-1330.

51. Pentikis H. S., Matson M., Atiee G., Boehlecke B., Hutchins J. T., Patti J. M., G. W. Henson G. W. // J. Antimicrob. Agents Chemother. 2011. V. 55. P. 2847–2854.

52. McGuigan C., Pathirana R. N., Shoek R., Andrei G. // J. Med. Chem. 2004. V. 47. P. 1847– 1851.

53. Иванов М.А., Иванов А.В., Красницкая И.А., Смирнова О.А., Карпенко И.Л., Беланов Е.Ф., Прасолов В.С., Туницкая В.Л., Александрова Л.А. // Биоорган. химия. 2008. Т. 34.

С. 661-670.

54. Alexandrova L. A., Ivanov M. A., Victorova L. S., Kukhanova M. K. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2007. V. 26. P. 1083-1086.

55. Kovacs T., Otvos L. // Tetrahedron Lett. 1988. V. 29. P. 4525–4528.

56. Maag D., Castro, C., Hong Zh., Cameron C.E. // J. Biol. Chem. 2001. V. 276. P. 46094– 46098.

57. Wardel A.D., Errington W., Ciaramella G., Merson J., McGarve M.J. // J. Gen. Virol. 1999.

V. 80. P. 701-709.

58. Locatell G.A., Gosselin G., Spadari S., Maga G. // J. Mol. Biol. 2001. V. 313. P. 683-94.

59. Borowski P., Schalinski S., Schmitz H. // Antiviral. Res. 2002. V. 55. P. 397-412.

60. Januszczyk P., Fogt J., Boryski J., Izawa K., Onishi T., Neyts J., De Clercq E. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2009. V. 28. P. 713–723.

61. Matsuda A., Takenuki K., Sasaki T., Ueda T. // J. Med. Chem. 1991. V. 34. P. 234–239.

62. Li N.S., Piccirilli J.A. // J. Org. Chem. 2003. V. 68. P. 6799–6802.

63. Kelleher M.R., McGuigan C., Bidet O., Carangio A., Weldon H., Andrei G., Snoeck G., De Clercq E., Balzarini J. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2005. V. 24. P. 643–645.

64. Luoni G., McGuigan C., Andrei G., Snoeck R., De Clercq E., Balzarini J. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2003. V. 22. P. 935–937.

65. Garangio A., McGuigan C., Andrei G., Snoeck R., De Clercq E., Balzarini J. // Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2003. V. 22. P. 931–933.

66. Klumpp K., Leveque V., Le Pogam S., Ma H., Jiang W.R., Kang H., Granycome C., Singer M., Laxton C., Hang J.Q., Sarma K., Smith D.B., Heindl D., Hobbs C.J., Merrett J.H., Symons J., Cammack N., Marttin J.A., Devos R., Najera I. // J. Biol. Chem. 2006. V. 281. P.

3793-3799.

67. Smith D.B., Martin J.A., Klumpp K., Baker S.J., Blomgren P., Devos R., Granycome C., Hang J., Hobbs C.J., Jiang W.-R., Laxton C., Le Pogam S., Leveque V., Ma H., Maile G., Merrett J.H., Pichota A., Sarma K., Smith M., Swallow S., Symons J., Vesey D., Najera I., Cammack N. // Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007. V. 17. P. 2570-2576.

68. Klumpp K., Kalayanov G., Ma H., Le Pogam S., Leveque V., Jiang W.-R., Inocencio N., De W., Rajyaguru, S., Ti E., Chanda S., Irwin M. R., Sund C., Winquist A., Maltseva T., Eriksson S., Usova E., Smith M., Alker A., Najera, I., Cammack N., Martin J. A., Johansson N. G., Smith D. B. // J. Biol. Chem. 2008. V. 283. P. 2167–2175.

69. Smith D. B., Kalaynov G., Sund C., Winqvist A., Pinho P.,Maltseva T., Morisson V., Rajyaguru S., Le Pogam S., Najera I., Benkenstock K., Zhou X-X., Maag H., Cammack N., Martin J. A., Swallow S., Gunnar Johansson N., Klumpp K., Smith M. // J. Med. Chem.

2009. V. 52. P. 219–223.

70. Smith D.B., Kalayanov G., Sund C., Winqvist A., Maltseva T., Leveque V.J., Rajyaguru S., Le Pogam S., Najera I., Benkestock K., Zhou X.X., Kaiser A.C., Maag H., Cammack N., Martin J.A., Swallow S., Johansson N.G., Klumpp K., Smith M.T. // J. Med. Chem. 2009. V. 52. P.

2971-2978.

71. McGuigan C., M Derudas M., Quintiliani M., Andrei G., Snoeck R., Henson G., Balzarini J.

// Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009. V. 19. P. 6264–6267.

72. McGuigan C., Wedgwood O.M., De Clercq E., Balzarini J. // Bioorg. Med. Chem. Lett.

1996. V. 6. P. 2359–2362.

73. Balzarini J., Kruining J., Wedgwood O., Pannecouque C., Aquaro S., Perno C.F., Naesens L., Witvrouw M., Heijtink R., De Clercq E., McGuigan C. // FEBS Lett. 1997. V. 410. P.

324–328.

74. Perrone P., Luoni G. M., Kelleher M. R., Daverio F., Angell A., Mulready S., Congiatu C., Rajyaguru S., Martin J. A., Leveque V., Le Pogam S., Najera I., Klumpp K., Smith D. B., McGuigan C. // J. Med. Chem. 2007. V. 50. P. 1840-1849.

75. Lichtenstein J., Barner H. D, Cohen S. S. // J. Biol. Chem. 1960. V. 235. P. 457-465.

76. Derudas M., Quintiliani M., Brancale A., Andrei G., Snoeck R., Balzarini J., McGuigan C. // J. Antiv. Chem. Chemother. 2010. V. 21. P. 15-31.

77. Du C.-B., Liu J.-W., Su W., Ren Y.-H., Wei D.-Z. // Life Sci. 2003. V. 74. P. 771-780.

78. Wimalasena K., Mahindaratne M. // J. Org. Chem. 1994. V. 59. P. 3427-3432.

79. Veltri R. W., Fodor G., Liu C. M., Woolverton C. J., Baseler M. W. // J. Biol. Res. Mod.

1986. V. 5. P. 444-461.

80. Woolverton C. J., Veltri R. W., Snyder I. S. // J. Biol. Res. Mod. 1986. V. 5. P. 527-538.

81. Nihro Y., Miyataka H., Sudo T., Matsumoto H., Satoh T. J. // J. Med. Chem. 1991. V. 34. P.

2152-2157.

82. El-Demerdash F. M., Yousef M. I., Zoheir M. A. // Chem. Toxicol. 2005. V. 43. P. 1743Gazivoda T., Sokcevic M., Kralj M., Suman L., Pavelic K., De Clercq E., Graciela A., Snoeck R., Balzarini J., Mintas M., and Raic-Malic S. // J. Med. Chem. 2007. V. 50. P.

4105-4112.

84. Raic-Malic S., Brundic H. A., Nagl A., Grdisa M., Pavelic K., De Clercq E., Mintas M. // J. Med. Chem. 1999. V. 42. P. 2673-2678.

85. Wittine K., Gazivoda T., Markus M., Mrvos-Sermek D., Hergold- Brundic A., Cetina M., Z iher D., Gabelica V., Mintas M., Raic- Malic S. // J. Mol. Struct. 2004. V. 687. P. 101Gazivoda T., Wittine K., Lovric I., Makuc D., Plavec J., Cetina M., Mrvos-Sermek D., Suman L., Kralj M., Pavelic K., Mintas M., Raic-Malic S. // Carbohydrate Res. 2006. V.

341. P. 433-442.

–  –  –

(4) (5) (1) Метод 1) (i), затем (ii), Метод 2) (iii), Метод 3) (2), (iv).

i: DMF, 1-алкин, Pd(PPh3)2Cl2, CuI, Et3N, t 20C; ii: CuI, Et3N, 70-80C; iii: 1-алкин, Pd/C, CuI (кат.), CH3CN, Et3N, кипячение; iv: CuI (кат.), MeOH, Et3N, кипячение.

_________________________________________________________________________

–  –  –

(3) (1) i: NH3/MeOH, нагревание в запаянной ампуле при 50C _________________________________________________________________________

–  –  –

(12) (11) i: Zn катализатор, CH2Cl2, 22C.

_________________________________________________________________________

–  –  –

(26) (27) (28) i: P2S5, диоксан, 120 С; ii: MeI, Et3N, CH2Cl2, 1 ч; iii: 1-алкин, Et3N, CuI, Pd(Ph3)2Cl2, диоксан, 80С, 1 ч; iv: избыток NaSH, DMF, 18 ч; v: NН4OH, MeOH, 18 ч.

_________________________________________________________________________

–  –  –

i: PPh3, DBAD, Fmoc-Val-OH, DMF, 20C, 17 ч; ii: Пиперидин, 10 мин; iii: THF, HCl, 10 мин.

_________________________________________________________________________

Схема 8.

i: BSA, CH2Cl2, 20C, 20 мин, затем SnCl4, 20C; ii: 1-алкин, 10% Pd/C, CuI, Et3N, MeCN, Ar, 80C, 5 ч; iii: NH3/MeOH, 20C, 24 ч; iv: NH3/MeOH, 50C, 48 ч.

_________________________________________________________________________

–  –  –

Реагенты: i: 1-алкин, Pr2EtN, (PPh3)4Pd, CuI, DMF, rt; ii: Et3N, CuI, 60C.

ТАБЛИЦА 1. Анти-VZV-активность бициклических фурано- и тиофено[2,3d]пиримидиновых 2’-дезоксирибонуклеозидов в отношении штаммов вируса VZV

–  –  –

3000** 0.27 0.06 200 50 200 2 [40] (29) 20000** 0.09 0.01 200 200 200 3 [40] (30) 50** 5 4 200 200 200 1.1 [40] (31) (2106)** 0.0003 0.0001 20 5 200 2.97 [42] (32) (18104)** 0.0017 0.0011 50 2 200 2.84 [42] (33)

–  –  –

6500* 0.031 0.032 5 5 200 [42] (35)

–  –  –

15* 13 25 200 200 200 1.18 [45] (39) 70* 2.8 3.2 20 20 200 2.21 [45] (40) 300* 0.67 0.9 50 50 200 1.29 [45] (41) 320** 1.2 0.72 48 26 230 [43] (42)

–  –  –

4.5* 41 27 50 50 120 [43] (44)

–  –  –

2.6** 130 50 130 130 [43] (46) 50 1000** 0.06 0.045 100 70 50 [43] (47) 800** 0.09 0.06 20 20 50 [43] (48) 80* 0.63 0.71 100 100 50 [43] (49)

–  –  –

IS –указан для штамма,. наиболее чувствительного к действию данного соединения IS* – вычислен для штамма VZV(OKA) IS** – вычислен для штамма VZV(YS)

–  –  –

(1) (2) (3) Формулы 1.

_________________________________________________________________________

(13) Формулы 2.

_________________________________________________________________________

Формулы 3.

_________________________________________________________________________

–  –  –

(65) (66) Формулы 5.

_________________________________________________________________________

Формулы 6.

_________________________________________________________________________

(77) (78) Формулы 7.

_________________________________________________________________________

(79) (80) Формулы 8.

_________________________________________________________________________

(81) (82) (83) Формулы 9.

_________________________________________________________________________

(84) (85) (86) Формулы 10.

_________________________________________________________________________

РИСУНКИ

–  –  –

“ProTide”-соединение - фосфоамидныйконьюгат О-эфиров 5’-монофосфатов Рисунок 2.

нуклеозидов и N-[О-алкил(арил) аминокислот].

–  –  –

Engelhardt Institute of Molecular Biology RAS, Vavilova 32, 119991 Moscow, Russia # Phone: +7(499) 135 6065; fax : +7(499) 135 1405; E-mail: ala2004_07@mail.ru The methods of synthesis of furano- and pyrrolo [2,3-d]pyrimidine nucleosides as well as structure activity relationship of obtained compounds towards viruses of varicella zoster, hepatitis C virus and some others are reviewed.

Keywords: nucleosides, furano- and pyrrolo[2,3-D]pyrimidine ribonucleosides; alkynes; 4’modified pyrimidine nucleosides; nucleoside 5’-O-triphosphates;varicella zoster virus; hepatitis C virus; bovine viral diarrhea virus RNA-dependent RNA polymerase; RNA helicase/NTPase



Похожие работы:

«_ 23.2. ОБОСНОВАНИЕ ТЕХНИЧЕСКОГО РЕШЕНИЯ ПО _ 2ПОЖАРНОЙ АВТОМАТИКЕ 3.2.1. ОГНЕТУШАЩЕЕ ВЕЩЕСТВО В соотвествии с техническим заданием на работу одним из условий, принимаемых в расчет, при выборе огнетушащего вещест-ва для объемного тушения в помещениях фондохранилища является его безопасность для персонала...»

«СЕКЦИЯ 5 ТЕХНОЛОГИЯ СТРОИТЕЛЬНЫХ МАТЕРИАЛОВ. УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ ПЕРЕРАБОТКИ МИНЕРАЛЬНОГО СЫРЬЯ. ЭКОНОМИКА И ЭКОЛОГИЯ НОВЫХ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ УДК 669.015.2:21/23 РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ОСМИЯ ИЗ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩИХ ПРОДУКТОВ ОЧИСТКИ МЕТАЛЛУРГИЧЕСКИХ ГАЗОВ Н.С. Арешина, А....»

«затвердження Правил санітарної охорони території України / [Електронний ресурс]. Режим доступу : http://zakon1.rada.gov.ua/laws/show/893-2011-%D0%.10. Васильев К.Г., Никитин Ю.А., Кузнецов А.В., Практика борьбы с холерой. Одесса. – 2001. – 302 с.11. Голубятников Н...»

«УДК 551.461:462.32 (262.5) О.Г.Моисеенко, С.К.Коновалов, Н.А.Орехова Морской гидрофизический институт НАН Украины, г.Севастополь ИНДЕКСЫ ОЦЕНКИ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА БУХТ В ОБЩЕЙ СТРАТЕГИИ УПРАВЛЕНИЯ ПРИБРЕЖНОЙ СРЕДОЙ В ЦЕЛЯХ ЕЕ УСТОЙЧИВОГО...»

«Кузнецова Наталья Владимировна СОВРЕМЕННОЕ ГИДРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ РЕКИ ЯХРОМА КАК МОДЕЛЬНОЙ МАЛОЙ РЕКИ ПОДМОСКОВЬЯ 03.02.10 – гидробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологич...»

«Экологические аспекты почвообразования в техногенных экосистемах Урала, 2003, Галина Ивановна Махонина, 5799601556, 9785799601553, Изд-во Уральского университета, 2003 Опубликовано: 18th January 2012 Эколо...»

«ФИЗИОЛОГИЯ ЧеЛОВеКА HUMAN PHYSIOLOGY УдК 612.821 ББК 28.707.3 ТатьянаВасильевнаЯдрищенская, кандидат биологических наук, доцент, Дальневосточный государственный гуманитарный университет (680000, Россия, г. Хабаровск, ул. Карла-Маркса, 68) e-mail: tagir.on-line@mail.ru Корреляционные отношения и гендерные особеннос...»

«ПРОГРАММА-МИНИМУМ кандидатского экзамена по специальности 25.00.36 "Геоэкология" по геолого-минералогическим наукам Введение В основу настоящей программы положены следующие дисциплины: экология; инженерная геология; ги...»

«Министерство образования Российской Федерации Ярославский государственный университет им П.Г. Демидова В.П. Семерной САНИТАРНАЯ ГИДРОБИОЛОГИЯ Учебное пособие по гидробиологии Издание второе, переработанное и дополненное Ярославль 2002 ББК Е 082я73 С 30 УДК 574.5:001.4 Семер...»

«УТВЕРЖДЕНЫ Решением Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. № 89 П РА В И Л А проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза I. Введение Настоящие Правила разработаны на основе актов, входящих в право...»

«Институт систематики и экологии животных СО РАН Териологическое общество при РАН Новосибирское отделение паразитологического общества при РАН ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ СОВРЕМЕННОЙ ТЕРИОЛОГИИ 18...»

«http://disclosure.primeАГЕНТСТВО ЭКОНОМИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ "ПРАЙМ" tass.ru/ Тел.: +7 (495) 974-76-64, 8-800-333-50-50. Факс: +7 (495) 637-45-60 E-mail: analitik@prime-tass.ru № 5(24) май 2011 г.В вып...»

«Глава III ФЛОРА И ФАУНА В КОНТЕКСТЕ ОБРЯДОВ И ВЕРОВАНИЙ При любом хозяйственно-культурном укладе важное место в жизни человека занимала фенология — система знаний о сезонных явлениях природы, сроках их наступления и причинах, природные циклы узнавались по распусканию почек, цветению растени...»

«ГБУ "Республиканская имущественная казна" (специализированная организация) руководствуясь ст. 448 Гражданского кодекса Российской Федерации, ст.3 Федерального закона...»










 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.