WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

«GlobalFiler™ Express PCR Amplification Kit – PCR Amplification and CE Pub. No. 4481788 Rev. A Translated from English Publication ...»

КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО

GlobalFiler™ Express PCR Amplification Kit –

PCR Amplification and CE

Pub. No. 4481788 Rev. A Translated from English Publication Number 4480794 Rev. B

Примечание. Инструкции по технике безопасности и защите от биологической опасности см. в разделе «Безопасность»

в GlobalFiler™ Express PCR Amplification Kit User Guide (Pub. no. 4477672). При работе с любым химическим соединением

необходимо ознакомиться с сертификатом безопасности материала (SDS — Safety Data Sheet) и следовать инструкциям по обращению. Используйте соответствующие защитные очки, одежду и перчатки.

Обзор продукции............................................................................................. 1 Предварительные требования.................................................................................. 1 Проведение ПЦР.............................................................................................. 1 Требования к аллельным лестницам............................................................................ 2 Требования к прибору для электрофореза.



..................................................................... 2 Анализ данных............................................................................................... 4 Ограниченная гарантия на продукцию......................................................................... 4 Обзор продукции GlobalFiler™ Express Kit (на 200 реакций — Part no. 4476609 или на 1000 реакций — Part no. 4474665) представляет собой мультиплексный тест для коротких тандемных повторов (STR — short tandem repeat), который может амплифицировать 21 аутосомный STR-локус, амелогенин, 1 STR-локус Y-хромосомы и 1 локус инсерции/делеции Y-хромосомы (Y indel). Он оптимизирован для непосредственной амплификации образцов из одного источника.

Предварительные требования

Перед началом работы:

• Соберите образцы:

– Образцы крови или буккального эпителия, собранные на обработанную бумагу-основу (описано в кратком руководстве: Pub. no. 4481770).

– Образцы крови или буккального эпителия, собранные на необработанную бумагу-основу (описано в кратком руководстве: Pub. no. 4481779).

– Образцы буккального эпителия, собранные на тупфер-основу (описано в кратком руководстве: Pub. no. 4481761).

• Разместите это руководство в том месте лаборатории, где выполняются процедуры после проведения ПЦР.

Проведение ПЦР ВАЖНО! Набор GlobalFiler™ Express Kit рекомендован для применения с термоциклером Veriti® Thermal Cycler, системой GeneAmp® PCR System 9700 с блоком для образцов с золотым (Part no. 4314878) или серебряным (Part no. N8050001) покрытием.

1. Запрограммируйте параметры термообработки.

ВАЖНО! При использовании системы GeneAmp PCR System 9700 выбирайте режим изменения температуры Max. При использовании термоциклера Veriti® Thermal Cycler выбирайте скорость изменения температуры 100 %.





ЗАПРЕЩАЕТСЯ работать в режиме эмуляции 9600.

–  –  –

ВАЖНО! При использовании термоциклера 9700 с блоком для образцов с серебряным или золотым покрытием поместите подушку для надавливания MicroAmp® Compression Pad (Part no. 4312639) на верхнюю часть планшета, чтобы дополнительно способствовать предотвращению испарения во время термической обработки. Термоциклер Veriti® Thermal Cycler не требует подушки для надавливания.

3. Запустите анализ.

4. По завершении анализа сохраните амплифицированные ДНК.

–  –  –

ВАЖНО! Защищайте амплифицированные материалы от воздействия света.

Требования к аллельным лестницам Чтобы точно определить генотип образца, необходимо анализировать образец с аллельной лестницей вместе с неизвестными образцами.

–  –  –

ВАЖНО! Изменения температуры в лаборатории могут привести к изменениям в скорости миграции фрагментов и вариативности размеров в анализах. Рекомендуемая выше частота инъекций аллельных лестниц учитывает нормальную вариативность скорости анализа. Однако для определения частоты инъекций аллельных лестниц с целью обеспечения точности определения генотипа всех образцов рекомендуется провести внутренние валидационные исследования в конкретной лаборатории.

Для определения генотипа крайне важно проводить анализы с аллельными лестницами в тех же условиях, что и циклы с обычными образцами. Причина заключается в том, что значения размера, получаемые для одного и того же образца, могут отличаться для приборов с разными полимерными матриксами и параметрами электрофореза.

Требования к прибору для электрофореза Требования к приборам 3130 Series (перед использованием активируйте лицензию на 6 красителей согласно инструкциям в руководстве пользователя)

–  –  –

Выполнение электрофореза Образцы для электрофореза готовят непосредственно перед загрузкой.

1. Рассчитайте объем формамида Hi-Di™ Formamide и размерный стандарт, необходимые для подготовки образцов:

–  –  –

ВАЖНО! Объем размерного стандарта, указанный в таблице, является рекомендованным. Необходимый объем размерного стандарта определяют на основании экспериментов и результатов.

2. С помощью пипетки поместите необходимые объемы компонентов в полипропиленовую пробирку соответствующего размера.

3. Перемешайте содержимое пробирки вихревым способом, затем проведите короткое центрифугирование.

4. В каждую лунку реакционного планшета MicroAmp® Optical 96-Well Reaction Plate добавьте:

• 10 мкл смеси формамида и размерного стандарта;

• 1 мкл продукта ПЦР или аллельной лестницы.

Примечание. В пустые лунки добавьте 10 мкл формамида Hi-Di™ Formamide.

5. Герметизируйте реакционный планшет с помощью соответствующей мембраны, затем проведите его короткое перемешивание вихревым способом и центрифугирование, чтобы содержимое каждой лунки перемешалось и осело на дне.

6. Нагревайте реакционный планшет в термоциклере в течение 3 минут при 95 °C.

7. Немедленно поместите планшет на лед на 3 минуты.

8. Поместите планшет на автоматический пробоотборник.

9. Запустите электрофорез.

Анализ данных Инструкции по настройке GeneMapper® ID-X Software для анализа данных см. в GlobalFiler™ Express PCR Amplification Kit User Guide (Pub. no. 4477672), GeneMapper® ID-X Software v1.4 New Features and Installation Procedures User Bulletin (Pub. no. 4477684) или GeneMapper® ID-X SoftwareVersion 1.0 Getting Started Guide (Pub. no. 4375574).

Ограниченная гарантия на продукцию Life Technologies Corporation и/или ее аффилированные компании предоставляют гарантию на свою продукцию в таком виде, как она представлена в общих условиях и положениях продажи Life Technologies на сайте Life Technologies по адресу www.lifetechnologies.com/termsandconditions. При возникновении вопросов обратитесь в Life Technologies по адресу www.lifetechnologies.com/support.

Только для криминалистических экспертиз или определения отцовства.

Информация в настоящем руководстве может быть изменена без уведомления.

ОТКАЗ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ. LIFE TECHNOLOGIES CORPORATION И/ИЛИ ЕЕ АФФИЛИРОВАННЫЕ КОМПАНИИ ОТКАЗЫВАЮТСЯ ОТ ВСЕХ ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ

ГАРАНТИЙ В ОТНОШЕНИИ НАСТОЯЩЕГО ДОКУМЕНТА, В ЧАСТНОСТИ ГАРАНТИЙ КОММЕРЧЕСКОЙ ПРИГОДНОСТИ, СООТВЕТСТВИЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ ИЛИ ОТСУТСТВИЯ

НАРУШЕНИЙ ЧЬИХ-ЛИБО ПРАВ. В МАКСИМАЛЬНОМ ОБЪЕМЕ, ДОПУСКАЕМОМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ, LIFE TECHNOLOGIES И/ИЛИ ЕЕ АФФИЛИРОВАННЫЕ КОМПАНИИ

ОСВОБОЖДАЮТСЯ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ, ВОЗЛАГАЕМОЙ НА НИХ ПО КОНТРАКТУ, ДЕЛИКТУ, ГАРАНТИИ ИЛИ ЛЮБОМУ СТАТУТУ ИЛИ ПО ИНОЙ ПРИЧИНЕ, ЗА КОСВЕННЫЙ,

СОПУТСТВУЮЩИЙ, НЕПРЯМОЙ, СВЯЗАННЫЙ СО ШТРАФАМИ, ПОВТОРЯЮЩИЙСЯ ИЛИ РЕЗУЛЬТИРУЮЩИЙ УЩЕРБ, СВЯЗАННЫЙ С НАСТОЯЩИМ ДОКУМЕНТОМ ИЛИ

ПРОИСТЕКАЮЩИЙ ИЗ НЕГО, В ЧАСТНОСТИ СОПРЯЖЕННЫЙ С ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ.

© Life Technologies Corporation, 2012 г. Все права защищены. Использованные в документе товарные знаки являются собственностью Life Technologies Corporation и/или ее аффилированных компаний либо их соответствующих владельцев. Windows и Windows Vista являются товарными знаками Microsoft Corporation.

Headquarters 5791 Van Allen Way | Carlsbad, CA 92008 USA | Phone +1 760 603 7200 | Toll Free in USA 800 955 6288 For support visit lifetechnologies.com/support lifetechnologies.com December 2012



Похожие работы:

«Тюрин Владимир Анатольевич МАРАЛ (CERVUS ELAPHUS SIBIRICUS SEVERTZOV, 1873) В ВОСТОЧНОМ САЯНЕ (РАСПРОСТРАНЕНИЕ, ЭКОЛОГИЯ, ОПТИМИЗАЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ) 03.02.08 – экология (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискани...»

«Флористика Маевский П. Ф. Флора средней полосы европейской части России. 10-е изд. М. : КМК, 2006. 600 c. Матвеев, Н. М. Биоэкологический анализ флоры и растительности (на примере лесостепной и степно...»

«146 Новейшая история России / Modern history of Russia. 2016. №1 А. Ю. Ильин, В. В. Канищев Экологическая обстановка в губернских (областных) центрах России и городское хозяйство в XX в. (по материалам Пензы, Рязани и Тамбова)1 Экологическая история — одно из новых направлений в российской исторической науке. Состояни...»

«Система БОС (опорно-двигательная) "Кинезис" Система биологической обратной связи "Кинезис" опорнодвигательная – это современная система психофизиологического тренинга и коррекции функциональных рас...»

«Молодёжь за чистые реки Колодцы без нитратов Руководство к действию для проведения общественного экологического мониторинга Под редакцией канд. биол. наук Д.П. Филиппенко Калининград Издательство "Бизнес-контакт"Авторский кол...»

«ОБЩЕСТВОЗНАНИЕ (ФК ГОС),6-9 КЛ Рабочая программа составлена на основе следующих документов: Закон РФ "Об образовании" Федеральный компонент государственного образовательного стандарта, утверждённый приказом Минобразования РФ от 05.03.2004 года № 1089; "Санитарно-эпидемиологические требования...»

«Министерство образования и науки РФ Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского Национальный исследовательский университет М.Н. Леонтьева, А.Н. Леонтьева › "  "“"’: "" —”“¬¤’ ¬ " ¬ —" ¬-—”“¬. “" Монография Нижний Новгород Издательство Нижегородского госуниверситета УДК 599+591.5+556.322.2 ББК Е 081.2 Л...»

«Биологические науки УДК 577.11 Новая классификация биоэлементов в биоэлементологии Полянская Ирина Сергеевна, кандидат технических наук, доцент кафедры общей и прикладной химии e-mail: poljanska69@mail.ru ФГБОУ ВПО "Вологодская государственная молочнохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина" Аннотация: предлагается новая к...»

«ОКП 42 1313 КОЛОНКА ТОПЛИВОРАЗДАТОЧНАЯ ТОПАЗ 420-21-1000/00 М Руководство по эксплуатации ДСМК.400740.420-04 РЭ Файл: D41507[6] Изменён: 03.03.2014 Отпечатан: 31.03.2014 ВНИМАНИЕ! Изготовитель колонки не несет гарантийных обязательств в случае проведения монтажных и пуско-наладочных работ организацией...»

«ВЕСТНИК ЮГОРСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА 2016 г. Выпуск 1 (40). С. 130–138 УДК 101 ЖИЗНЬ КАК КАТЕГОРИЯ ГУМАНИТАРНЫХ НАУК Т. В. Козырева Категория "жизнь" меняет свое содержание в зависимости от области применения. В биологических науках жизнь понимается как одна из форм существования материи, осущес...»








 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.