WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

«(11) (13) RU 2 536 208 C1 (51) МПК A61K 31/352 (2006.01) B82B 1/00 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕ ...»

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) (11) (13)

RU 2 536 208 C1

(51) МПК

A61K 31/352 (2006.01)

B82B 1/00 (2006.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА

ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

2013118038/15, 19.04.2013

(21)(22) Заявка: (72) Автор(ы):

Ипатова Ольга Михайловна (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента:

Тихонова Елена Георгиевна (RU), 19.04.2013 Медведева Наталья Велориковна (RU), Прозоровский Владимир Николаевич (RU),

Приоритет(ы):

Дружиловская Оксана Сергеевна (RU), (22) Дата подачи заявки: 19.04.2013 RU Худоклинова Юлия Юрьевна (RU), (45) Опубликовано: 20.12.2014 Бюл.

№ 35 Кострюкова Любовь Викторовна (RU) (56) Список документов, цитированных в отчете о (73) Патентообладатель(и):

поиске: (см. прод.) Общество с ограниченной ответственностью "ЭкоБиоФарм" (RU)

Адрес для переписки:

119121, Москва, ул. Погодинская, 10, ИБМХ к.208, Тихоновой Е.Г.

(54) КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА, ВКЛЮЧЕННОГО В

ФОСФОЛИПИДНЫЕ НАНОЧАСТИЦЫ

(57) Реферат:

Изобретение относится к медицине, а именно дигидрокверцетин при определенном к лечебно-профилактической композиции на соотношении компонентов. Вышеописанная основе дигидрокверцетина. Лечебно- композиция обладает повышенной C1 C1 профилактическая композиция на основе фармакологической активностью, низкой дигидрокверцетина в форме наночастиц токсичностью, способна выдерживать длительное размером, включающая фосфатидилхолин хранение. 3 ил., 1 табл., 4 пр.



растительного происхождения, мальтозу и (56) (продолжение):

RU 2369383 С1, 10.10.2009\par Гаврилова Л.А. Наночастицы гидрофобных природных соединений как адъюванты //Автореферат дисс. На соискание ученой степени кандид. хим. наук., Москва, 2011 RU 2372929 С1, 20.11.2009 RU

–  –  –

Изобретение относится к профилактической медицине и касается лечебнопрофилактической композиции на основе дигидрокверцетина, включенного в фосфолипидные наночастицы, состоящей из наночастиц диаметром 8-30 нм на основе растительных фосфолипидов, с включенным в них антиоксидантом дигидрокверцетином.

В настоящее время известно, что с помощью лечебно-профилактических препаратов можно (1) организовать сбалансированное питание и поддерживать необходимый жизненный тонус организма (нутрицевтики) и (2) предупреждать развитие различных патологий в организме, мягко корректировать уже имеющиеся нарушения (парафармацевтики). Применение лечебно-профилактических препаратов способствует не только оздоровлению общества и продлению жизни человека, но и играет важную роль в профилактике ряда заболеваний, таких как сердечно-сосудистые, желудочнокишечные, обменные (ожирение), онкологические. Лечебно-профилактические препараты позволяют значительно сократить прием лекарственных препаратов, особенно дорогостоящих.

С позиции патологии клеточных и субклеточных процессов, развитие многих заболеваний имеет общие патогенетические звенья, даже в тех случаях, когда клинические проявления их не однотипны. Известно, что нарушения в структуре цитоплазматических и внутриклеточных биомембран могут быть общими патогенетическими элементами многих болезненных процессов [1]. Все это обуславливает универсальность и эффективность лекарственных препаратов, направленных на репарацию поврежденных клеточных мембран, в первую очередь, препаратов на основе фосфолипидов - универсальных компонентов мембран всех типов клеток. В настоящее время такие препараты на основе «эссенциальных» фосфолипидов известны и широко применяются (Фосфоглив, Эсенциале, Липостабил, Мослецитин).

Использование фосфолипидов для получения лекарственных и лечебнопрофилактических композиций является важной и актуальной задачей. Учитывая уникальность строения фосфолипидных молекул и их важнейшую роль в функционировании клетки и организма в целом, фосфолипиды представляют собой «эссенциальную» субстанцию, обладающую фармакологическими свойствами, на основе которой могут быть разработаны и введены в медицинскую практику высокоэффективные натуральные лечебно-профилактические препараты [2, 3].

Благодаря фармакологическим свойствам дигидрокверцетина, препараты на его основе способны нормализовать работу разных клеток организма, предупреждать образование тромбов в сосудах, снижать уровень холестерина в крови, служить регулятором обмена жиров в организме, оказывать антиаллергическое, противовоспалительное, радиозащитное и сосудорасширяющее действие; укреплять стенки кровеносных сосудов, предотвращать развитие болезней сердца и печени. В топБАД по объему аптечных продаж в России в 2011 г. на 8 месте стоит «Капилар»

производителя ДИОД ОАО, содержащий дигидрокверцитин.

Выбор дигидрокверцетина для разработки композиции обусловлен, с одной стороны, широким спектром биологического действия и эффективностью, а с другой, - плохой растворимостью в воде и низкой биодоступностью.

Выходом из подобной ситуации является применение систем для транспорта биологически активных соединений в организме. Использование наносистем для транспорта таких соединений открывает возможности не только увеличить биодоступность последних, но и обеспечить пролонгирование циркуляции биологически активного соединения в кровотоке, за счет чего повышается поступление препарата в органы, ткани и клетки.

Стр.: 3 RU 2 536 208 C1

Наиболее распространенными наноносителями в настоящее время являются липосомы на основе фосфолипидов. Десятки новых липосомальных препаратов представлены на фармацевтическом рынке, еще большее их количество находится на разных стадиях клинических испытаний. Основное преимущество липосомальной транспортной наносистемы заключается в том, что липосомы за счет своей структурной организации способны осуществлять транспорт как гидрофильных, так и гидрофобных лекарственных субстанций. Диаметр частиц фосфолипидных липосомальных препаратов, как правило, составляет 100-400 нм, а форма выпуска - наноэмульсия, реже лиофилизированный порошок. Следует отметить, что, несмотря на перечисленный ряд преимуществ, размер частиц большинства из существующих на рынке липосомальных лекарств способствует их опсонизации (взаимодействие с белками-опсонинами, ускоряющими поглощение фагоцитами) и выведению из циркуляции ретикулоэндотелиальной системой. Так, показано, что снижение размера липосом в 8 раз продлевает их циркуляцию в кровотоке почти в 40 раз [4].

Фосфолипидные наночастицы, благодаря своей химической структуре, способны служить переносчиками как для растворимых, так и для нерастворимых в биологических жидкостях (гидрофобных) лекарственных препаратов. Встраивание лекарственных соединений в липидную матрицу наночастиц позволяет получить новые наноформы лекарственных препаратов с высокой эффективностью, биодоступностью и сниженными побочными действиями.

Высокая общая площадь поверхности, в сочетании с наноразмерами, создает оптимальные условия для взаимодействия таких частиц с клеткой. Кроме того, наноразмер создает уникальную возможность внедрения частиц в области щелевых межклеточных контактов, ширина которых в некоторых участках может составлять 30-50 нм. Близкие размеры, наряду с общим характером поверхности, фосфолипидных наночастиц и липопротеинов создают также оптимальные условия для их взаимодействия друг с другом. При этом фосфолипидные частицы, несущие биологически активное вещество, включаются в систему липопротеинов плазмы крови, с участием липидтранспортных белков, в результате чего молекулы липофильного лекарства вместе с фосфолипидами могут транспортироваться к частицам липопротеинов.

Из существующего уровня техники известны диспергируемые стабилизированные фосфолипидом микрочастицы, представляющие собой быстродиспергируемую твердую дозированную форму, состоящую из нерастворимого в воде соединения в виде наномерных или микромерных твердых частиц, поверхность которых стабилизирована поверхностными модификаторами, например фосфолипидом, при этом частицы диспергированы в создающей объем матрице (патент РФ 2233654). Размер получаемых частиц составляет 0,66-10,6 мкм (660-10000 нм).

Известен также способ получения субмикронных частиц водонерастворимого или плохо растворимого органического фармацевтически активного соединения, включающий стадии растворения этого соединения в смешиваемом с водой первом растворителе, смешивания этого раствора со вторым растворителем, в который может быть добавлен фосфатидилхолин, и гомогенизации, или гомогенизации в противотоке полученной предсуспензии или воздействия на нее ультразвуком (патент РФ 2272616).





Размер получаемых частиц составляет 0,1-2,46 мкм (100-2500 нм). В Европейском патенте EP 0556394 A1 описан способ получения лиофилизированного препарата для доставки лекарственных субстанций, на основе рафинированного соевого масла и рафинированного яичного фосфатидилхолина. Препарат легко растворяется в воде с образованием частиц с размером 10-100 нм и представляет собой жировую эмульсию.

Стр.: 4 RU 2 536 208 C1

Задачей настоящего изобретения является разработка технологии получения водорастворимой композиции на основе дигидрокверцетина, включенного в фосфолипидные наночастицы со средним диаметром липосомально-мицеллярных частиц до 30 нм, обладающей повышенной биологической активностью, низкой токсичностью и способной выдерживать длительное хранение.

Необходимый технический результат изобретения достигается за счет повышения растворимости дигидрокверцетина, встроенного в фосфолипидные частицы в сравнении со свободным дигидрокверцетином.

В соответствии с изобретением описывается композиция в виде фосфолипидных наночастиц размером до 30 нм, включающая фосфатидилхолин, мальтозу и дигидрокверцетин при следующем соотношении компонентов, % мас.:

Фосфатидилхолин 20-43 Мальтоз 55-78 Дигидрокверцетин 2-8 Описывается также способ получения композиции в форме наночастиц размером до 30 нм, включающей 20-43% мас. фосфатидилхолина, 55-78% мас., мальтозы, 2-8% мас., биологически активного соединения, заключающийся в том, что фосфолипид и дигидрокверцетин (гидрофобное лекарственное средство) растворяют в этаноле, отгоняют этанол, добавляют воду, суспензируют, добавляют мальтозу и полученную суспензию подвергают нескольким циклам гомогенизации под высоким давлением 800бар при температуре 40-50°C с последующей лиофилизацией.

Количество циклов гомогенизации составляет, как правило, 7-10 циклов, и рН раствора находится в пределах 6,0-7,5.

Используемый фосфатидилхолин является основным компонентом высокоочищенного растительного соевого фосфолипида, содержание фосфатидилхолина, в котором не менее 78-95% масс. Другие фосфолипидные компоненты могут содержаться в количествах, не превышающих допустимые (лизофосфатидилхолина до 4% масс, следовые количества других фосфолипидов).

В качестве вспомогательных фармакологически приемлемых веществ композиция содержит криопротектор - мальтозу для возможности получения лиофилизата, способного после растворения в физиологическом растворе или воде полностью восстанавливать свою структуру (в частности, размер частиц).

Материалы и методы

В работе использовались следующие материалы:

1. Соевый фосфолипид марки Липоид S 100 фирмы Липоид, Германия.

2. Мальтозы моногидрат фирмы MERCK, Германия.

3. Дигидрокверцетин («Лавитол (дигидрокверцетин)»)

4. Вода для инъекций (по ФС №42-4587-95).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Технологические этапы получения Получение первичной (грубой) эмульсии.

Навески соевого фосфолипида (фосфатидилхолина) и Дигидрокверцетина добавляют к водному раствору мальтозы, гомогенизируют методом роторно-статорной гомогенизации в течение 5-10 мин при температуре 40-55°C и скоростях вращения ротора - 20000-30000 об/мин до получения однородной первичной дисперсии.

Микрофлюидизация концентрированной дисперсии. Гомогенизацию проводят с помощью микрофлюидайзера Microfluidizer Processor, MHO EN-30K (США). Первичную дисперсию, полученную на предыдущей стадии, пропускают через микрофлюидайзер Стр.: 5 RU 2 536 208 C1 под давлением 1500-2000 бар ±10%. Температуру дисперсии поддерживают в пределах 40-65°C. Процесс микрофлюидизации проводят в течение 3-7 циклов до достижения величины светопропускания рабочего раствора 40% (контролируют по светопропусканию при 660 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см).

Фильтрация фосфолипидной эмульсии. Процесс фильтрации осуществляется в тангенциальном потоке. Фильтруемая жидкость при фильтрации в тангенциальном потоке из накопительной емкости с помощью насоса подается в корпус фильтра и с большой скоростью двигается вдоль мембран. Часть жидкости проходит сквозь поры внутрь мембран. Вся чистая и отфильтрованная жидкость собирается изо всех мембран и откачивается насосом. Насос, откачивающий отфильтрованную жидкость, периодически переключается на несколько секунд в реверсивное направление, создавая гидроудар в мембране. За счет этого частицы, осевшие на поверхности мембраны, слетают с нее и увлекаются потоком загрязненной жидкости.

Розлив в поддоны. Розлив препарата осуществляется вручную в асептических условиях.

Лиофильная сушка. Продукт замораживают до -40°C, затем полки нагревают до +10°C. При вакууме 150 миллиТор продукт сублимируют в течение 30 часов. Затем температуру полок повышают до +50°C и досушивают препарат при вакууме 50 миллиТор в течение 8-10 часов.

В качестве упаковки для готовых лечебно-профилактических изделий выбраны пакетики «саше».

Технологическая схема приведена на фиг.1.

Пример 2. Размер частиц Для определения размера фосфолипидных наночастиц использовали метод фотонной корреляционной спектроскопии на приборе Beckman N5 Submicron Particle Size Analyzer (Beckman Coulter, США) с использованием Contin-программ.

Протокол определения размера частиц Содержимое пакетика «саше» растворяли в 10 мл дистиллированной воды; из полученного раствора отбирали 20 мкл и переносили в кювету, содержащую 3 мл дистиллированной воды. Устанавливали кювету в прибор и измеряли интенсивность рассеяния света при угле рассеивания 90°. Температура термостатирующей ячейки 25°C, время для уравновешивания температуры в кювете - 3 мин.

Полученные данные распределения по размерам частиц для обеих композиций представлены на фиг.2.

Пример 3. Сравнение антиоксидантной активности лечебно-профилактической композиции Сравнение антиоксидантной активности разработанной композиции определяли спектрофотометрически по измерению скорости окисления дианизидинового реактива пероксидазой по возрастанию поглощения при 460 нм (=30 мМ-1 м-1).

Реакцию проводили в присутствии рибофлавина для инициации окисления по радикальному пути.

Дигидрокверцетин и его фосфолипидный аналог добавляли в среду инкубации перед добавлением перекиси водорода, запускающей процесс окисления. Скорость окисления в отсутствии антиоксидантов принимали за 100%. Введение в среду инкубации антиоксидантов снижает скорость окисления дианизидинового реактива. Результаты представлены на фиг.3.

Пример 4. Антигипоксическое действие дигидрокверцетина Антигипоксическое действие антиоксидантов изучали на модели острой гипоксии

–  –  –

Как видно из данных, при применении исследуемой лечебно-профилактической композиции существенно увеличивалось время жизни мышей (почти в 2 раза), при этом повышение уровней малонового диальдегида и гидроперекисей липидов в ткани мозга, а также снижение каталазной активности ткани мозга было достоверно меньше, чем в группе контроля. Это свидетельствует об увеличении резервной антиокислительной активности мозга.

Перечень чертежей, использованных в описании Фиг.1. Технологическая схема производства дигидрокверцетина, включенного в фосфолипидные наночастцы.

Фиг.2. Полидисперсное распределение фосфолипидных частиц по объему для композиции, содержащей Дигидрокверцетин.

Фиг.3. Снижение скорости окисления дианизидинового реактива в присутствии антиоксидантных композиций и свободных субстанций.

Литература

1. Платова О.М. Фосфоглив: Механизм действия и применение в клинике//ГУ НИИ биомедицинской химии РАМН, 2005-318 с.

2. Кочеткова, А.А. и др. Современная теория позитивного питания и функциональные продукты // Пищевая промышленность. - 1999. - №4. - С.7-10.

3. Колеснов А.Ю. Биохимические системы в оценке качества продуктов питания.

М.: Пищевая промышленность, - 2000.

4. Drummond DD, Meyer О, Hong К, Kirpotin DB, Papahadjopoulos D: Optimizing liposomes for delivery of chemotherapeutic agents to solid tumors. Pharmacol. Rev. 51, 691-743 (1999).

5. Руководство по физиологии. Экологическая физиология человека. Адаптация человека к экстремальным условиям среды. Под ред., О.Г. Газенко. М., «Наука», 1979, с.333-336.

–  –  –

6. Руководство к практическим занятиям по патологической физиологи. Под ред.

О.М. Павленко. М., «Медицина», 1974, с.174-175.

7. Tyson С.А., Luman K.D., Stephens RJ Age-related differences in G-SH-shuttle enzymes in NO2- or O3-exposed rat lungs - Arch. O3. Env. Health, 1982, Vol.37., No 3, p.167-176.

5 8. Методы исследований в профпатологии. Под ред. О.Г. Архиповой. М., 1988, с.156Современные методы в биохимии. Под ред. В.Н. Ореховича. М., «Медицина», 1977, с.62-64.

Похожие работы:

«RU 2 451 418 C1 (19) (11) (13) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (51) МПК H04M 17/02 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21)(22) Заявка: 2010146386/08, 26.03.2009 (72) Автор(ы): КАЙ Йиган (US), (24) Дата начала отсчета срока действия патента: ЛЮ Чунци...»

«RU 2 391 262 C1 (19) (11) (13) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (51) МПК B64D 43/00 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К...»

«RU 2 415 870 C2 (19) (11) (13) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (51) МПК C07K 16/22 (2006.01) A61P 27/02 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21)(22) Заявка: 2008140947/10, 16.03.2007 (72) Автор(ы): Е Вэйлань (US), (24) Дата начала отсче...»

«ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "БЕЛГОРОДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ" (НИУ "БелГУ) 18.05.2016...»

«1. "ИНТЕЛЛЕКТ"Задачи: 1. Определить круг реальных учебных возможностей ученика, его ближайшую зону развития;2. Создать условия для продвижения учащихся в интеллектуальном развитии;3. Формировать культуру...»

«RU 2 451 652 C2 (19) (11) (13) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (51) МПК C06B 25/18 (2006.01) C06B 21/00 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ (21)(22) Заявка: 201...»

«СТРАТАГЕМЫ & ИНИЦИАЦИИ ГЕНИЯ В ДРЕВНЕРУССКИХ КУЛЬТАХ СТРАТАГЕМЫ ИНИЦИАЦИИ ГЕНИЯ В ДРЕВНЕРУССКИХ КУЛЬТАХ Алексей Меняйлов Москва "Белые альвы" ББК 84.4-6 М50 А лексей М ен я й л о в М50 Стратагемы инициации гения в древнерус­ ских культах. М.: Белые альвы, 2005. 208 с. ISBN 5-7619-0209-5 Волк — это не животное. Или не совсем...»

«ISNN 1812-1853 • РОССИЙСКИЙ ПСИХОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ • 2009 ТОМ 6 № 5 ОСОБЕННОСТИ АДАПТАЦИИ МОЛОДЫХ СПЕЦИАЛИСТОВ К СПЕЦИФИКЕ ОРГАНИЗАЦИИ Туливетров С.Н. Рассматриваются особенности адаптации молодых специалистов научноисследовательских организаций оборонно-промы...»

«УДК 173.6:[316.482-053.6-055.5] А. А. Нифонтова, Е. И. Гаршина A. A. Nifontova, E. I. Garshina ФГБОУ ВПО "Елецкий государственный университет им. И. А. Бунина", г. Елец Bunin Yelets State University, Yelets anastasiya.nifon@mail.ru ПРОБЛЕМЫ ВЗАИМООТНОШЕ...»










 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.