WWW.LIB.KNIGI-X.RU
БЕСПЛАТНАЯ  ИНТЕРНЕТ  БИБЛИОТЕКА - Электронные материалы
 

«(11) (13) RU 2 530 620 C1 (51) МПК G01N 30/90 (2006.01) G01N 33/15 (2006.01) G01N 33/02 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ 2013117 ...»

РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) (11) (13)

RU 2 530 620 C1

(51) МПК

G01N 30/90 (2006.01)

G01N 33/15 (2006.01)

G01N 33/02 (2006.01)

ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА

ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ

2013117180/15, 30.07.2013

(21)(22) Заявка: (72) Автор(ы):

Тринеева Ольга Валерьевна (RU), (24) Дата начала отсчета срока действия патента:

Сафонова Елена Федоровна (RU), 30.07.2013 Сливкин Алексей Иванович (RU)

Приоритет(ы):

(73) Патентообладатель(и):

(22) Дата подачи заявки: 30.07.2013 Федеральное государственное бюджетное RU образовательное учреждение высшего (45) Опубликовано: 10.10.2014 Бюл. № 28 профессионального образования (56) Список документов, цитированных в отчете о "Воронежский государственный поиске: ХмельницкийИванКонстантинович. университет" (ФГБОУ ВПО "ВГУ) (RU) Совершенствование электрофоретического и хроматографического определения водои жирорастворимых витаминов. 2007, автореферат диссертации. Найдено из Интернет15.04.2014.http://www.dissercat.com/ content/sovershenstvovanieelektroforeticheskogo-ikhromatograficheskogo-opredeleniya-vodo-izhirora#ixzz2yx3kAGED. (см. прод.)

Адрес для переписки:

C1 394006, г.Воронеж, Университетская пл., 1, C1 ФГБОУ ВПО "ВГУ", ЦКТ

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИРОРАСТВОРИМЫХ ВИТАМИНОВ А, D2, Е И В-КАРОТИНА



ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

–  –  –

(56) (продолжение):

Карцова Л.А. Совместное определение водо- и жирорастворимых витаминов высокоэффективной тонкослойной хроматографией с использованием водно-мицеллярной подвижной фазы / Л.А.

Карцова, О.А. Королева // Журн. Аналитической химии. — 2007. — Т. 62. - N 3. - С. 281 " 286.

ГолубицкийГ.Б.Одновременноеколичественноеопределениеводо-ижирорастворимыхвитаминов и консервантов с использованием колонки нового типа CHROMOLITH / Г.Б. Голубицкий // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. — 2008. — Т.74. — N3. — С. 10-15.. RU 2349913 C1, 20.03.2009. ГОСТ 30417-96. Масла растительные. Методы определения массовых долей витаминов А и Е

–  –  –

Изобретение относится к способам стандартизации лекарственных препаратов, биологически активных добавок, премиксов, лекарственного растительного сырья, растительных масел, масляных экстрактов, изделий пищевой, химической и косметологической отраслей промышленности по содержанию основных жирорастворимых витаминов и может быть использовано в фармацевтической, химической, косметологической и пищевой отраслях промышленности для определения подлинности и степени чистоты жирорастворимых витаминов A, D2, E и -каротина при совместном присутствии в одно- и многокомпонентных препаратах.

Известны способы идентификации, разделения и количественного определения 10 жирорастворимых витаминов в субстанции, одно- и многокомпонентных лекарственных формах, премиксах, биологически активных добавках, культурах микроорганизмов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Недостатком ВЭЖХ является нехватка квалифицированных кадров, дорогостоящего оборудования, реактивов и материалов, а также стандартных образцов. Одним из 15 главных недостатков при определении витаминов с помощью ВЭЖХ остается подготовка образца для количественного определения, занимающая часто до 90% затрат времени анализа. В известных методах определения жирорастворимых витаминов методом ВЭЖХ подготовка образца к анализу остается такой же, как и в физикохимических методах, включая щелочной гидролиз или обработку раствора препарата 20 диметилсульфоксидом при нагревании, четырехкратную экстракцию эфиром или гексаном, промывку водой, сушку натрием сернокислым, отгонку экстракта до сухого остатка и растворение его в соответствующем растворителе для получения необходимой концентрации для проведения анализа. Все эти операции значительно затрудняют и удлиняют время проведения анализа, снижают его точность [Козлов Э.И., Солунина 25 И.А., Любарева М.Л., Надточий М.А., Хим. - фарм. журн., №10, Том 37, 50-53 (2003)].

Нашли широкое применение также спектральные методы анализа, такие как фотоэлектроколориметрия, прямая и дифференциальная спектрофотометрия, основанные на измерении оптической плотности исследуемых растворов после добавления каких-либо цветореагентов [Мелентьева Г.А. Фармацевтическая химия 30 некоторых природных веществ с сильным биологическим действием, Изд-во мед.

института им. И.М. Сеченова, Москва (1984), сс. 48-56; Экспериментальная витаминология, под ред. Ю.М. Островского, «Наука и техника», Минск (1979), сс. 80Раствор Ретинола ацетата в масле 33000 ME в капсулах». ФС 42-7811-97;

Государственная фармакопея XI изд. Медицина, Москва (1990), Вып. 2; Государственная 35 фармакопея СССР, 10-е изд., Медицина, Москва (1968); Государственная фармакопея Российской Федерации XII изд. - Часть 1. - М.: Изд-во: Научный центр экспертизы средств медицинского назначения, 2008. - 704 с.; ФС 42-2798-99. Таблетки «Глутамевит», покрытые оболочкой; ГОСТ 30417-98. «Растительные масла. Методы определения массовых долей витаминов А и Е», сс. 102-109; «Эргокальциферол раствор в масле 40 0,5%». ФСП 42-0008018000; ВФС 42-3128-98. «Драже бета-каротина 0,0025»].

Недостатками указанных спектральных способов являются: громоздкость и длительность определений, нестабильность окрашенных продуктов цветных реакций, недостаточная чувствительность и селективность, невозможность определения витаминов A, E, D2 и -каротина при совместном присутствии, а также большие ошибки определения.

Известно использование тонкослойной хроматографии (ТСХ), которая, обладая всеми преимуществами хроматографических методов, находит широкое применение ввиду своей экспрессности, доступности, достаточной чувствительности, селективности,

Стр.: 4 RU 2 530 620 C1

малой стоимости и простоты выполнения анализа [Ю. Кирхнер. Тонкослойная хроматография. Мир, Москва (1981), сс. 402-407; М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец.

Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии. Мир, Москва (1980), Т. 2, с. 610; Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии. Мир, Москва (1999), 405 с.; О.Б. Рудаков, И.А. Востров, С.В. Федоров и др. Спутник хроматографиста.

Методы жидкостной хроматографии. «Водолей», Воронеж (2004), 528 с.].

Известен способ определения витамина Е и -каротина в плодах облепихи методом ТСХ [Биологически активные вещества лекарственных растений / Георгиевский В.П., Комисаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. // Новосиб.: Наука, 1990. 333 с.; Богачева Н.Г., Кокушкина Н.П., Сокольская Т.А. Стандартизация лекарственного сырья облепихи крушиновидной, Фармация. 2001. №1. С.27-29], согласно которому точную навеску высушенных плодов 2-5 г растирают в сухой ступке с 10% раствором КОН в 96%-ном этаноле, переносят в колбу, добавляя 100 мг пирогаллола, ставят на 1 ч на горячую водяную баню при 80°C; экстрагируют токоферолы и каротиноиды петролейным эфиром; извлечение повторяют 4-5 раз; промытую эфирную фракцию обезвоживают прокаленным сернокислым натрием до получения прозрачного раствора, после чего петролейный эфир отгоняют в роторном вакуум-испарителе при температуре 40°C и разрежении 600-650 мм рт.ст.; сухой остаток растворяют в 3-5 мл бензола; бензольный раствор используют для хроматографирования; пластинку делят на две части, на левую половину наносят полоской 1-2 мл бензольного раствора неомыляемых веществ облепихи, на правую - бензольный раствор -токоферола, растворитель - хлороформ, разделение веществ производят в темноте; продолжительность хроматографирования около 2 часов; левую половину каждой пластинки закрывают бумагой, а правую опрыскивают 0,5%-ным спиртовым раствором o-фенантролина и 0,2%-ным спиртовым раствором хлорного железа.

Недостатком известных способов определения жирорастворимых витаминов при совместном присутствии методом ТСХ является длительность процесса в связи с проведением нескольких аналитических процедур - идентификация витаминов проводится в различных хроматографических системах с использованием различных проявителей по отдельности, что значительно увеличивает время анализа, а также затраты на реактивы и материалы.

В методе фронтальной ТСХ применяется двукратное элюирование одной хроматографической пластинки в разных по составу подвижных фазах с разной величиной пробега элюентов, таким образом, на хроматограмме получают две или более (в зависимости от количества использованных систем) линий фронта растворителя [Карцова Л.





А. Совместное определение водо- и жирорастворимых витаминов высокоэффективной тонкослойной хроматографией с использованием водномицеллярной подвижной фазы / Л.А. Карцова, О.А. Королева // Журн. Аналитической химии. - 2007. - Т. 62. - №3. - с.281-286].

В научной фармацевтической и медицинской литературе способов, позволяющих идентифицировать и количественно определять жирорастворимые витамины при совместном присутствии методом фронтальной ТСХ, не выявлено.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа определения подлинности, степени чистоты и количественного содержания жирорастворимых витаминов A, D2, E и -каротина при совместном присутствии в сложных смесях за одну аналитическую процедуру методом фронтальной ТСХ.

Технический результат заключается в упрощении и ускорении процесса определения жирорастворимых витаминов в лекарственных препаратах, лекарственном растительном

–  –  –

сырье при совместном присутствии с достаточной чувствительностью.

Технический результат достигается тем, что в способе определения жирорастворимых витаминов A, D2, E и -каротина при совместном присутствии методом тонкослойной хроматографии, включающем выделение жирорастворимых витаминов из субстанции 5 экстракцией 96%-ным этанолом, отделение спиртового экстракта витаминов с помощью делительной воронки, последовательное хроматографирование с использованием силикагелевых пластинок марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А на полимерной подложке при участии двух элюентов с различной величиной пробега, время насыщения камеры парами элюента - 20 мин, время элюирования - 55 мин; высушивание при температуре 10 не менее 80°C пластин в термостате в течение 3-5 мин, обработку пластины проявителем

- 5% спиртовым раствором кислоты фосфорномолибденовой, согласно изобретению в качестве элюентов использованы гексан:хлороформ (19:1) и гексан:хлороформ (3:1), а детектирование хроматографической зоны -каротина проводят до обработки пластины проявителем при дневном свете.

15 На фиг.1 представлены зависимости величины Rf токоферола ацетата, ретинола ацетата, эргокальциферола и -каротина от полярности элюента.

На фиг.2 представлена таблица значений величин Rf стандартных образцов витаминов A, E, D2 и -каротина.

На фиг.3 представлены линейные зависимости величины Rf жирорастворимых витаминов от значения полярности элюента.

На фиг.4 представлен вид хроматограммы 3 мкл спиртового раствора «Аекол» при фронтальном хроматографировании в системе №1 гексан-хлороформ (19:1) и системе №2 гексан-хлороформ (3:1).

На фиг.5 представлена таблица с параметрами хроматографического разделения витаминов A, E и -каротина в препарате «Аекол».

На фиг.6 представлен вид хроматограммы раствора содержимого одной капсулы «Аевит» в 10 мл спирта (точка 1 - 0,5 мкл) и смеси стандартных образцов (0,5 мкл) ретинола ацетата и (0,5 мкл) токоферола ацетата (точка 2) в системе гексан-хлороформ (3:1).

На фиг.7 приведена таблица параметров хроматографического разделения витаминов А и Е в препарате «Аевит».

На фиг.8 представлен вид хроматограммы 5 мкл спиртового раствора облепихового масла при фронтальном хроматографировании в системах №1 гексан-хлороформ (19:

1) и №2 гексан-хлороформ (3:1).

На фиг.9 приведена таблица параметров хроматографического разделения витаминов D2, E и -каротина в препарате «Облепиховое масло».

На фиг.10 приведена таблица с указанием пределов определения исследуемых витаминов с помощью выбранных детектирующих реагентов.

Согласно заявленному способу, навеску исследуемого препарата растворяют в этаноле с последующим хроматографированием с использованием силикагелевых пластинок марки «Sorbfil» 510 см с полимерной подложкой ПТСХ-П-А; элюент 1 гексан:хлороформ (19:1) - пробег 8 см; элюент 2 - гексан:хлороформ (3:1) - пробег 6 см; проявитель - 5%-ный спиртовый раствор кислоты фосфорномолибденовой; время насыщения камеры парами элюентов 1 и 2 - 20 мин; общее время элюирования - 55 мин;

время выдерживания пластинки в термостате при t°80°C - 3-5 минут.

Оптимальный объем пробы - 10 мкл спиртового раствора -каротина с содержанием 1 мг/мл, по 0,5 мкл спиртовых растворов витаминов A, E и D2 с содержанием 1 мг/мл,

Стр.: 6 RU 2 530 620 C1

10 мг/мл и 0,035 мг/мл соответственно.

Для выбора оптимальных условий хроматографического разделения эргокальциферола (витамин D2), -каротина, ретинола ацетата (витамин Е) и токоферола ацетата (витамин А) было исследовано влияние полярности элюентов на 5 хроматографическую подвижность витаминов в тонком слое. В эксперименте изучено более десяти типов элюирующих систем с различными значениями полярности.

Для каждой элюирующей системы рассчитаны полярность P` по известной методике [Гейсс Ф. Основы тонкослойной хроматографии. Мир, Москва (1999), 405 с.; О.Б. Рудаков, И.А. Востров, С.В. Федоров и др. Спутник хроматографиста. Методы жидкостной 10 хроматографии. «Водолей», Воронеж (2004), 528 с.] и величина Rf (отношение расстояния, пройденного пятном, к расстоянию, пройденному растворителем). Как видно из данных, представленных на фиг.1 и фиг.2, для достижения оптимальных величин Rf -каротина необходимо использовать элюенты с малыми значениями полярности P` (до 0,3 ед.).

Тогда как витамины A, E и D2 при таких значениях полярности прочно удерживаются сорбентом, оставаясь на линии старта. Для них оптимальные величины Rf достигаются в системах гексан-хлороформ (5:1), гексан-хлороформ (4:1), гексан-хлороформ (3:1), когда полярность P` подвижной фазы находится в интервале 0,73-1,1. Это означает, что за одну процедуру хроматографирования разделить данные витамины не представляется возможным. Однако предлагаемый способ разделения и определения жирорастворимых витаминов A, D2, E и -каротина при совместном присутствии с использованием фронтального элюирования позволяет решить данную задачу.

Был выбран интервал значений P` элюента, в котором данные зависимости приобретают линейный характер (от 0 до 0,2 ед. полярности системы для -каротина;

от 0,4 до 1,1 ед. для витамина Е (ретинола ацетата); от 0,58 до 1,47 ед. для эргокальциферола и от 0,7 до 1,5 для витамина А (токоферола ацетата)). Уравнения и коэффициенты корреляции приведены на фиг.3. С помощью предложенных зависимостей можно подбирать различные системы для разделения изучаемых жирорастворимых витаминов в тонком слое сорбента при совместном присутствии, чтобы величина Rf укладывалась в оптимальные значения. Таким образом, интервал полярностей P` элюента может варьировать в достаточно узком диапазоне от 0,05 до 0,168 ед. (для каротина); от 0,62 до 0,93 ед. (для витамина Е); от 0,76 до 1,07 ед. (для эргокальциферола) и от 0,95 до 1,26 (для витамина А) при совместном определении. Предлагаемый способ разделения жирорастворимых витаминов методом фронтальной ТСХ позволяет не только разделять смесь, но и достигать на хроматограммах оптимальных величин Rf.

Заявленный способ позволяет достичь четких зон округлой формы на хроматограммах жирорастворимых витаминов с оптимальным значением величины Rf, обеспечивает возможность разделения сложных смесей данных витаминов между собой и с другими биологически активными веществами.

Заявленный способ отличается достаточной чувствительностью (1·10-8 г для витамина А; 1·10-6 г для витамина Е; 7·10-9 г для витамина D2 и 1·10-5 г для -каротина), что сопоставимо по чувствительности с определением данных витаминов на приборе ВЭЖХ, а также экономичностью, доступностью и экспрессностью.

Пример 1 Заявленный способ определения жирорастворимых витаминов был апробирован на витаминном лекарственном препарате «Аекол», содержащем витамины A, E и -каротин

Стр.: 7 RU 2 530 620 C1

(ФС 42-3182-95). Выделение жирорастворимых витаминов из препарата осуществляли методом реперколяции, который заключается в следующем: навеску препарата 1,26 г (точная навеска) делили на три части по 0,42 г. Первую порцию препарата обрабатывали 96%-ным этанолом в количестве 10 мл. Смесь энергично встряхивали в течение пяти минут, добиваясь тонкого эмульгирования масляного препарата в этаноле, а затем оставляли на сутки в прохладном, защищенном от света месте в плотно укупоренном виде. Спиртовой экстракт жирорастворимых витаминов отделяли с помощью делительной воронки. Каждую последующую порцию препарата экстрагировали вытяжкой, полученной из предыдущей. При этом максимально используется растворяющая способность экстрагента, так как слабые вытяжки имеют ее запас и могут извлекать действующие вещества из необработанного материала. Полученную суммарную вытяжку в количестве 3 мкл наносили на стартовую линию хроматографической пластинки и хроматографировали в системе №1 гексан-хлороформ (19:1) (пробег 8 см), а затем в системе №2 (пробег 6 см). Затем сначала проводили детектирование хроматографической зоны -каротина при дневном свете, а потом пластину обработали проявителем - 5%-ным спиртовым раствором кислоты фосфорномолибденовой. Вид хроматограммы представлен на фиг. 4. Для каждой хроматографической зоны на хроматограмме были рассчитаны параметры хроматографического разделения: величина селективности сорбции (L) и коэффициент распределения (К). Параметры хроматографического разделения приведены на фиг.5.

Результаты свидетельствуют об удовлетворительном разделении хроматографических зон на хроматограмме (так как критерием эффективного разделения является величина L1) и правомерности использования данной методики.

Пример 2 Разработанный способ разделения и определения витаминов А и Е был апробирован на витаминном лекарственном препарате «Аевит» (ФС 42-1699-95). Так как заранее известно, что в препарате отсутствует каротин, то нет необходимости проводить фронтальное элюирование. Достаточно проводить определение в системе №2. «Аевит»

содержит значительное количество изучаемых витаминов и они хорошо извлекаются при однократной экстракции. Поэтому содержимое одной капсулы растворяли в 10 мл 96%-ного этанола, хроматографировали в системе гексан-хлороформ (3:1), обрабатывали проявителем. Высота пробега растворителя - 9 см. Вид хроматограммы раствора «Аевит» и смеси стандартных образцов ретинола ацетата и токоферола ацетата представлен на фиг.6. Для каждой хроматографической зоны на хроматограмме были рассчитаны параметры хроматографического разделения: величина селективности сорбции (L) и коэффициент распределения (К). Параметры хроматографического разделения приведены на фиг.7. Результаты свидетельствуют об удовлетворительном разделении хроматографических зон на хроматограмме (так как критерием эффективного разделения является величина L1) и правомерности использования данной методики.

Пример 3 Заявленный способ определения жирорастворимых витаминов был апробирован на растительном масле плодов облепихи, содержащем витамины D2, E и -каротин (ФС 42-3873-99). Выделение витаминов из масла осуществляли методом реперколяции, как 45 описано в примере 1. Навеску препарата 1,26 г (точная навеска) делили на три части по 0,42 г. Первую порцию масла обрабатывали 96%-ным этанолом в количестве 10 мл.

Смесь энергично встряхивали в течение пяти минут, добиваясь тонкого эмульгирования масляного препарата в этаноле, а затем оставляли на сутки в прохладном, защищенном

Стр.: 8 RU 2 530 620 C1

от света месте в плотно укупоренном виде. Спиртовой экстракт жирорастворимых витаминов отделяли с помощью делительной воронки. Каждую последующую порцию препарата экстрагировали вытяжкой, полученной из предыдущей. Полученную суммарную вытяжку из масла в количестве 5 мкл наносили на стартовую линию хроматографической пластинки и хроматографировали в системе №1 гексан-хлороформ (19:1) (пробег 8 см), а затем в системе №2 (пробег 6 см). Затем сначала проводят детектирование хроматографической зоны -каротина при дневном свете, а потом пластину обрабатывают проявителем - 5%-ным спиртовым раствором кислоты фосфорномолибденовой. Вид хроматограммы представлен на фиг.8. Для каждой хроматографической зоны на хроматограмме были рассчитаны параметры хроматографического разделения: величина селективности сорбции (L) и коэффициент распределения (К). Параметры хроматографического разделения приведены на фиг.9.

Результаты свидетельствуют об удовлетворительном разделении хроматографических зон на хроматограмме (так как критерием эффективного разделения является величина L1) и правомерности использования данной методики.

Формула изобретения Способ определения жирорастворимых витаминов A, D2, E и -каротина при совместном присутствии методом тонкослойной хроматографии, включающий выделение жирорастворимых витаминов из субстанции экстракцией 96%-ным этанолом, отделение спиртового экстракта витаминов с помощью делительной воронки, последовательное хроматографирование с использованием силикагелевых пластинок марки «Sorbfil» ПТСХ-П-А на полимерной подложке при участии двух элюентов с различной величиной пробега, время насыщения камеры парами элюента - 20 мин, время элюирования - 55 мин; высушивание при температуре не менее 80°C пластин в термостате в течение 3-5 мин, обработку пластины проявителем - 5%-ным спиртовым раствором кислоты фосфорномолибденовой, отличающийся тем, что в качестве элюентов использованы гексан : хлороформ (19:1) и гексан : хлороформ (3:1), а детектирование хроматографической зоны -каротина проводят до обработки пластины проявителем при дневном свете.

Похожие работы:

«Наталья Курчакова -Наталья Курчакова студентка специализации "Социальная психология" факультета психологии СПбГУ habbenula@yandex.ru ФОРМЫ САМОПРЕЗЕНТАЦИИ В БЛОГЕ1 On the Internet, nobody Knows You're a Dog2 Как ни парадокс...»

«О чём пел и плакал смоленский соловей в английском парке Глинок "Во многих отношениях Глинка имеет в русской музыке такое же значение, как Пушкин в русской поэзии. Оба – великие таланты, оба – родоначальники нового русского художественного творчества,.оба создали новый русский язык – один в поэзии, другой в музыке", – так нап...»

«Этнопсихолингвистика Этнопсихолингвистика – это наука, изучающая психологические типы представителей разных этносов. Данная наука сложилась на стыке психологии, лингвистики, с...»

«Франк Ж. ФАРНЕЛЬ ЛОББИРОВАНИЕ стратегии и техники вмешательства Моей семье Если Вы еще не получаете регулярно информацию о появлении наших новых книг, Вам достаточно отправить Вашу визитную карточку в: LES DITIONS D’O...»

«Кирилл Савченков Родился в 1987, в Москве Живет и работает в Москве сайт: kirillsavchenkov.com savchenkov.tumblr.com почта: kirill.savchenkov@gmail.com +7 (903) 1013790 Кирилл Савченков работает с темой постсоветских спальных районов, исследует современную культуру, психологию и опыт жителя окраин. Художник ра...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ "САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.Г. ЧЕРНЫШЕВСКОГО" Кафедра общей и социальной психологии Психоло...»

«ВРЕМЕННОЙ ДЕЙКСИС В СЕМАНТИКЕ РАЗНЫХ ЧАСТЕЙ Р Е Ч И ЕЛЕНА ЕРЗИНКЯН Развитие лингвистической науки на современном этапе характеризуется всевозрастающим интересом к проблемам лексической семантики. Все шире развертываются исследования семантики языковых единиц, направленные на изучение...»










 
2017 www.lib.knigi-x.ru - «Бесплатная электронная библиотека - электронные материалы»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.